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瑞孚迪Flexdrop Plus,加速高参数流式细胞术!

来源:珀金埃尔默医学诊断产品(上海)有限公司 更新时间:2025-12-24 10:45:24 阅读量:54
导读:瑞孚迪Flexdrop Plus,加速高参数流式细胞术!


在过去十年中,可检测的细胞标志物数量及荧光染料组合种类的增加,推动流式细胞术取得了显著进步,使其能够实现高参数深度免疫分析。荧光染料数量的持续增长也带来了新的技术挑战:在染色混合液中添加更多荧光染料,会使移液操作更费力、耗时,且易出错。

此外,高参数流式细胞术还需设置额外对照,包括细胞与微球(beads)上的单一染色对照及FMO对照(荧光减一对照)。特别是在高参数流式细胞术及实验组合(panel)优化中,FMO对照对验证与质量控制至关重要。然而,由于所需FMO对照具有复杂性高、数量多的特点(每种荧光染料对应一种FMO对照),制备全套FMO对照是一项极为耗时的工作。因此,选择合适的自动化设备对流式细胞术染色混合液的制备具有重要价值。


瑞孚迪(Revvity)FlexDrop? Plus是一款非接触式分液器,具有低死体积、高效分配及液滴验证等特点,其通过压力作用将液滴从源孔分配至目标孔,是制备流式细胞术染色混合液的理想设备。该仪器可在20分钟内完成25色标记小鼠实验组合的全套染色混合液、25种FMO对照,以及细胞与微球单一染色液的制备,且仅需1 μL死体积。

快速、精确、灵活的液体分



以100滴/秒的速度生成大小在8至50纳升(nL)之间的单个液滴,研究人员可以轻松快速地实现低体积液体分配。FlexDrop Plus非接触式分液器使用正压和液滴验证来实现可靠和精确的液体转移。


死体积为1 μL,可节省贵重的试剂;


内置液滴验证,确保实验可重复性;


无缝衔接,在测定方法开发及优化或高通量筛选的应用中,能够将任何体积的液体从任何来源孔转移至任何目标孔;


可兼容自动化整合;


分配8-100nL液体时,CV<8%;分配超过100nL时,CV<5%。



低死体积

在自动化分液设备中,死体积是一项至关重要的指标,指分液后残留且无法有效利用的液体体积。使用抗体等昂贵试剂时,最大限度降低死体积对提升成本效益至关重要。FlexDrop Plus仅需1 μL死体积,该优势尤为突出。实验中可设定1 μL基础死体积加理论分配体积5%的额外死体积,以避免源液提前耗尽。



高效率

针对25色标记实验组合,我们测试了微球与细胞样本的全套染色混合液、所有FMO对照及单一染色液的分液耗时:人工使用移液器操作约需3小时,自动化移液工作站约需1.5小时,而FlexDrop Plus仅需20分钟即可完成全部分液工作。



液滴验证

关于分液的可靠性,FlexDrop Plus主要优势是具有液滴验证功能。当仪器从源孔喷出液滴时,系统会实时确认每个液滴是否成功从源孔喷出。分液结束后,设备将生成报告,明确标注缺少抗体的目标孔——此类情况通常源于源孔内试剂体积不足导致的液体耗尽。重新补充源液后,FlexDrop Plus可自动完成漏加孔的补充分注,纠正操作误差。



合适的源液体积

FlexDrop Plus单孔最大可容纳的源液体积为80 μL,该容量若无法满足需求,可通过将抗体分装至多个源孔解决。此外,FlexDrop Plus的升级型号已支持单孔500 μL的源液容量,进一步解决了大体积试剂的分配需求。



稳定性

为测试分配过程中(如孔内压力、40°C环境等可能存在的条件)荧光染料是否会发生改变,我们比较了不同串联染料在手动分配与FlexDrop Plus自动分配后的光谱差异。结果显示,使用FlexDrop Plus分配后,4种串联荧光染料(APC-Cy7、APC-Fire810、BV785、PE-Cy7)均未出现串联结构降解或光谱异常(如下图)。






得益于死体积小、可接受的源体积、液滴验证以及快速分配等优势,FlexDrop Plus被选为分配抗体以制备流式细胞术染色混合液的最佳仪器。


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