奶粉中香草醛检测的固相萃取方法(Copure® MAX)

香草醛的介绍

香草醛，又名香兰素，具有浓郁的奶香甜香，是Z重要的食品添加剂之一，也是应用很广的日用香料。它广泛用于糖果、饮料、面包、烟草、酒类等各类食品，也可用于各类日化用品，还有医药、试剂、塑料等其他方面。[香草醛是国家允许添加的食品添加剂，按照国标使用不会对身体造成伤害，但大剂量食用可导致头痛、恶心、呕吐、呼吸困难，甚至损伤肝肾等。

有关的食品安全限量规定

食品安全国家标准《GB2760-2014》规定：0至6个月婴幼儿配方食品不得添加任何食用香料，较大婴幼儿配方食品中允许使用香草醛Zda限量为5 mg/100 mL，婴幼儿谷类辅助食品中允许使用香兰素Zda限量为7 mg/100 g。

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测奶粉中香草醛的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

香草醛(CAS:121-33-5)。

三、应用范围

本方法适用于奶粉中香草醛检测的HPLC检测及确证。

四、实验材料

biocomma® Copure® MAX固相萃取柱150 mg/6 mL (Cat. No. COMAX6150)。

五、实验方法

1、样品提取

称取奶粉5.0 g（极ng确到0.01 g）到50 mL离心管，加20 mL水，振荡5 min，于4000 r/min离心8 min，待净化。

2、SPE柱活化

(1)活化：MAX固相萃取柱依次加6 mL甲醇，6 mL水活化。

(2)上样和洗脱：加入待净化液10 mL，弃去流出液；用6 mL 5 %氨水，6 mL甲醇淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加6 mL 5 %甲酸甲醇溶液洗脱，收集流出液（整个过程控制流速为1 mL/min）。

(3)重新溶解：于40 ℃氮气缓慢吹至近干，加1 mL初始流动相溶解，经0.22 μm滤膜过滤，供GX液相色谱测定。

3、HPLC条件

设备：Waters Alliance 2695

色谱柱：Phenomenex kinetex®-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)

检测器：Waters 2996 DAD检测器

检测波长：280 nm

流动相：2 %乙酸水溶液：甲醇=70：30

流速：5.0 mL/min

进样体积：20 μL

六、实验结果

1、5.0 mg/kg奶粉中香草醛的添加回收结果

表1  5.0 mg/kg奶粉中香草醛的添加回收结果

2、添加水平为5.0 mg/kg香草醛检测的液相色谱图

图1  添加水平为5.0 mg/kg香草醛检测的液相色谱图

结论：奶粉中香草醛检测的平均回收率是86.6%，RSD是5.5%，满足标准要求。