针对深色蔬菜基质的升级配方QuEChERS净化管"（Copure QuEChERS净化管）

1.1蔬类样品提取

分别准确称取粉碎后的试样10.0 g（精确至0.001 g）于50 mL离心管中，加入乙腈10 mL及一颗陶瓷均质子，涡旋振荡1 min，加入QuEChERS萃取盐包4g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g柠檬酸钠二水合物、0.5g柠檬酸二钠盐倍半水合物（货号：COQ050010H），盖上离心管盖，立即摇散，剧烈振摇1 min，再涡旋混合5 min，Z后以4500 r/min离心5min。上层乙腈层待净化。

1.2样品净化

分别取上述待净化液6 mL至15 mL QuEChERS净化管（货号：COQ015166H），涡旋振荡1 min，以4500 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm尼龙滤膜，供LC/MSMS测试。

精密移取上清液2 mL置氮吹仪于40 ℃水浴锅浓缩至近干，加入20μL环氧七氯内标（浓度为5mg/L），加入1mL乙酸乙酯复溶，涡旋混匀，过0.22 μm尼龙滤膜，供GC/MSMS测试。

LC/MSMS：称取试样按照上述步骤一操作，按照供试品溶液的制备方法处理至“分别取上述待净化液6 mL至15 mL QuEChERS净化管，涡旋振荡1 min，以4500 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm尼龙滤膜”得到空白基质溶液。精确吸取一定量的混合标准溶液，用空白基质溶液定容至1mL，得到基质标准工作溶液。

GC/MSMS：准确移取一定量的混合标准溶液，逐级用乙酸乙酯稀释成相应的标准工作溶液。空白样品按照步骤一操作至“精密移取上清液2 mL置氮吹仪于40 ℃水浴锅浓缩至近干”，加入20μL环氧七氯内标（浓度为5mg/L），分别加入1mL上述的标准工作溶液复溶，涡旋混匀，过0.22 μm尼龙滤膜，得到基质标准工作溶液。

3.1 LC/MSMS（Thermo Fisher TQS Endura）

液相部分：

色谱柱：：CommaSil? C18-T（2.1 mm×100 mm，3 μm）；

流动相：A：2mmol/L甲酸铵-甲酸水溶液（0.01%甲酸）  B：2mmol/L甲酸铵-甲酸甲醇溶液（0.01%甲酸）；

流速：0.3 mL/min   柱温：40℃   进样量：2 μL；

洗脱程序：梯度洗脱。

表1梯度洗脱程序

质谱条件：

离子源：HESI               电喷雾电压：3500 V            

鞘气压力：30 arb           辅气压力：2 arb          

离子传输管：380 ℃       辅气温度：350 ℃

表2 组分名称、特征离子一览表

3.2 GC/MSMS Agilent 8890-700D

气相条件

色谱柱：Agilent HP-5MS（30.0m*0.25mm*0.25μm）

程序升温：初始温度60℃，以40℃/min的速率升到130℃，保持1min，以12℃/min的速率升到180℃，保持1min，以7℃/min的速率升到250℃，保持2min，再以10℃/min的速率升到310℃，保持3min；

载气：氦气（≥99.999%），速率1.0mL/min；

进样口温度：280℃；进样方式：不分流；进样量：1μL

质谱条件：

电离方式：EI；离子源温度：280℃；测定方式：DMRM

对应监测参数如下表：

表3 组分名称、特征离子一览表

4.1脱色效果比对

1号：净化前的上海青     

2号：QuEChERS净化管配方：900mgMgSO4，150mgPSA,15mgGCB 

3号：QuEChERS净化管配方：900mgMgSO4，150mgPSA,45mgGCB

4号：升级配方 货号：COQ015166H

1号：净化前的菠菜；

2号：QuEChERS净化管配方：900mgMgSO4，150mgPSA,15mgGCB；

3号：QuEChERS净化管配方：900mgMgSO4，150mgPSA,45mgGCB；

4号：升级配方 货号：COQ015166H。

4.2 加标回收率结果

表4 上海轻基质加标回收率结果（加标浓度为0.05 mg/kg）

表5 菠菜基质加标回收率结果（加标浓度为0.05 mg/kg）

上海青样品LC/MSMS总反应监测图

上海青样品GC/MSMS总反应监测图