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SCIEX中国本土化产品Triple Quad 6500+系统测定血浆中的人参皂苷Rg1、绿原酸和山奈酚

来源:SCIEX(爱博才思) 更新时间:2025-02-08 14:00:13 阅读量:184
导读:SCIEX中国本土化产品Triple Quad? 6500+系统测定血浆中的人参皂苷Rg1、绿原酸和山奈酚

本土化产品

作为全球生命科学分析技术的创新者,在2024年10月30日宣布在中国本土化生产 Triple Quad 6500+系统和QTRAP 6500+系统。这标志着本土化战略的又一个里程碑,自2023年在中国苏州成功交付本土化 Triple Quad 4500系统、QTRAP 4500系统和 5500+系列质谱以来, 6500+系列高端质谱的2个型号也已经实现中国本土生产。



6500+系统是高端三重四极杆/QTRAP质谱产品,在复杂基质中能为不同类型分子提供卓越的灵敏度。它为具有挑战性的检测设计,具备优异的可靠性和稳健性。其主要特点包括快速极性切换和多反应监测(MRM)速度,可兼容更灵活的色谱方法并提高检测通量。无论是利用四极杆功能还是线性离子阱QTRAP增强子离子扫描功能,都能为样品的鉴别、表征和定量带来新颖的发现。


背景


人参皂苷 Rg1(Ginsenoside Rg1)是从人参根茎中提取的主要活性成分之一,是属于原人参三醇型皂苷,它在维持血液循环、改善心肌缺血、抗心律失常、抗休克、镇静、提高智力、抗衰老、抗氧化、抗细胞增殖和抗肿瘤等方面均显示出一定的药理作用。绿原酸(Chlorogenic acid)是由咖啡酸与奎尼酸生成的缩酚酸,广泛存在于多种植物的根、茎、叶和果实中,具有调节糖脂代谢、保肝、抗肿瘤、抗炎、抑菌等多种生物学功能。山奈酚(Kaempferol)属于天然黄酮类化合物,广泛存在于植物根、叶和果实中,具有抗氧化、抗炎、抗癌和预防心血管疾病等多种药理活性。


本文采用中国本土产品 Triple Quad? 6500+系统,建立对血浆中的人参皂苷Rg1、绿原酸和山奈酚的快速定量测定方法。


实验方法


液相方法

色谱柱:Phenomenex Kinetex C18 (2.6μm 100*2.1mm)

流动相:A: 水(含0.1%甲酸,10μM乙酸钠);

B: 乙腈+甲醇("EN-US">0.1%甲酸,10μM乙酸钠)

流速:0.4 mL/min;


梯度洗脱

表1. 液相梯度条件


质谱方法

数据采集方法:MRM(多反应监测)

离子源:ESI源正模式/负模式

气帘气CUR:35psi

IS电压:+5500V/-4500V

源温度 TEM:550℃

雾化气Gas1:60psi

辅助气Gas2:50psi

碰撞气 CAD:Medium


多反应监测离子通道如表2

表2. MRM离子对信息


实验结果


特异性好,无残留

空白试剂中MRM离子通道无干扰,方法专属性好,特异性高,进高浓度样品后空白试剂无残留。


点击查看大图

图1 典型色谱图(上图为空白血浆基质提取离子色谱图,下图为0.2ng/mL基质加标样品提取离子色谱图)


灵敏度高,线性关系好

配制大鼠血浆标准工作溶液至0.02 ng/mL,0.05 ng/mL, 0.2 ng/mL,0.5 ng/mL,1 ng/mL,5 ng/mL,10 ng/mL和20 ng/mL,经过蛋白沉淀,离心上机分析。血浆基质人参皂苷Rg1的定量下限(LOQ)为0.02ng/mL,绿原酸和山奈酚的LOQ为0.2ng/mL。图2为三种化合物大鼠血浆的线性范围、线性方程和相关系数,线性回归系数r均大于0.995,满足检测要求。


点击查看大图

图2. 绿原酸、山奈酚和人参皂苷Rg1标准曲线和线性回归方程,

线性相关系数r>0.995


回收率好

取6份大鼠空白血浆,平行制备三份加标溶液,浓度分别在LQC和HQC作为质控样品,净化液上机检测。加标样品的准确度均在95.89-111.74%,平行样品的RSD%<5%,准确度和重现性均满足测试要求,测试结果良好。


表3. 3种化合物不同添加浓度样本回收率表

点击查看大图


实验方法及特点优势


采用蛋白沉淀法对血浆进行前处理,结合Kinetex C18色谱柱,采用梯度洗脱,对三种中药活性成分同时进行定量分析。本土产品Triple Quad? 6500+拥有跟进口产品一样的性能,整套系统具有非常强的抗基质干扰能力,灵敏度高,进而可以简化前处理的流程,且回收率满足要求,仪器重复性好。


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