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本生阐述:elisa操作步骤说明及注意事项
酶联免疫吸附测定enzyme linked immunosorbent assay(简写ELISA),指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。要知道elisa操作步骤首先我们先了解一下elisa的原理是什么。
elisa的原理:
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。
②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性, 又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体 上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物, 产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据焰色反应的深浅刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,故可极大地放大反应效果,从而使测定方法达到 很高的敏感度。
elisa操作步骤:
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越 强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则 410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法:
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃过夜。次日 洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔 中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体
以上是elisa操作步骤,那么在elisa操作步骤的操作步骤中需要注意什么呢?下面是elisa实验的注意事项:
1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2.在elisa操作步骤中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:固相载体的选择、包被抗体(或抗原)的选择、酶标记抗体工作浓度的选择、酶的底物及供氢体的选择
elisa试剂盒 本生(天津)健康科技有限公司是一家从事健康科技技术开发销售的公司,本生生物公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准。本生(天津)健康科技有限公司由具有行业背景和丰富市场经验的业人士组成,于为生命科学研究域提供产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。
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台式电导率仪测定水样详细步骤如下:
1、用待测水样清洗电极,然后倒掉;
2、重复步骤1,至少清洗电极两遍;
3、再取待测水样,将电极插入烧杯,等待测量值稳定(约30秒左右);
4、当判稳指示显示稳定后,即可读出测量值。
台式电导率仪使用注意事项
1、如果水样的电导率值较大,电极清洗两遍即可;如果电导率值较小,建议多洗几遍电极,很大限度地减小干扰,以便获得更加准确的测量值。
2、严格禁止超限测量。如果水样的电导率超过所使用电极的测量范围,将会引起电极极化,使电极测量精度下降,导致电极失效。
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- 肉色测定仪OPTO-STAR操作步骤与说明
肉色测定仪OPTO-STAR操作步骤与说明其实非常的简单,只要细心的阅读就能掌握操作步骤,首次实用肯定的手忙脚乱的,多操作几次就能熟能生巧,然而有很多的用户拿到仪器之后就盲目的进行操作,其实是错误的做法,不论是什么样的产品首次使用都要掌握操作步骤和流程在进行操作,不然会造成没有必要的错误。
1、电源键开关:
仪器在用完后需要切断电源。当系统被切断后,所有的数据以及设置都预先被自动保存下来。
2、测量键:
系统打开后,该项就会显示。并且按下“ENT”键后,测量就会立即执行。按下“FNC”键后,立马可以回到主菜单上的该项功能。
3、校准键
测量之前,有必要先检查校准功能。由于漂变功能的缺失或探头的老化,在正常的环境条件下,重新校准没有必要。
在测量程序中,可以使用校正集成模块来模拟肉质测量。将传感器调到色值“0”处,之后离开三秒。色值显示调到零。如果接近0(+1/-1),系统能识别这一集成模块。
按下“ENT”键。将传感器调到色值“90”处,步骤与调零一样。做完这些后,如果校准正常,系统检查可行性并且自动跳到“测定”项。
4、CONFIC键
不需要激活
5、SYSTEM键
该菜单项可以检查某一系统数据。按“ENT”键可以翻到下一屏(见菜单结构表)。用户可以完全将缓冲液的值清除掉。
时间/日期。
6、CLOCK键
时间与日期在这里进行专门设置。对年/月/日以及小时/分钟设置区域均单独划分开。日期与时间在“系统”菜单项中进行检查。
7、测量ENT键:
将 “OPTO”传感器插入到肉质中。按下“ENT”确定测量的值。
8、手柄上的开/关键:
这个键能够使仪器处于开关状态。在校准过程中已经取得的数据以及用户输入的数据在开关被关之前,OPTO-STAR能够保存下来。当仪器再次开的时候,近一次的设置可以继续使用。如果保存
下来的数据不能被读取(例如:Z开始的操作),仪器就会显示一条消息告诉用户仪器需要进行校准。“CALIB”一般指示仪器功能紊乱。
9、FNC键
按下这个键,可以在任何时候回到主菜单。
10、Cursor键(上下箭头)
这些键能够通过菜单滚动屏幕。在数据输入过程中,屏幕上显示的值能够被修改。
Cursor 向下”(向下箭头) :显示下一页的菜单项(见菜单结构表)。不能通过菜单循环键进行滚屏;当Z后一项菜单显示的时候,“Cursor 向下”键就不再起作用。如果要修改数字,按
