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核酸蛋白检测仪又称紫外检测仪,是液相色谱中的一种紫外装置,核酸蛋白检测仪配上层析柱,恒流泵,部分收集器等,即组成一套完整的液相色谱分离分析系统。核酸蛋白检测仪是现代生物学研究,药物测定、农业科研、化工、食品及YL单位对具有紫外吸收的样品作定性,半定量分析不可或缺的设备之一。
近年来,市场上相继出现了可代替记录仪的“电脑采集器”、“电脑核酸蛋白检测仪”、“双波长电脑核酸蛋白检测仪”、“层析-电导联用系统”等产品,迅速应用到教学实验、科学研究和药物生产领域。
核酸蛋白检测仪主要元器件性能稳定、灵敏度高等。核酸蛋白检测仪的数字显示分为固定光吸收A显示记录仪,和可变量程光吸收A显示记录仪用两种模式,这样不但方便读数而且还可以依据科研需要进行可变量程的高灵敏度读数,有利于对低浓度样品检测。
所有紫外吸收检测器工作原理都是基于光的吸收定律——朗伯-比耳定律。光源经220nm、254nm、280nm、340nm等干涉滤色片提供单色光作为检测核酸、蛋白、酶、多肽的光源。具体工作原理正如该定律指出,当一束单色光(λ)辐射通过稀浓度物质溶液时,如果溶剂不吸收光,则液体的吸光度与吸光物质的浓度和光经过溶液的距离成正比。核酸蛋白检测仪其关系式为:
A(λ)=a(λ)bc
A=-LgT=Lg1/T
核酸蛋白检测仪使用某一波长(280nm或254nm等)进行定性检测分离,用记录仪描谱,长期在高校实验室使用。
按描谱方式分有:记录仪描谱和电脑描谱(外加采集分析器)。
按检测波长分有:单波长检测和双波长(多波长)同步检测。
按检验器分有:核酸蛋白检测和核酸蛋白检测-电导检测联用。
传统层析试验设备由单波长核酸蛋白检测仪(外加电脑采集器或将电脑采集器装入检测仪中也属此类)、层析柱、恒流泵、部分收集器和记录仪等部件构成。用一种波长(如280nm或254nm等)下对已知物质(蛋白或核酸等)进行实验检测,高校实验室的层析实验装置大多属于此类。特点如下:
1、检测前必须选定一种波长(280nm、254nm)进行检测,利用物质特征波长分离已知组分。
2、要求在检测前一定要先调整透过率为1**%,然后再调整吸光度为0。
3、传统核酸蛋白检测仪为保证测量读数落在仪器有效测量范围内,在分析仪器面板上都设有灵敏度选择装置(2.0a、1.0a、0.5a、0.2a、0.1a、0.05a等)。
①测量前要选择合适的灵敏度;②真正吸光度值是仪器显示数与灵敏度的乘积;③测量中不要改变灵敏度,否则可能会带来基线变化。
4、传统核酸蛋白检测仪在不同灵敏下的测量结果均为0-10mv直流信号,将此信号输出到记录仪或电脑采集器。显然,记录纸或电脑屏上的吸光度也并非样品实际的吸光度,也应受到仪器灵敏度的调制。
以对蛋白、核酸、肽等生物大分子物质的检测、分离和纯化为目的,新型层析实验系统中的电脑核酸蛋白检测系统具有以下特点:
1、系统智能调整吸光度到0.000,透光率到1**%。并在测量范围内的吸光度和透过率严格符合a=lg(1/T)。
2、单波长检测或双波长同步检测。
3、系统自带数据采集工作站,检测、采集、软件工作站一体化系统集成。分析软件具有实时描谱、分析参数、图谱保存、图谱打印、图谱编辑等功能,提供峰高、峰宽、峰面积、归一化、保留时间、半峰宽、峰底宽、面积含量、纯度、层析柱分辩率等参数。
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