聚焦病毒因子检查：2025年版中国药典《生物制品生产用动物细胞基质制备及质量控制》变化及解读（二）

概述

2025年版《中国药典》将于10月1日起正式实施，在生物制品质量控制及病毒安全性评价方面做出了关键修订，对推动生物医药行业发展十分重要。

在《2025年版中国药典《生物制品生产用动物细胞基质制备及质量控制》变化及解读（一）》文章中，我们对细胞检定总体变化、项目及方法的变化进行了解读。

接下来我们将聚焦2025年版药典中“细胞内外源病毒因子检查”部分的变化，解读病毒因子检查总述、体外培养法、动物体内接种法以及牛源、猪源和其他特定病毒检测方面的更改或新增内容。

注：以下内容中，“XXXX”表示删除内容，绿色字体表示更改内容，红色字体为新增内容。

01细胞内外源病毒因子总述变化与解读

生物制品以细胞、动物或人源组织和体液为起始原材料，存在病毒污染的风险，因此国内外监管机构都对生物制品的病毒安全性控制进行了要求和规定。病毒因子污染可能来自原细胞系（细胞基质）本身，也可能是生产过程中带入的外源病毒，都有可能在临床上产生严重的副作用。

在2025年版药典变化与解读（一）中，我们对细胞库检定的基本要求进行了分享，接下来我们一起看看“细胞内、外源病毒因子检查”有哪些变化吧！

02体外培养法检测变化与解读

该检项为保持与国际接轨，进行了多处修改：

1. 删除指示细胞“同组织类型”的要求

2. 增加昆虫细胞样本检测用指示细胞的特殊要求

3. 删除接种量与细胞传代培养的细节描述

4. 指示细胞培养天数由14天修订为28天

5. 规定了新鲜红细胞的暂存条件和配置要求

6. 进行血吸附试验和血凝集试验时既可以使用混合的豚鼠红细胞和鸡红细胞进行也可使用单一红细胞分别检测

7. 对于只有使用悬浮或半悬浮指示细胞检测时，可以仅进行红细胞凝集试验，而不再硬性要求做血吸附试验

8. 因所有指示细胞均培养28天，故删除人二倍体细胞培养28天的经验描述

03逆转录病毒检测变化与解读

逆转录病毒（Retrovirus）属于具有单链RNA基因组的包膜病毒，通过逆转录酶将RNA基因组转化为双链DNA，并整合至宿主细胞染色体中。逆转录病毒具有高效整合能力和广泛的宿主细胞适应性，在基因治疗、细胞工程及基础研究领域应用广泛。

同时，小鼠或其它啮齿类动物来源的细胞系含有逆转录病毒序列，可能具有感染性。因此，逆转录病毒是细胞内、外源病毒因子检查中的重要一环。2025年版药典对这类检项进行了多处修改，比如：

①与国际要求一致，在逆转录病毒项下增加“化学诱导实验”。

②已有丰富先验知识的细胞系，如CHO、NS0、Sp2/0、Vero 等，不需要进行化学诱导试验

③对于昆虫细胞系，虽不用再进行逆转录酶活性测定，但需要进行化学诱导试验以评估细胞中是否存在未知的可被诱导的内源性逆转录病毒。参考国外发表的文献，如使用IDU进行诱导后进行电镜观察或感染性试验

④对于昆虫细胞系，主要是诺达病毒、弹状病毒等问题；而PBMC或CAR-T等人源细胞的潜在DNA疱疹病毒也需要研究检测

04新增分子生物学检测法

与国际要求一致，在“细胞内、外源病毒因子检查”项下增加分子生物学方法。与ICH Q5A R2接轨，可以接受经验证的NGS法替代动物体内接种法检测外源病毒，但目前NGS法检测外源病毒还未有标准化方法，有出现假阳性的可能，目前国际相关法规和文献对NGS方法学开发和验证提出了建议和要求。

义翘神州已完成“2025年版《中国药典》变化及解读”的PDF版，主要涉及“生物制品生产用动物细胞基质制备及质量控制（通则0234）”和“生物制品检定用动物细胞质量控制（通则0235）”两部分。

05义翘神州生物安全检测平台

义翘神州在北京和苏州设有双检测中心（4200m²），并建立了生物安全二级负压实验室。实验室已在北京、苏州完成备案，并通过CMA和CNAS认证，严格按照GMP、GLP和CANS规范进行设计与管理。义翘神州的检测团队具备扎实的生物医学、药学等相关专业背景，具有丰富的经验和专业的技术能力，深刻了解并能够随时跟踪中外（如NMPA、FDA、ICH、EMA等）最新法规及要求，可全程提供技术指导，并在项目开展之前提供相关咨询。 

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