QuEChERS方法用于猪肉中β-受体激动剂的检测 (Copure ® QuEChERS)

β-受体激动剂简介

目前，人们常谈及的“瘦肉精”即属于β-受体激动剂药物中的一类，主要包括克伦特罗，沙丁胺醇和莱克多巴胺等。该类药物可缓解、消除或预防支气管哮喘，在临床上常作为平喘的药使用。在生猪饲养中给予一定量的β-受体激动剂，能促进动物肌肉的生长，YZ脂肪的合成和累积，使饲料转化率和生长速率显著增加，但该类药物毒副作用大，易在动物内脏中残留，人食用后若残留量达到一定浓度后会出现急性中毒症状。2002年起，我国明令禁止使用克伦特罗，沙丁胺醇和莱克多巴胺等“瘦肉精”药物，并将其列入年度例行监测计划。

逗点生物开发出使用分散固相萃取法检测猪肉中“瘦肉精”含量，致力于为客户提供关于“瘦肉精”检测的有效解决方案。

一、实验目的

本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测猪肉中兽药多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

沙丁胺醇(CAS: 18559-94-9)，莱克多巴胺(CAS: 97825-25-7)。

三、应用范围

本方法适用于猪肉中β-受体激动剂的HPLC检测及确证。

四、实验材料

biocomma® Copure® QuEChERS (Cat. No. COQ050050),

biocomma® Copure® QuEChERS (Cat. No. COQ015601)。

五、实验方法

1、样品提取

称取经粉碎的猪肉2.5 g于50 mL QuEChERS离心管中，加入1 mL 2 mol/L乙酸铵缓冲液（pH=5.2）和50 uL β-葡萄糖醛苷酶-芳基硫酯酶，37 ℃酶解过夜。酶解后的试样加入10 mL 5 %氨水乙腈，涡旋1 min，再加入QuEChERS提取盐包(Cat. No. COQ050050)，用力振摇1 min，4000 r/min离心5 min。上层乙腈层待净化。（注：该实验为阴性样品加标实验，省略酶解步骤）。

2、样品净化

取待净化的上层乙腈层5 mL于15 mL QuEChERS净化管(Cat. No. COQ015601)中，涡旋1 min，4000 r/min离心5 min，取1 mL乙腈净化层于40 ℃下氮吹至近干，用1 mL溶解液（甲醇：0.1 %甲酸水=1:9）重新溶解，过0.22 μm滤膜，供上机测试。 

3、HPLC仪器条件

设备：Waters Alliance 2695

色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)

检测器：Waters 2475 荧光检测器

检测波长：激发波长：226 nm  发射波长：306 nm

流动相：A：0.1 %甲酸水溶液  B：甲醇

洗脱方式：梯度洗脱

表1  流动相梯度洗脱程序

流速：1.0 mL/min

进样体积：20 μL

六、实验结果

1、2.0 mg/kg猪肉中β-受体激动剂的添加回收率结果

表2  2.0 mg/kg猪肉中β-受体激动剂的添加回收率结果

2、2.0 mg/kg猪肉中β-受体激动剂检测的液相色谱图

图1  2.0 mg/kg猪肉中β-受体激动剂检测的液相色谱图

结论：本方法平均回收率为90.3 %，RSD为5 %，满足标准要求。