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CCK-8|细胞增殖、细胞毒性试剂盒|参数说明
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CCK-8|细胞增殖、细胞毒性试剂盒相关资料产品简介:CellCountingKit-8(CCK-8试剂盒)是由同仁化学研究所(Do极ndo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在美国,欧洲等国家地区均持有ZL,同仁化学研究所于2006年在ZG获得了WST-8的注册商标。CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:★灵敏度高,数据可靠,重现性好★操作简便,省时省力★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用★适合于高通量药物筛选CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、ZD大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用CCK-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8试剂与MTT等方法灵敏度比较CCK-8试剂盒特价促销CCK-8试剂盒特价促销专业生化试剂生产商|专业分子试剂供应商特价850【021-54100800】产品明细:CCK-8试剂盒利用了同仁化学研究所(Do极ndo)开发的四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中;不需要预配各种成分。CCK-8法是用于测定细胞增殖或细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲量与活细胞数量成正比。WST-8法检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相当稳定,并且对细胞没有毒性,因此可以长时间孵育。CCK-8检测步骤1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100μl培养基和10μlCCK-8进行检测。e)白细胞可能需要培养较长时间。CCK-8试剂盒特价促销CCK-8试剂盒特价促销专业生化试剂生产商专业分子试剂供应商特价【021-54100800】优质试剂!质量放心!价格Zdi!为ZG生物产业做贡献欢迎新老客户咨询
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CCK-8|细胞增殖、细胞毒性试剂盒|参数说明
- CCK-8|细胞增殖、细胞毒性试剂盒相关资料产品简介:CellCountingKit-8(CCK-8试剂盒)是由同仁化学研究所(Do极ndo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在美国,欧洲等国家地区均持有ZL,同仁化学研究所于2006年在ZG获得了WST-8的注册商标。CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:★灵敏度高,数据可靠,重现性好★操作简便,省时省力★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用★适合于高通量药物筛选CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、ZD大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用CCK-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8试剂与MTT等方法灵敏度比较CCK-8试剂盒特价促销CCK-8试剂盒特价促销专业生化试剂生产商|专业分子试剂供应商特价850【021-54100800】产品明细:CCK-8试剂盒利用了同仁化学研究所(Do极ndo)开发的四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中;不需要预配各种成分。CCK-8法是用于测定细胞增殖或细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲量与活细胞数量成正比。WST-8法检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相当稳定,并且对细胞没有毒性,因此可以长时间孵育。CCK-8检测步骤1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100μl培养基和10μlCCK-8进行检测。e)白细胞可能需要培养较长时间。CCK-8试剂盒特价促销CCK-8试剂盒特价促销专业生化试剂生产商专业分子试剂供应商特价【021-54100800】优质试剂!质量放心!价格Zdi!为ZG生物产业做贡献欢迎新老客户咨询[详细]
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2018-09-02 10:00
产品样册
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CCK-8试剂盒说明书
- CCK-8试剂盒 WST-8 细胞增殖 细胞毒性,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。
WST-8属于MTT的升级产品,能在电子载体1-甲氧基PMS的作用下被还原成水溶性甲臜产物,生成的甲臜量与活细胞数量成正比,因此颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,可以反映活细胞数量。
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2024-09-12 18:32
实验操作
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CCK-8试剂盒操作常见问题
- CCK-8试剂盒特价促销产品简介:CellCountingKit-8(CCK-8试剂盒)是由同仁化学研究所(Do极ndo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在美国,欧洲等国家地区均持有ZL,同仁化学研究所于2006年在ZG获得了WST-8的注册商标。CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:★灵敏度高,数据可靠,重现性好★操作简便,省时省力★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用★适合于高通量药物筛选CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、ZD大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用CCK-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,Z高IF26.5分[HeterozygositywithrespecttoZfp148causescompletelossoffetalgermcellsduringmouseembryogenesis,NatureGenetics33,172-176(01Feb2003)]CCK-8试剂与MTT等方法灵敏度比较CCK-8试剂盒特价促销CCK-8试剂盒特价促销专业生化试剂生产商|专业分子试剂供应商特价850【021-54100800】产品明细:CCK-8试剂盒利用了同仁化学研究所(Do极ndo)开发的四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐),它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲染料。CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中;不需要预配各种成分。CCK-8法是用于测定细胞增殖或细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲染料能够溶解在组织培养基中,生成的甲量与活细胞数量成正比。WST-8法检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT,XTT,MTS或WST-1高。由于CCK-8溶液相当稳定,并且对细胞没有毒性,因此可以长时间孵育。CCK-8检测步骤1.向各孔中加入100μl细胞悬液。a)2.在37℃下预孵育培养板。b)3.向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10μl。4.37℃下孵育。5.向各孔中加入10μl的CCK-8溶液d)。6.37℃下孵育1-4小时。e)7.测定450nm处的OD值。a)使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。b)建议使用CO2培养箱过夜预培养。c)使用培养基或PBS来制备溶液。d)如果待测溶液有还原性,测定不含细胞,但含有CCK-8的待测溶液在450nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入CCK-8,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的100μl培养基和10μlCCK-8进行检测。e)白细胞可能需要培养较长时间。CCK-8试剂盒特价促销CCK-8试剂盒特价促销专业生化试剂生产商专业分子试剂供应商特价【021-54100800】优质试剂!质量放心!价格Zdi!为ZG生物产业做贡献欢迎新老客户咨询[详细]
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2018-09-02 10:00
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预测细胞毒性新方法
- 在体外快速的、GX的、可靠的早期预测毒性对药物研发、减少药物临床试验风险至关重要。利用现代生命科学的新进展,建立和应用新药临床前安全性评价和毒理学机制研究的新技术、新方法和新模型成为当今国际新药研发的新趋势。[详细]
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2021-02-19 13:57
应用文章
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人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4elisa定量试剂盒
