【热点】Aeris Peptide XB-C18——用于司美格鲁肽相关杂质分析的应用研究

在司美格鲁肽的生产过程中，由于其相关肽类杂质结构复杂，杂质分离颇具挑战。这些杂质通常包括D-氨基酸异构体、截短序列、氧化或还原形式，以及由脱酰胺化、磷酸化和酰基化等反应产生的其他杂质。为了有效分离这些杂质，通常需要系统化的分离方法和仔细筛选的色谱柱固定相。由于众多肽类杂质结构高度相似，必须增强保留能力和选择性才能加以区分。

? 司美格鲁肽对照品溶液：1.0mg/mL（乙腈:水=50:50 v/v）

? 杂质对照品溶液：1.0mg/mL（乙腈:水=50:50 v/v）

? 加标溶液：以1.0mg/mL的司美格鲁肽对各杂质按0.2%, 0.5%, 1%, 2%进行加标

表1. 各杂质序列信息

图1. 司美格鲁肽结构信息

? 色谱柱：Aeris peptide XB- C18 (150 x 4.6 mm, 2.6μm货号: 00F-4505-E0)

? 流动相A：100mM磷酸二氢铵缓冲液：乙腈=90：10（含0.1mL 70%的高氯酸）

? 流动相B：乙腈：甲醇：水=60：30：10（含0.1mL 70%的高氯酸）

? 流速：0.6 mL/min

? 进样体积：5μL

? 柱温：25℃

? 波长：210 nm

? 梯度程序

图2. Overlayed chromatogram of blank and Semaglutide standard spiked with known impurities at 1.0 % level on Aeris Peptide XB-C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm

图3. Overlayed chromatograms of individual impurities on Aeris Peptide XB-C18, 2.6 μm 150 x 4.6 mm

图4. Overlayed chromatograms of replicate injections (N=6) of sample spiked with 0.5 % of known impurities on Aeris Peptide XB-C18

图5. Overlayed chromatograms of Semaglutide standard spiked with known impurities at 0.2 %, 0.5%, 1 % and 2 % levels on Aeris Peptide XB-C18