THP-1细胞是一种起源于人急性单核细胞白血病患者的外周血细胞系。自1980年建立以来，它已成为免疫学、炎症研究和癌症研究领域最常用、最重要的体外模型细胞之一，尤其在巨噬细胞相关研究中不可或缺。

全称：Tohoku Hospital Pediatrics-1

来源：从一名患有急性单核细胞白血病的1岁小男孩的外周血中分离得到。

细胞类型：悬浮生长的圆形或椭圆形细胞。

细胞属性：未分化状态下为单核细胞表型，具有无限增殖能力（体外培养可长期传代），且保留了单核细胞向巨噬细胞分化的潜能，是研究单核-巨噬细胞谱系的理想模型。

未分化状态下，THP-1细胞呈悬浮生长，形态为圆形或椭圆形，直径约10-15μm，细胞核大且呈不规则形，胞质少、嗜碱性；当经诱导剂处理分化为巨噬细胞后，细胞会逐渐贴壁生长，形态变为梭形、多角形或不规则扁平状，胞质增多并出现大量颗粒（如溶酶体），细胞核缩小且染色质浓缩，整体呈现典型的成熟巨噬细胞形态。

THP-1细胞的培养需严格控制环境与营养条件，以维持其活性与未分化状态，核心操作要点如下：

THP-1细胞是研究巨噬细胞功能的经典模型，其未分化状态为悬浮生长的单核细胞，经诱导后可分化为贴壁生长、具有巨噬细胞表型与功能的细胞。本文基于常用的PMA（佛波酯）诱导法，结合关键细节与可视化标注，提供可直接落地的完整操作流程。

THP-1细胞在正常情况下呈圆形，以悬浮形式生长。当使用PMA刺激时，PMA会激活蛋白激酶C（PKC）信号通路，进而引发一系列细胞反应：细胞周期停滞，细胞粘附分子表达上调，细胞形态发生改变（从圆形变为不规则、具有伪足的贴壁细胞），并开始表达巨噬细胞的特异性表面标志物（如CD16，CD64，CD68）。在PMA仍然存在的情况下，巨噬细胞可进一步诱导分化为M1型和M2型巨噬细胞。

（1）THP-1细胞预处理（确保细胞状态）

①从培养箱取出对数生长期的THP-1细胞，轻轻吹打均匀（避免用力过猛损伤细胞）；

②取10μL细胞悬液与10μL台盼蓝混合，计数板计数，将细胞密度调整至1×10? - 2×10? cells/mL；

③将细胞悬液接种至培养板/皿中，调整密度至1×10? cells/mL。

（2）PMA诱导处理（分化启动关键）

①取出PMA储存液，室温融化后涡旋混匀；

②根据预设的PMA工作浓度，计算所需储存液体积（通常使用50-100 ng/mL的终浓度），接种细胞的培养基中加入PMA工作液，并轻轻晃动培养板使其混匀。

③将细胞放入37℃、5% CO?的培养箱中培养24小时，显微镜下观察巨噬细胞是否构建成功（成功标志：贴壁生长、形态不规则、胞体增大、有伪足伸出）。

④诱导后处理与静息：培养24小时后，小心地吸弃含有PMA的培养基；加入预热的PBS缓冲液，轻轻润洗细胞表面1-2次，以彻底去除残留的PMA；更换为新鲜的、不含PMA的完全培养基，继续培养24小时。此“静息”步骤可使细胞从PMA的刺激中恢复，稳定其M0巨噬细胞状态，从而对后续的极化刺激（如LPS/IFN-γ或IL-4/IL-13）做出更准确的反应。

（3）极化诱导（进一步诱导为M1和M2型巨噬细胞）

巨噬细胞进一步诱导成M1经典激活型巨噬细胞

图2.M1巨噬细胞诱导图

巨噬细胞进一步诱导成M2替代激活型巨噬细胞

图3.M2巨噬细胞诱导图

（4）表型验证（质量控制）

成功的分化需要通过以下方式进行验证：

①形态学差异（显微镜）

M1型巨噬细胞：促炎环境（如LPS、IFN-γ刺激）下，M1的核心功能是“杀菌、促炎”——紧凑的细胞体积、密集的小溶酶体可最大化“降解效率”，短丝状伪足则便于快速识别病原体，减少不必要的能量消耗在“运动/修复”上。

M2型巨噬细胞：抗炎环境（如IL-4、IL-13刺激）下，M2的核心功能是“清除碎片、促进修复”——更大的细胞体积、发达的板状伪足可扩大“吞噬范围”（包裹组织碎片），丰富的内质网/高尔基体（胞质透明的原因）则支持其合成分泌抗炎因子（如IL-10）和修复相关蛋白（如胶原），助力组织再生。

②细胞标志物（免疫组织化学染色和流式细胞仪）

表1.M1和M2型巨噬细胞分泌的标志物

通过形态学特征可以初步区分M1/M2型巨噬细胞，使用免疫组织化学染色或流式细胞仪分析其表达的标志物（如M1的CD86，M2的CD206），可更准确判断巨噬细胞的表型及功能状态。

（5）常见问题与解决方案（避坑指南）

遵循本指南，您将能够稳定、高效地获得THP-1来源的巨噬细胞，为您的科学研究提供可靠的细胞模型。

翌圣生物开发了一系列专为细胞培养而设计的HiActi细胞因子，经过严格的质量控制及细胞功能的验证，确保产品具有高活性、高纯度、高稳定性、低内毒素水平。THP-1诱导分化为巨噬细胞后，可进一步诱导分化为M1和M2型巨噬细胞，其中细胞因子IFN-γ，IL-4和IL-13在这个过程中发挥了重要的作用。翌圣细胞因子可精准助力巨噬细胞的分化，助你拿到理想的实验结果。

Bioactivity of human IFN-γ

图4.The ED₅₀ as measured in anti-viral assays using human HeLa cells infected with encephalomyocarditis (EMC) virus is  0.15-0.80 ng/mL. Fully biologically active when compared to standard.

Bioactivity of human IL-4

图5.The ED₅₀ as determined by a cell proliferation assay using human TF-1 cells is less than 0.2 ng/mL, corresponding to a specific activity of > 5.0 × 10⁶ IU/mg. Fully biologically active when compared to standard.

Bioactivity of human IL-13

图6.The ED₅₀ as determined by a cell proliferation assay using human TF-1 cells is less than 1 ng/mL, corresponding to a specific activity of > 1.0 × 10⁶ IU/mg. Fully biologically active when compared to standard.