美国多地麦当劳发生大肠杆菌感染事故，想知道大肠杆菌是怎么检测的吗

       取增菌后的mEC+n肉汤，划线接种于CT-SMAC平板和大肠埃希氏菌O157 显色平板上，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h，观察菌落形态。在 Aiculture? CT-SMAC平板上，典型菌落为圆形、光滑的无色菌落，中心呈现较暗的灰褐色。

图3  CT-SMAC平板上的典型O157菌落

在Aiculture大肠埃希氏菌O157 显色平板上，典型菌落为圆形、光滑的品（紫）红色菌落。

图4  大肠埃希氏菌O157 显色平板上的典型O157菌落

订购信息

      在Aiculture大肠埃希氏菌O157 显色平板上，典型菌落为圆形、光滑的品（紫）红色菌落。

      在CT-SMAC和大肠埃希氏菌O157 显色平板上分别挑取5个～10 个可疑菌落，接种TSI琼脂，于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。在TSI琼脂中，典型菌株为斜面与底层均呈黄色，产气或不产气，不产生硫化氢（H₂S）。

图5  大肠埃希氏菌O157 在TSI 琼脂中的特征

      同时接种 MUG-LST肉汤，并用大肠埃希氏菌株（ATCC25922或等效标准菌株）做阳性对照，大肠埃希氏菌 O157:H7（NCTC12900 或等效标准菌株）做阴性对照，于36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。置MUG-LST 肉汤管于366 nm紫外灯下观察，MUG 阳性的大肠埃希氏菌株应有荧光产生，MUG阴性的应无荧光产生。

4.1 血清学试验

在营养琼脂平板上挑取分纯的菌落，用O157和 H7诊断血清或O157乳胶凝集试剂作玻片凝集试验。

4.2 生化试验

4.2.1 从营养琼脂平板上挑取菌落，进行生化试验。大肠埃希氏菌O157:H7/NM 生化反应特征见表 1。

4.2.2 从营养琼脂平板上挑取菌落，用稀释液制备成浊度适当的菌悬液，使用生化鉴定试剂盒或微生物鉴定系统进行鉴定。

4.3 毒力基因测定（可选项目）

当样品中检出大肠埃希氏菌O157:H7 或O157:NM 时，如需要进一步检测Vero 细胞毒素基因的存在，可通过接种Vero 细胞或HeLa细胞，观察细胞病变进行判定；也可使用基因探针检测或聚合酶链反应（PCR）方法进行志贺毒素基因（stx1、stx2）、eae、hlv 等基因的检测。

      综合生化和血清学试验结果，报告25 g（或25 mL）样品中检出或未检出大肠埃希氏菌 O157:H7或大肠埃希氏菌O157:NM。