一、每日必做(使用前后)
1. 流动相预处理
流动相必须用HPLC 级试剂,经0.22 μm 滤膜过滤(水相用纤维素膜,有机相用尼龙 / PTFE 膜);
水相新鲜配制、当日用完,避免长菌;有机相每 2 天更换一次;
四元泵通道分配:盐溶液(水相)放下方通道(A/D),有机溶剂放上方通道(B/C),减少盐析。
2. 排气与脱气
流动相上机前超声脱气 20–30 分钟;开启在线脱气机(G1322A/G1379A);
开机后手动排气:打开排液阀 60–90°,设流速 5–10 mL/min,冲洗 3–5 分钟至无连续气泡,再关排液阀。
3. Seal Wash(柱塞清洗)
必开功能:设为每 7 分钟运行 30 秒、流量 500 μL/min,自动清洁柱塞与密封圈;
溶剂:10% 异丙醇水溶液(高盐 / 缓冲盐体系);正相用纯异丙醇;
每周更换清洗瓶溶剂,严禁回收再用。
4. 关机冲洗(防盐析 / 干化)
用90% 水 + 10% 甲醇冲洗 30–40 分钟(彻底去除缓冲盐);
用纯甲醇 / 乙腈冲洗 30–40 分钟(保护密封圈,防止干化);
降流速至 0 后再关泵电源;检测器先关以延长氘灯寿命。
二、每周维护
1. 压力与波动监测
正常压力波动≤2%(高要求≤1%);波动超标时优先排查:流动相脱气、吸滤头堵塞、单向阀状态。
2. 吸滤头 / 排气阀滤头维护
吸滤头:拆下用甲醇超声 15–20 分钟;顽固杂质用5% 硝酸超声后超纯水冲洗;
排气阀滤头:以纯水 5 mL/min 冲洗,压力 >10 bar即更换;同时检查密封金垫,变形同步更换。
3. 柱塞与密封圈检查
用无尘纸蘸甲醇轻擦柱塞杆,检查是否有盐析或划痕;
确认 Seal Wash 流量与溶剂正常,无漏液痕迹。
三、每月维护
1. 关键部件更换 / 检查
过滤白头:每 1–2 个月强制更换(污染严重提前);
柱塞密封圈:检查是否老化 / 变形 / 漏液;出现漏液(>1 μL/min)或波动超标立即更换;纯水相约 500 小时、含盐流动相约 200 小时寿命;
柱塞杆:磨损 >0.1 mm或有划痕需更换,避免划伤新密封圈。
2. 单向阀维护
被动入口阀:拆下用甲醇超声 5–10 分钟;无效则更换阀芯;
主动入口阀(AIV):仅清洁阀芯(勿浸泡阀体),超声 10 分钟;漏液 / 压力不稳时更换;
出口球阀:漏液或堵塞时更换,安装扭矩10 Nm。
3. 流量校准
称量 5 分钟流出的流动相质量,计算实际流量,偏差需≤±1%。
四、每季度维护
1. 全面检修
拆解泵头,清洁内部盐残留:50% 甲醇水循环 30 分钟→纯甲醇循环 20 分钟;
检查止回阀、阻尼器、混合器,更换老化易损件;
校准压力传感器,显示误差≤±2%。
2. 系统测试
执行泄漏率测试:用 Lab Advisor 或软件内置功能,泄漏率≤3 μL/min为合格;
弹性校准:更换关键部件后必做,确保压力补偿准确Agilent。
五、长期停机(>1 周)维护
泵内充满甲醇 / 异丙醇(防止密封圈干化),用对应溶剂冲洗 30 分钟,降速至 0 后关泵;
每周开机运行 10 分钟,检查密封与压力,避免部件老化。
六、常见故障快速定位
| 故障现象 | 优先排查项 | 处理措施 |
|---|---|---|
| 压力异常升高 | 吸滤头 / 排气阀滤头堵塞 | 清洗 / 更换滤头,加强流动相过滤 |
| 压力波动大 | 气泡、单向阀故障、密封圈磨损 | 重新排气,清洁 / 更换单向阀或密封圈 |
| 漏液 | 密封圈老化、接头松动、柱塞杆划痕 | 更换密封圈 / 柱塞杆,紧固接头 |
| 保留时间漂移 | 比例阀不准、单向阀内漏、流量偏差 | 校准比例阀、更换单向阀 / 校准流量 |
七、维护要点与禁忌
高盐 / 缓冲盐体系必须开启 Seal Wash,每日用纯水冲洗系统,避免盐析堵阀 / 伤密封圈;
更换密封圈时用专用工具,避免划伤柱塞杆与泵头内壁;
单向阀拆装用扭矩扳手,严格按扭矩值紧固,避免密封失效;
禁止无水开机或长时间空转,防止柱塞干磨。
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