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- 【导读】一、测定原理考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合形成蓝色复合物,该复合物在595nm处有最大吸收峰,蛋白质-考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比,灵敏度...
- 一、测定原理考马斯亮蓝G-250染料,在酸性溶液中与蛋白质结合形成蓝色复合物,该复合物在595nm处有Zda吸收峰,蛋白质-考马斯亮蓝复合物溶液颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比,灵敏度高,适合微量蛋白质分析。二、吸光值测定按下表操作:试剂空白管测定管双蒸水0.2ml/待测液/0.2ml考马斯亮蓝试剂0.8ml0.8ml混匀,室温静止10min,于595nm比色,空白管调零三、标准曲线绘制用1mg/ml的BSA分别配制浓度为0、20、40、60、80、100g/ml的标准BSA溶液,按下表操作:试管号123456标准BSA浓度(g/ml)020406080100标准BSA溶液考马斯亮蓝试剂0.2ml0.8ml混匀,室温静止10min,于595nm比色,以1号试管调零计算得标准曲线公式为:y=0.008x+0.06(x为蛋白浓度,y为吸光值)四、结果计算将所测得的吸光值A595代入标准曲线公式即可计算出蛋白浓度,单位为g/ml苏州科铭生物技术有限公司www.cominbio.com订购电话:0512-62956165邮箱:comin@cominbio.com注意事项:1、试剂混匀后在10~20min完成比色2、不可用石英比色皿,可用玻璃或塑料比色皿,测完成后立即用95%乙醇冲洗3、测定前用1~2个样做预实验,确保蛋白浓度在0~100g/ml范围内,否则需要做相应需要稀释订购热线021-54100800
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