紫外吸收法与Folin——酚比色法测定蛋白质含量相比，有何优缺点

霍文彬138 2011-11-27 18:29:33 1651 浏览

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tuandbip739 2011-11-28 00:00:00

紫外吸收法的优点就是节约材料并且反应更彻底绿色环保实验结果也很精确便于观察 Folin现在基本上被淘汰了！

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ok不是过客111 2011-11-28 00:00:00

首先，紫外吸收法容易被核酸干扰，而且测定混合有机成分时，极不准确。但操作相当简单快捷。而Folin酚比色法虽然步骤甚多，但干扰小，测得的结果的可靠性比较好。Folin-酚试剂法包括两步反应：diyi步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100 倍，定量范围为5～100μg 蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。其次，对于folin酚法，现在有酶标板批量测值，比较方便。再次，若是条件允许，可以用bradford法测定蛋白浓度，这是目前，据说Z灵敏的测定方法；要是条件不允许，folin酚也挺不错的，本人以前一直用该法测蛋白浓度，对于紫外风光光度法测蛋白浓度，不推荐...即使用nano测...

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fz5901288 2016-12-02 05:07:22

紫外吸收法是以含有苯环的氨基酸为基础测量的，OD280值，各种蛋白含有的苯环的氨基酸数量不一定，所以只是大致估计。 Lowry Protein Assay Kit 福林酚蛋白浓度测定试剂盒产品说明: 在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物。此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），这种深蓝色的复合物在745-750nm处有Z大吸收峰，颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100 倍。产品特点: 1．不同蛋白质分子之间的变异系数教小; 2．在40分钟内可以完成蛋白质定量过程; 3．有酶标板法和分光光度法两种定量程序 4．定量范围为5-100ul/ML蛋白质。编号包装价格产地 SK4031 1000 Assays 150 生工 SK4033 1000 Assays +10Microplates 230 生工 Stable Lowry Protein Assay Kit 稳定型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒产品说明: 碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物。此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法灵敏度比双缩脲法高100 倍，定量范围为5-100μg/ml蛋白质。经典的Lowry法的主要缺点是由Reagent A和B按照一定比例配置成的碱性铜试剂（Reagent C）不稳定，需要当天配制，经典的Lowry法产生的颜色稳定性也不高，在反应20-120min内变化9.2%。本试剂盒采用一种改进的即用型稳定的碱性铜试剂代替经典Lowry法的Reagent A；B；C，使得实验操作更加的简单便捷，反应产生的蓝色复合物能够稳定存在至少2小时。而且该稳定型碱性铜试剂在4度，避光的条件下可稳定保存至少6个月以上，实验制得的标准曲线与经典方法基本吻合。用酶标板使用1000次或分光光度法100次。产品特点： 1．即用型而且稳定的碱性铜试剂，使用更加方便； 2．有离心管法和酶标板法两种定量方法； 3．蛋白质浓度的线性范围在5-100μg/ml； 4．高的灵敏性保证了低蛋白质浓度样品的精确定量。编号包装价格产地 SK4051 1000 Assays 260 生工 Modified Lowry Protein Assay Kit 改良型Lowry法蛋白浓度测定试剂盒产品说明: 在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物。此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin 试剂）还原，产生深蓝色（磷钼蓝和磷钨蓝混合物），颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便，灵敏度比双缩脲法高100 倍，定量范围为5-100μg/ml蛋白质。通过特殊的沉淀试剂可以完全去除蛋白质样品中的大部分干扰物质，而蛋白质的损失几乎为零.保证了结果的准确性和提高了定量的灵敏度。产品特点: 1．特殊的沉淀试剂去除蛋白质样品中干扰物质，比常规lowry有更好的线性关系，结果更准确; 2．不同蛋白质分子之间的变异系数教小; 3．有酶标板法和分光光度法两种定量程序; 4．定量范围为5-100μg/ml蛋白质。编号包装价格产地 SK4041 1000 Assays 180 生工

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