“Cursor 向下”键可以以每单位降低所要修改的数字。
“Cursor 向上”(向上箭头) :显示上一页的菜单项;以每单位升高所要修改的数字。
11、ENT键
执行屏幕上所显示内容的功能。当输入的数据时,屏幕显示的是当前输入的数据。当按下ENT”键后,所有的信息和需要检查的数据会出现在屏幕上。
通过“FNC”键,任何时候可以回到主菜单对需要检查的项进行校正,如果工作电压偏低,屏幕上会显示“BATT LOW”。此时。唯yi可以选择的项是“SYSTEM”,显示的是系统日期。
肉色测定仪OPTO-STAR操作步骤与说明
- 原子吸收光谱仪结构,原子吸收光谱仪结构示意图
原子吸收光谱仪结构解析:科学与技术的结合
原子吸收光谱仪作为一种先进的分析仪器,在元素定量分析中具有重要地位。它通过原子对特定波长光的吸收来测定物质中的元素含量,广泛应用于环境监测、医学检测、食品安全等领域。本文将详细介绍原子吸收光谱仪的结构,包括其主要组成部分及功能特点,为读者更深入地了解该仪器的原理与应用提供帮助。
一、原子吸收光谱仪的核心部件
光源系统
光源是原子吸收光谱仪的核心部分之一。通常使用中空阴极灯(HCL)或放电灯作为光源,它们能够发射特定元素的特征光谱。这种光源具有高强度和高稳定性,确保了检测结果的准确性和灵敏度。
原子化器
原子化器是实现样品转化为自由原子的关键装置,常见的原子化方式包括火焰原子化和石墨炉原子化。
火焰原子化:通过燃烧混合气体将样品转化为自由原子,适用于较高浓度样品的分析。
石墨炉原子化:利用高温石墨管进行加热蒸发,适合痕量元素的检测,具有更高的灵敏度。
分光系统
分光系统的作用是将光源发出的光分解为不同波长的单色光,并选择被分析元素对应的特征波长。这部分通常由单色器或光栅完成,能有效排除背景干扰,提高检测的选择性。
检测器
检测器的功能是接收通过样品的特定波长光,并将其转换为电信号。常见的检测器有光电倍增管(PMT),以其高灵敏度和低噪声的特性在仪器中广泛使用。
数据处理系统
数据处理系统是现代光谱仪的重要组成部分,主要通过计算机将检测到的电信号转化为可视化的定量结果,同时支持数据存储和分析功能。它为复杂样品的快速测定提供了强大支持。
二、各部件的协同作用
原子吸收光谱仪的工作流程高度依赖于上述部件的紧密协作。光源发出的特征光经分光系统调节后穿过原子化器中的样品,部分光被样品中的原子吸收。未被吸收的光由检测器接收,并通过数据处理系统计算出样品中目标元素的浓度。
三、结构优化对性能的影响
原子吸收光谱仪结构的优化直接决定其性能表现。例如,高性能的分光系统能够减少干扰光的影响,提高测定的准确性;高灵敏度的检测器则可扩展仪器的分析范围,尤其是在痕量元素检测中。近年来,随着技术的发展,一些仪器开始集成自动进样、背景校正等功能,为用户提供更加便捷的操作体验。
四、结语
原子吸收光谱仪以其精确、高效的分析能力,成为科学研究和生产领域不可或缺的工具。其结构设计充分体现了科学与技术的结合,每一部分都为提升检测的准确性和灵敏度而服务。
- 石英晶体微天平结构示意图
石英晶体微天平结构示意图:解析其工作原理与应用
石英晶体微天平(QCM,Quartz Crystal Microbalance)是一种高精度的质量测量工具,广泛应用于物质的检测、传感器技术和表面科学研究领域。其核心工作原理是利用石英晶体在施加电压时产生的压电效应,通过监测石英晶体的共振频率变化来感知质质量的微小变化。本文将深入解析石英晶体微天平的结构及其示意图,帮助读者更好地理解该仪器的设计原理及其广泛应用。
石英晶体微天平的结构与工作原理
石英晶体微天平的基本结构由一个薄的石英晶体板组成,这块晶体通常是切割成一定角度的薄片,装置上加有电极,电极两侧用于施加电压。石英晶体在电压作用下能够发生微小的机械变形,而该变形会导致晶体的共振频率发生变化。通过测量频率变化,QCM可以非常精确地检测到附着在其表面上的物质的质量。
石英晶体微天平的工作原理基于压电效应,晶体的电极将电场施加到石英晶体表面,导致晶体发生形变,从而影响其共振频率。当外部物质或分子在晶体表面吸附或沉积时,石英晶体的质量会发生微小变化,进而引起共振频率的变化。频率的变化与附着物的质量成正比,因此可以通过计算频率变化来准确估算附着物的质量。
石英晶体微天平结构示意图
在石英晶体微天平的结构示意图中,通常包括以下几个关键部分:
- 石英晶体:这是QCM的核心部分,通常采用高纯度的石英,保证其良好的压电性能。
- 电极:电极通常被镀在石英晶体的两侧,施加电场后能够激发晶体的振动。
- 激励电源:为电极提供所需的电压,以激发石英晶体的振动。
- 频率计:用来精确测量石英晶体的共振频率变化。
- 振动传感器:捕捉频率变化,并将信号反馈给频率计。
在示意图中,石英晶体通常以双电极结构展示,电极的材料常选用金属如铂或金,这样既能确保电压的高效传递,又能避免电极与溶液或空气中的化学反应。结构示意图还可能标出连接部分、测量电路以及外部控制单元。
石英晶体微天平的应用领域
石英晶体微天平在许多科学研究和工业应用中都有着广泛的应用。其主要的应用领域包括:
- 化学传感:QCM可用于检测气体、液体或固体的质量变化,因此在气体传感、液体浓度分析、化学反应动力学研究中发挥着重要作用。
- 生物传感:QCM在生物分子检测中,尤其是抗原-抗体反应、DNA探针等的应用中,能够精准地捕捉到分子级别的质量变化,因此广泛应用于生物传感器的开发。
- 表面科学研究:QCM能够精确测量表面沉积物的质量变化,因此常用于材料科学中的薄膜研究和表面涂层研究。
- 环境监测:QCM可用于环境监测,尤其是在监测空气中的有害气体或水质分析中,发挥着重要作用。
石英晶体微天平的优点与挑战
石英晶体微天平凭借其高灵敏度和高精度的优势,在许多精密领域得到了广泛应用。QCM在实际应用中也面临一些挑战,如受到外部环境温度变化、电磁干扰等因素的影响,可能导致测量精度的下降。在高粘度或高浓度的样品中,频率变化的检测也存在一定的局限性。
结语
石英晶体微天平作为一种先进的质量测量工具,其结构和原理为各种领域的研究和应用提供了可靠的技术支持。通过深入理解石英晶体微天平的结构示意图及其工作原理,可以更好地掌握其应用潜力,推动科学研究和工业技术的发展。未来,随着技术的不断进步,石英晶体微天平有望在更多新兴领域中发挥重要作用。
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