- 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4elisa定量试剂盒年终火力全开,我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后及时进行检测,其适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型,价格优惠,质量保证,Zda限度的节省实验经费。英文学名:HumancytotoxicTlymphocyteassociatedantigen4,CTLA-4ELISAKit科研名称:人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)ELISA检测试剂盒操作原理:细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxicTlymphocyteantigen-4CTLA-4)是表达于淋巴细胞表面的与免疫信号传递相关的免疫球蛋白超家族竞争性的与B7结合。当CTLA-4与其配体B7结合后CD28便失去与B7结合传递刺激性信号的机会T细胞的活化受到YZT细胞杀伤肿瘤细胞的功能便会降低。CTLA-4基因多态性通过多种方式影响其蛋白分子的表达与多种疾病的发SF展相关。E-(Hu)(12)-06674人Syndecan-3/(SDC3)ELISA检测,英文名:SDC3ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06675人s腺苷同型半胱氨酸(SAH)ELISA检测,英文名:S-adenosylhomocysteine,SAHELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06676人TARDNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)ELISA检测,英文名:TARDBPELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06677人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA检测,英文名:TIEG1ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06678人TH糖蛋白(THP)ELISA检测,英文名:THPELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06679人Toll样受体1(TLR1)ELISA检测,英文名:TLR1ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06680人Toll样受体3(TLR3)ELISA检测,英文名:TLR3ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06681人Toll样受体4(TLR4)ELISA检测,英文名:TLR4ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06682人Toll样受体5(TLR5)ELISA检测,英文名:TLR5ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06683人Toll样受体6(TLR6)ELISA检测,英文名:TLR6ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06684人Toll样受体7(TLR7)ELISA检测,英文名:TLR7ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06685人Toll作用蛋白(TOLLIP)ELISA检测,英文名:TOLLIPELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06686人Traf2结合蛋白(T2BP)ELISA检测,英文名:T2BPELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06687人Trem样转录因子1(TREML1)ELISA检测,英文名:TREML1ELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06688人T淋巴细胞白血病病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗体ELISA检测,英文名:HTLV-Ⅰ/IIantibodyELISAkit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06689人T细胞表面糖蛋白CD1a(CD1A)ELISA检测,英文名:CD1AELISAKit,规格:48T/96TE-(Hu)(12)-06690人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA检测,英文名:SNRPAELISAkit,规格:48T/96T[详细]
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2018-09-14 10:00
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磷酸化细胞外信号试剂盒检测说明
- 磷酸化细胞外信号试剂盒检测说明酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T5pmol/L-150pmol/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)水平。用纯化的人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK),再与HRP标记的磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(240pmol/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120pmol/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60pmol/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30pmol/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15pmol/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5pmol/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-10-09 10:00
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小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (CTLA-4)ELISA试剂盒
- 小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CTLA-4单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CTLA-4与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CTLA-4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CTLA-4浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CTLA-4浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):30ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。2.标准品液配制:使用前加入3ml蒸馏水混匀,配成10ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CTLA-4含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CTLA-4检测浓度小于8pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠CTLA-4。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于11%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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T细胞增殖实验操作流程
- T细胞增殖实验操作流程[详细]
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2018-10-20 10:00
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培养细胞增殖过程注意事项
- 培养细胞增殖过程注意事项体内细胞生长在动态平衡环境中,而组织培养细胞的生存环境是培养瓶、皿或其它容器,生存空间和营养是有限的。当细胞增殖达到一定密度后,则需要分离出一部分细胞和更新营养液,否则将影响细胞的继续生存,这一过程叫传代。每次传代以后,细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。另外,很多细胞特别是正常细胞,在体外的生存也不是无限的,存在着一个发展过程。所有这一切,使组织细胞在培养中有着一系列与体内不同的生存特点。根据培养过程中是否需要分割培养物进行再培养而将细胞培养分为原代培养和传代培养。一、原代培养(一)过程原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种及培养等步骤。原代培养的方法很多,基本和Z常用的是组织块培养法和分离细胞法。1、组织块培养法(1)基本操作过程1)、用培养液湿润所取组织材料,并用锋利的眼科剪将附在其上的脂肪和结缔组织去除干净。再用平衡液(PBS)或Hanks液漂洗;用锋利的眼科弯剪将组织块剪成小块;再用PBS或Hanks液漂洗多次,直至液体不浑浊、无油滴、清亮为止。2)、用湿润的吸管吸取切碎的组织块,清清吹到培养瓶皿中,并将其按一定间距均匀放在培养瓶底壁上,量不要过多,要将组织块切面贴在培养瓶底壁上;3)、将培养瓶翻转,使瓶底朝上,在种植了组织块一侧的对侧面加足培养液,勿使组织块与培养液接触,塞紧瓶塞;4)、将种植了组织块的一侧朝上,静置于37℃培养箱中;待组织块贴壁1h到3h后翻瓶,使贴壁的组织块浸没与培养液中,静置;5)、每隔2到3天更换一次培养液,或者根据培养瓶种颜色的变化确定换液时间。2、注意事项1)、组织块接种后的前3天,从组织块向外迁徙的细胞数很少,组织块的黏附不牢固,在观察和移动的过程中,注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动,否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。2)、加入的培养液不宜过多,避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。3)、用组织块培养时,要及时观察,当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的细胞,因为已漂浮的组织块和那些细胞碎片已经死亡,它们产生的有毒物质会影响原代细胞的生长,要及时清除。[详细]
