流式细胞仪的应用

　　流式细胞仪是一类常见的医学检测仪器，其可以对单一的细胞进行多色的染色，而且还能对细胞表面进行标记，分析液体中的可溶性成分，分析细胞的大小颗粒。流式细胞仪操作简单，测试的结果客观而精确。

流式细胞仪在肿瘤学方面的应用

　　流式细胞仪可以进行细胞周期分析，DNA倍体分析，定量分析检测细胞增殖标志物、细胞表面标志、癌基因蛋白产物、耐药蛋白、细胞凋亡等，从而获得组织形态学方法难以得到的信息，可为肿瘤的临床诊断、ZL、预防和预后提供帮助。

　　DNA非整倍体的出现可能是发生早期癌变的一个重要指标。淋巴瘤、白血病在病理形态学还不能进行早期诊断之前，流式细胞仪可以提供确切的诊断信息。流式细胞仪对淋巴瘤的早期诊断比形态学检查更为敏感、准确。DNA非整倍体的交界瘤应按恶性肿瘤对待，形态学表现为良性的肿瘤出现非整倍体提示有恶性转变的可能。

　　流式细胞仪主要是利用实体瘤标本或穿刺标本、胃镜、食管镜及支气管镜、肿瘤冲洗液、尿液等少量组织进行DNA含量测定，进行包括癌前病变及早期癌变的检出，从而为临床辅助诊断和进一步ZL如放疗中的药物选择、强度、时间等提供较确切、可靠的信息。

流式细胞仪在血液病诊断中的应用

　　1、白血病的诊断和ZL

　　流式细胞仪采用各种抗血细胞表面分化抗原(CD)的单克隆抗体，借助于各种荧光染料(异硫氰基荧光素FITC，藻红蛋白PE等)测定一个细胞的多种参数，以正确地判断出该细胞的属性。各种血细胞系统都具有其独特的抗原，当形态学检查难以区别时，免疫表型参数对各种急性白血病的诊断和鉴别诊断有决定性作用。

　　流式细胞仪通过对人白细胞抗原(HLA)配型的测定，可以为异体干细胞移植病人选择出Z合适的供体。造血干细胞移植技术主要包括干细胞的鉴别、活性测定、干细胞动员和采集、分离纯化、保存扩增、肿瘤细胞的净化、干细胞回输以及术后保持移植物抗宿主病的低发生率等一系列过程。

　　流式细胞仪测定CD34、HLA-DR、CD33等细胞表面标志物，成为干细胞移植技术重要的监测手段。用流式细胞仪检测一系列指标观察病人的恢复状态，可以对预后做出早期的判断。

　　2、阵发性睡眠性血红蛋白尿的诊断

　　根据CD59表达将阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)病人分为三型，研究证明不同亚型对补体的敏感程度不同。特异地分析网织红细胞的CD59的表达，对于PNH的诊断及病情评估有非常重要的意义。

　　流式细胞仪检测并计数缺乏这类膜蛋白的异常血细胞，是目前诊断PNHZ直接、Z敏感、特异性Z强且可以定量的良好手段，比传统的溶血试验具有更高的特异性和灵敏度。

　　3、网织红细胞的测定及临床应用

　　网织红细胞计数是反映造血功能的重要指标，流式细胞仪通过某些荧光染料与红细胞中RNA结合，定量测定网织红细胞中RNA，得到网织红细胞占成熟红细该病的诊断及ZL监测，具有检测速度快、灵敏度高胞的百分比。

　　流式细胞仪方法比目测法结果精确度更高。此外，流式细胞仪还可以测量出网织红细胞的成熟度，对红细胞增殖能力的判断很有意义，为干细胞移植术后恢复的判断、贫血的ZL监测等提供了依据。

流式细胞仪在血栓与出血性疾病中的应用

　　1、血小板功能的测定

　　血小板膜糖蛋白(GP)是参与止血、血栓形成的重要分子基础，这些膜糖蛋白是一类重要的黏附分子。利用针对GP的单克隆抗体对血小板进行免疫荧光标记，并用流式细胞仪分析单个血小板或血小板亚群的GP，是血小板膜糖蛋白检测分析方法的重大发展。其方法简便、快速、标本用量少、灵敏度高、结果准确。

　　2、血小板相关抗体的测定

　　免疫性血小板减少性紫瘢病人血浆中可产生血小板自身抗体，结合在血小板表面，称为血小板相关抗体，其分子可以是IgG、IgA或IgM，用鼠抗人IgG、IgA、IgM荧光抗体标记被测血小板，流式细胞仪可以测定血小板相关抗体含量。直接法检测血小板表面的相关抗体，间接法可测定血清中的相关抗体。该方法用于的优点。

流式细胞仪在免疫学中的应用

　　淋巴细胞分为T淋巴细胞(CD3)、B淋巴细胞(CD19)和NK细胞三大群。T淋巴细胞又分为辅助性T细胞(CD4)、细胞毒性T细胞(CD8)。

　　流式细胞仪检测T淋巴细胞和B淋巴细胞百分数可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4和CD8T淋巴细胞的百分数有助于监测患有免疫缺陷疾病、自身免疫性疾病或有免疫反应的病人的免疫状态。

流式细胞仪在造血干细胞移植中的应用

　　造血干细胞移植加强烈化疗是治愈某些难治疾病的有效方法。外周血造血干细胞移植(PBSCT)的成功与否，除与是否合并并发症有关外，移植物中CD34+细胞的数量和质量是重要因素。

　　1995年，血液病ZL及移植国际联合会成立了干细胞计数小组，致力于寻求一种简单、快速、灵敏的流式细胞仪检测方法去定量外周血中造血干细胞的数量。这一方法对于临床实验室中不同的流式细胞仪都有效，而且在不同的移植ZX具有可比性。

流式细胞仪在临床细菌学中的应用

　　流式细胞仪泛用于细菌、病原体、毒素、血清抗体及药敏试验。在免疫荧光方法中的流式微球捕获芯片技术是流式细胞仪的一个新应用，它将近似于细胞大小的微珠作为捕获载体，使其携带已知荧光抗原或抗体，来捕获检测物中的相关抗体或抗原。由于遮蔽效应可以使荧光微球的发散光减弱，应用不同大小的荧光微球，可同时检测同一标本的多种抗原或抗体。

　　这种方法能同时检测单一液相样本中多个目的蛋白(如同时测定多种细胞因子、多种自身抗体)，检测需用标本量少，灵敏度高，重复性好，直接荧光标记易于使用，检测线性范围宽，避免酶联反应所致的人工假象，可用于单细胞分子水平的多参数检验，也可用于真菌、寄生虫、病毒或混合感染的检测。

流式细胞仪在器官移植中的作用

　　流式细胞仪在器官移植中也占有重要地位，它被用来判断供者与受者之间配型是否合适。其检测手段是检测受者血清中抗供者的抗HLA的抗体。根据抗体的种型、效价、靶抗原和器官移植的类型不同，抗体介导的排斥反应也有所不同。

　　流式细胞仪与传统方法相比更灵敏、操作时间短并可同时检测细胞亚型、分辨出IgG和IgM抗体。流式细胞仪所分析的靶细胞不只局限于淋巴细胞，为移植的配型提供更有利的支持。移植术后，免疫表型的监测也很重要。移植后CD4/CD8比值低下的病人排斥反应发生较多;受者血清中产生抗供体细胞抗体者预后较差，应及时监测以便进行抗排斥的预防和ZL。