在上一期Empower软件使用小技巧(三十二):如何处理3D PDA数据(第2部分)中,我们给大家分享了峰纯度测试时的一些注意事项。计算峰纯度可以大致分为以下四个步骤:
a)
查看3D PDA数据;
b)
提取2D通道色谱图;
c)
创建3D PDA处理方法;
d)
查看峰纯度计算结果;
步骤a)和b)操作简单,这里我们不再赘述(如果对这两部分操作感兴趣,欢迎留言反馈)。本期我们和大家分享如何创建3D PDA数据处理方法的内容,涉及到积分和峰纯度计算的参数。
步骤
1.
提取出目标波长通道:如图1所示,我们以254 nm波长为例,确定积分参数;
图1. 254 nm波长的提取色谱图。
2.
创建处理方法:创建3D PDA数据处理方法较简单的方式是通过“处理方法向导”,“处理方法向导”快捷图标,如图1所示;点击即可开启向导模式,新建或编辑已有方法,如图2所示;
图2. 打开处理方法向导模式。
3.
选择“新建处理方法”并点击“确定”,将打开新建处理方法向导,如图3所示;
图3. 新建处理方法向导。
4.
确保“处理方法类型”为“PDA”,“使用处理方法向导”为勾选状态(默认状态),点击“确定”,将进入“积分 - 峰检测1”窗口,如图4所示。该窗口允许设置积分“峰宽”参数,可根据向导指引进行操作。“峰宽”参数决定了将多少个数据点打包在一起进行峰检测;
图4. 设置峰宽参数。
5.
点击“下一页”将进入“积分 - 峰检测2”窗口,如图5所示。该窗口允许设置积分“阈值”参数,可根据向导指引进行操作。“阈值”参数用于确定是否有色谱峰存在,通常可用于排除基线噪音的干扰;
图5. 设置阈值参数。
6.
点击“下一页”将进入“积分 - 积分区域”窗口,如图6所示。该窗口允许设置积分“时间窗口”参数,可根据向导指引进行操作,也可直接输入时间范围;
图6. 设置积分区域。
7.
点击“下一页”将进入“积分 - 剔除峰”窗口,如图7所示,可根据向导指引进行操作;点击“下一页”进行编辑峰名称和含量信息,本期内容主要目的是计算峰纯度,不涉及标准品校正曲线和样品的定量,因此峰名称和含量信息为非必要参数,这里不再进行阐述;
图7. 设置剔除峰。
8.
点击“下一页”直至进入“峰纯度设置”窗口,如图8所示。按图中所示进行设置,点击“下一页”进入PDA光谱对照设置窗口;
图8. 勾选峰纯度测试条目。
9.
在“最大值图”下选择或直接输入“噪音间隔”,一般至少0.5 min,如图9所示。点击“下一页”进行“适应性”参数设置,并保存该处理方法;
图9. 设置噪音间隔。
10.
查看、编辑、保存方法组:点击“方法组”快捷图标打开方法组编辑窗口,如图10所示。如果在步骤1中提取过多个不同波长的通道,方法组中均会有提取记录,删除掉多余的通道即可。通过选择菜单“文件” - “保存” - “方法组”保存方法组;
图10. 查看、编辑、保存方法组。
以上就是本期关于如何处理3D PDA数据(第3部分)的全部内容。怎么样,是不是很简单,您学会了吗?
下期精彩内容:查看峰纯度计算结果,敬请期待!
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