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2024-10-03 20:19
产品样册
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压缩机参数说明
- 压缩机参数说明[详细]
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2024-09-14 09:06
课件
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人胆囊收缩素8(CCK-8)试剂盒说明书
- 人胆囊收缩素8(CCK-8)试剂盒说明书[详细]
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2015-04-30 00:00
期刊论文
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大鼠胆囊收缩素(CCK-8)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠胆囊收缩素(CCK-8)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠CCK-8单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CCK-8与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠CCK-8,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,CCK-8浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CCK-8浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成80ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入80ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CCK-8含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CCK-8检测浓度小于0.3ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠CCK-8。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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人胆囊收缩素(CCK-8)ELISA试剂盒说明书
- 人胆囊收缩素(CCK-8)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CCK-8单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CCK-8与单抗结合,加入生物素化的抗人CCK-8,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CCK-8浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CCK-8浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):80ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成80ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入80ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品40、20、10、5、2.5、1.25、0.625、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CCK-8含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CCK-8检测浓度小于0.3ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CCK-8。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (CTLA-4)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠CTLA-4单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CTLA-4与单抗结合,加入生物素化的抗小鼠CTLA-4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CTLA-4浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CTLA-4浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):30ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清可能需要稀释,请先做预实验,以确定稀释倍数。2.标准品液配制:使用前加入3ml蒸馏水混匀,配成10ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CTLA-4含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CTLA-4检测浓度小于8pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的小鼠CTLA-4。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于11%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:00
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人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (CTLA-4)ELISA试剂盒说明书
- 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人CTLA-4单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的CTLA-4与单抗结合,加入生物素化的抗人CTLA-4,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液,在450nm处测OD值,CTLA-4浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中CTLA-4浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):5ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。尿液2倍稀释(取100ul,加标本稀释液100ul,稀释2倍)后检测。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成10ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入10ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31.2、15.6、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应CTLA-4含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的CTLA-4检测浓度小于8pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人CTLA-4。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于11%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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重组人角质细胞生长因子异构体YZ兔角膜基质细胞增殖分
- 重组人角质细胞生长因子异构体YZ兔角膜基质细胞增殖分[详细]
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2012-07-12 00:00
安装说明
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产品应用(91)细胞毒性:在SpectraMax L化学发光微孔板读板机上用Lonza ViaLight Plus和ToxiLight检测试剂盒进行细胞毒性检测
- 生物发光细胞毒性检测能提供更高的检测限、速度和准确性, 已有文献证实(Crouch et al., 1993)。[详细]
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2021-02-26 12:28
应用文章
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实时监测细胞增殖和细胞周期
- 生物研究和药物发现越来越需要扩大基于细胞的检测方法的多样性和复杂性。活细胞检测可以实时监测细胞反应,并提供关于化合物治LX果和生物复杂性的重要见解。[详细]
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2021-02-20 09:53
应用文章
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实时监测细胞增殖和细胞周期
- 实时监测细胞增殖和细胞周期[详细]
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2024-09-11 17:49
应用文章
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大鼠胆囊收缩素八肽(CCK-8)检测试剂盒
- 大鼠胆囊收缩素八肽(CCK-8)检测试剂盒[详细]
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2024-09-28 15:43
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