急求：有谁知道蛋白质电泳染色时的银染配方呀？谢谢你的帮助

安妮宝贝19905 2012-03-18 02:36:11 422 浏览

有谁知道蛋白质电泳的银染配方和步骤吗？谢谢你了

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遍地都是社会哥 2012-03-19 00:00:00

上海生工有现成的产品编号为BSP021 BSP027 BSP029S-N 任你选择。

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jxsrzhb521 2012-03-19 00:00:00

分子克隆实验指南里面有我用过。不过自己配置肯定不如买现成的产品好用

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沾化人lv 2012-03-28 00:00:00

银氨染色法： 1、取二块双向蛋白凝胶，用500mL固定液（40%甲醇+10%乙酸）固定30min 2、用双蒸水冲洗3次，时间分别为3min、5min和3min 3、然后用500mL AgNO3染色液（500mL 中含有3.6% NaOH 10.5mL、20% AgNO3 9 mL和5mL氨水）染色32-33min 4、用双蒸水冲洗4次，时间分别为3min、4min、4min和1min 5、然后用500mL显色液（500mL中含有1%柠檬酸2.5mL和甲醛250μL）显色5-12min（显色时应摇动，显色时间可灵活，一般采用边显色边观察） 6、500mL 5%醋酸终止反应5min，然后用ddH2O冲洗2-3次注意：双向银染上样蛋白总量为40-250μg。

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伍祖加 2012-03-24 00:00:00

我的配方如下，仅供参考： 1. 固定：30min或过夜 100ml 乙醇 40% 乙醇 25ml冰醋酸 10% 冰醋酸加水到250ml 2. 致敏：30min 300ml 乙醇 30% 乙醇 68g 乙酸钠（或112.8g 三水乙酸钠） 2g硫代硫酸钠加水到终体积1000ml 3. 水洗：3 x 5min 4. 银染：20min 0.625g AgNO3 加水到终体积250ml 5. 水洗： 2 x 1 min (准确掌握时间，水洗时间长显色速度慢，点的颜色浅) 6. 显色：视情况而定 6.25 g Na2CO3 100 ul 37% 甲醛（在使用前加入）可加入 1g/L Na2S2O3 50微升以降低背景（在使用前加入）加水到终体积250ml Sweet silver: 硼酸 3.1克 100 mM NaOH 3 克 150 mM 加水到终体积500 ml。用前取sweet 225 ml加1g/L Na2S2O3 200微升，40%葡萄糖25 ml。 7. 终止：10min 7.3g EDTA.Na2.2H2O 或者2g 甘氨酸加水到终体积500ml 8. 保存：1% 冰醋酸，4 ℃

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