牛奶和奶粉中13种喹诺酮类的检测

样品准备/提取

2.1 称量：

牛奶：称取2.0 g样品，极ng确到0.01 g，置于50 mL塑料离心管中；

奶粉：称取0.5 g，极ng确到0.01 g，置于50 mL塑料离心管中，加入6 mL磷酸盐缓冲液混匀。

2.2 提取

（1）向离心管中加入10 mL乙腈，于涡旋振荡上涡旋混和1 min，4000 rpm离心5 min，上清液过滤到圆底烧瓶中；

（2）在残渣中加入5 mL磷酸盐缓冲液，10 mL乙腈，重复步骤（1），合并上清液；

（3）50℃下旋转蒸发，直至乙腈全部蒸出；

（4）向烧瓶中加入5 mL磷酸盐缓冲液，混匀，待净化。

*磷酸盐缓冲液：pH3.0的0.05 mol/LNa2HPO4和KH2PO4，

SPE柱净化

ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）

(1)活 化： 依次加入3 mL甲醇、5 mL水、5 mL磷酸盐缓冲液，流出液弃去。

(2)上 样： 将上样液加入柱中，流出液弃去。

(3)淋 洗： 依次用5 mL 磷酸盐缓冲液、5 mL水淋洗、25%甲醇水淋洗，淋洗液弃去。

(4)洗 脱： 6 mL5%氨水甲醇洗脱，收集流出液。

(5)重新溶解： 在40℃下用减压蒸馏将收集液蒸至近干，然后用流动相定容至1 mL后，过微孔滤膜供HPLC分析。

分析条件

色谱柱： Diamonsil C18（2），250 mm×4.6 mm，5μm（Cat.#99603）

流 速： 1.0 mL/min

检测器：* UV 280 nm

柱 温： 35℃

进样量： 20 μL

流动相： A．0.2%磷酸水溶液，B．甲醇 时间/min 0 25 40 42 50 A 78 67 35 78 78 B 22 33 65 22 22

适用于牛奶和奶制品中马波沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、双氟沙星、司帕沙星、帕珠沙星、环丙沙星、加替沙星、沙拉沙星、恶喹酸、萘啶酸、氟甲喹的检测。

1 马波沙星、2 恩诺沙星、3 氧氟沙星、4 诺氟沙星、5 双氟沙星、6 司帕沙星、7 帕珠沙星、8 环丙沙星、9 加替沙星、10 沙拉沙星、11 恶喹酸、12 萘啶酸、13 氟甲喹