食品中乙二胺四乙酸二钠检测的固相萃取方法(Copure® MAX)

乙二胺四乙酸二钠简介

乙二胺四乙酸二钠又叫做EDTA-2Na，是化学中一种良好的配合剂，它有六个配位原子，形成的配合物叫做螯合物。EDTA-2Na是一种重要的络合剂，可以络合金属离子和分离重金属，常用作重金属药、稳定剂、防腐剂等。乙二胺四乙酸二钠对上呼吸道、眼睛和皮肤有刺激作用，长期大量食用超标产品会对人体健康产生一定的不良影响。

乙二胺四乙酸二钠限量标准

GB 2760-2014《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》中允许蜜饯凉果中的果脯（地瓜果脯）、蔬菜罐头中乙二胺四乙酸二钠Zda使用量为0.25 g/kg，果酱Zda使用量为0.07 g/kg，饮料Zda使用量为0.03 g/kg。

逗点生物开发出使用固相萃取柱法检测蜜饯中食品添加剂乙二胺四乙酸二钠的含量，平均回收率有102.1 %，RSD 0.8 %，为客户提供检测乙二胺四乙酸盐的有效解决方案。

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测食品中乙二胺四乙酸二钠的含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

乙二胺四乙酸二钠（CAS: 6381-92-6）。

三、应用范围

本方法适用于蜜饯（蜜枣）中乙二胺四乙酸二钠检测的HPLC检测及确证。

四、参考标准

《GB 5009.278-2016  食品安全国家标准  食品中乙二胺四乙酸盐的测定》。

五、实验材料

biocomma® Copure® MAX固相萃取柱 60 mg/3 mL(Cat. No. COMAX360)。

六、实验方法

1、样品提取

准确称取蜜枣5.0 g，加入25 mL水，振荡、涡旋2 min，超声20 min，4000 r/min离心5 min，取上清液于50 mL 比色管中；向蜜枣中再加25 mL水重复提取一次，合并提取液，用水定容至50 mL。

2、SPE净化

(1)活化：MAX固相萃取柱使用前用3 mL甲醇、3 mL水活化。

(2)上样和洗脱：往固相萃取柱中加入5 mL提取液，弃去流出液，加入5 mL 5 %甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；加入5 mL 5 %甲酸甲醇水溶液洗脱（甲酸:甲醇:水=5:20:75 v/v/v），收集洗脱液（整个上样、洗脱过程流速控制<1 mL/min）。

3、络合、上机测试

洗脱液加入0.1 mL三氯化铁溶液，用洗脱液定容至5 mL，涡旋2 min，超声20 min，过滤供HPLC测试。

4、HPLC条件

设备：Waters Alliance 2695

色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)

检测器：Waters 2487 紫外检测器

洗脱方式：甲醇：四丁基溴化铵-乙酸钠（PH=4.0）=15：85（v/v）

流速：1.0 mL/min

检测波长：254 nm

进样体积：20 μL

七、实验结果

1、1.0 mg/kg蜜枣基质中乙二胺四乙酸二钠的添加回收结果

表1  1.0 mg/kg蜜枣基质中乙二胺四乙酸二钠的添加回收结果

2、添加水平为1.0 mg/kg乙二胺四乙酸二钠的标准液相色谱图

图1  添加水平为1.0 mg/kg乙二胺四乙酸二钠的标准液相色谱图

结论：食品中乙二胺四乙酸二钠检测的平均回收率在102.1 %，RSD0.8 %，满足标准要求。