一招搞定！血清中26种有机磷酸酯快速测定新方法……

有机磷酸酯（OPEs）是磷酸上的H被3个取代基取代的产物，根据不同的取代基可分为卤代、烷烃类和芳香类3种。OPEs具有良好的阻燃、增塑和润滑功能，被广泛应用于工程塑料、树脂、电子设备、家装饰品、纺织品以及涂料等相关产品，被认为是溴代阻燃剂（BFRs）的理想替代品。OPEs通过物理结合的方式直接添加到相关产品中，在生成、流通、使用过程中易释放进入环境介质中。

血液与人体所有器官和组织均有接触，血液中的化学品浓度更能代表到达靶组织的剂量，可以更准确反映人体的暴露水平，因此血液样品常用于监测化合物人群内暴露水平。目前，血前处理过程比较繁琐、血液样本用量大、同时检测的目标化合物种类较少。因此，建立血液中多种OPEs的高效、快速、准确定量检测方法尤其重要。

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产品&方法优势

ADVANTAGE

1.标准溶液的配置

1.1、准确吸取 26种OPEs混合标准溶液100 μL于10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制备成26种 OPEs混合标准中间液，质量浓度为 1 mg/L；

1.2、准确吸取 11种 OPEs 同位素混合标准溶液100 μL于10 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，制备成 11种 OPEs 同位素内标混合标准中间液，质量浓度为1 mg/L， -20 ℃储存备用。

使用时，用甲醇配制成 26 种 OPEs 质量浓度为 0. 1、0. 5、1. 0、5. 0、10. 0、50. 0、100. 0 μg/L，11种OPEs同位素内标浓度为 10 μg/L 的标准工作溶液。

2.样品前处理

准确吸取100 μL血清至HMR超效分体96孔板中(PN:AN25M028)，加入10 μL质量浓度为100 μg/L的OPEs同位素内标，缓慢加入400 μL乙腈。将孔板放置于正压装置下，逐步施加压力，将小柱中的液体完全缓慢排出，液体收集至96孔板中。再次加入 400 μL乙腈，重复正压操作流程，重复提取操作一次。收集两次过滤液，40 ℃氮气吹至近干，加入 100 μL甲醇复溶，涡旋混匀 1 min，上机检测。

3.仪器条件

（1）液相色谱条件

色谱柱：Leosil XP杂化硅胶UPLC C18柱（ 100 mm×2. 1 mm， 1. 7 μm，货号：AN80A006）；

流动相：A为 5 mmol/L 乙酸铵水溶液，B为甲醇；

梯度洗脱程序：0～6. 0 min，40% ～95% B；6. 0～ 8. 0 min，95% B；8. 0～ 8. 1 min，95%～40% B；8. 1～ 10. 0 min，40% B；

流速：0. 40 mL/min；

柱温：40 ℃ ;  

进样体积：5 μL。

（2）质谱条件：

电喷雾电离源正离子模式（ESI+）；

离子源温度：400 ℃ ; 

喷雾电压 ：5500 V；

气帘气压力 ：0. 24 MPa；

雾化气压力GS1和辅助加热器压力GS2：0. 38 MPa。

多重反应监测（MRM）模式采集。

化合物的质谱参数见表1。

表1 26种目标化合物及 11种同位素内标质谱参数

4.回收率与相对标准偏差

在血清样本中加入适量混合标准溶液，使其质量浓度分别为0. 50、5、50 ng/mL，26种 OPEs 的加标回收率为 86. 7%～ 115%，相对标准偏差为 4. 5%～ 12%（见表 2）

表2 26种OPEs的加标回收率和相对标偏差（n=6）

5.谱图

6.结果讨论

本研究建立了人血清中 26 种 OPEs 的 UPLC-MS/MS检测方法。该方法前处理操作简便，血清样本用量少，只需100 μL，方法灵敏度高、重现性好，满足人群中OPEs的检测工作需求。

关键耗材及仪器