精子DNA吖啶橙荧光检测试剂盒产品说明书

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

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• 精子DNA吖啶橙荧光检测试剂盒产品说明书

  精子DNA吖啶橙（acridineorange）荧光检测试剂盒产品说明书主要用途精子DNA吖啶橙（acridineorange）荧光检测试剂是一种旨在使用吖啶橙染料使单链和双链DNA呈现不同荧光，确定精子染色质质量或DNA损伤的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体精子细胞以及冻存精子细胞。产品严格无菌，即到即用，操作简便，性能稳定，荧光清晰。技术背景在男科学（Andrology）中，精子（spermatozoa）分析提供了精子生成（spermatogenesis）、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力（vitality）、运动能力（motility）、授精潜力（fertilizingpotential）、膜结构或染色质结构完整性（integrity）、顶体反应（acrosomalreaction）功能的评价是精子分析的重要指标，也是决定人工受孕或体外授精（invitrofertilization；IVF）的重要参数。精子DNA损伤或染色质质量是不育症的主要因素之一。使用阳离子三环胺荧光染料吖啶橙（Acridineorange；AO）染色技术，是精子染色质分析和授精效率评价的Z常用的方法。基于正常精子细胞的染色质完整性和DNA双链特性，作为DNA染色剂之一的吖啶橙与正常非变性DNA，即双链DNA嵌合（intercalate）时，呈现绿色荧光（激发波长488nm，散发波长530nm）；而与变性DNA，即单链DNA结合时，呈现红色荧光（激发波长488nm，散发波长630nm），以此定量分析精子质量或DNA损伤。产品内容清理液（ReagentA）毫升固着液（ReagentB）毫升染色液（ReagentC）毫升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里；染色液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于样品操作血细胞计数器：用于细胞计数载玻片和盖玻片：用于精子细胞爬片（共聚焦）荧光显微镜：用于观察染色的精子细胞细胞流式仪：用于分析染色的精子细胞实验步骤一、细胞流式仪分析1．移取新鲜获得的1毫升精液（30分钟至1小时内）到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群5．在血细胞计数器上进行精子细胞计数：1×107精子细胞/毫升6．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g7．小心抽去上清液8．重复实验步骤4至7一次（不包括实验步骤5）9．加入xx微升染色液（ReagentB），混匀颗粒群10．室温下孵育10分钟，避免光照11．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g12．小心抽去上清液13．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群14．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g15．小心抽去上清液16．重复实验步骤13至15一次17．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群18．即刻进行细胞流式仪双通道分析：观察10000个细胞以上，200细胞/秒；激发波长200mW，散发波长16mW激发波长488nm488nm匹配荧光染料异硫氰酸荧光素（FITC）藻红蛋白（phycoerythrin；PE）荧光颜色绿色红色散发波长530630流式仪通道FL1FL3荧光增强正常精子DNA异常精子DNA19．细胞流式仪检测正常精子DNA（双链DNA）参考图像如下（X轴：FL3；Y轴：FL1；R1左下角为细胞碎屑；R2为正常精子细胞；R3为异常精子细胞；R4为未成熟精子细胞）二、荧光显微镜分析1．移取新鲜获得的1毫升精液（30分钟至1小时内）到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群5．在血细胞计数器上进行精子细胞计数：1×107精子细胞/毫升6．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g7．小心抽去上清液8．重复实验步骤4至7一次（不包括实验步骤5）9．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群10．即刻移取20微升到洁净的载玻片一端11．用盖玻片或另一个载玻片推片12．置于空气中凉干13．加上xx微升固着液（ReagentB），覆盖样品表面14．室温下孵育2小时15．小心抽去固着液16．小心加上xx微升染色液（ReagentC），覆盖样品表面17．室温下孵育5分钟，避免光照18．小心抽去染色液19．小心加上xx微升清理液（ReagentA），覆盖样品表面20．小心抽去清理液21．盖上盖玻片22．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下观察并计数（注意：每个视野计数200个精子）23．分析结果（参考图）观察红色荧光：滤波器激发波长488nm，散发波长630nm――可见黄色、桔红色至红色荧光，表明精子DNA损伤包括单链DNA观察绿色荧光：滤波器激发波长490nm，散发波长530nm――可见绿色荧光，表明精子DNA正常注意事项1．本产品为50次操作2．操作时须戴手套3．样品检测前，建议在血细胞计数器上进行精子细胞计数4．精子细胞计数时乘上稀释倍数104。标准血细胞计数器（Hemocytometer）的计算方法是：1毫米方块的细胞计数X104（稀释倍数）＝实际细胞数/毫升5．染色完成后，即刻进行检测分析，否则由于其毒性导致精子DNA异常6．如果流式细胞仪出现干扰，建议使用630nm散发波长，或进行补偿处理，建议使用诱导处理样品：10单位DNaseI/毫升37℃孵育10分钟或直接70℃孵育30分钟7．本产品常用于冻存精子细胞的检测分析8．本产品可以用于精子染色质结构分析（SpermChromatinStructureAssay；SCSA），分析参数如下：%DFI%HDS名词解释DNA断裂指数DNAFragmentationIndexDNA着色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN计算方法红色荧光：红色＋绿色荧光之比高亮绿色荧光参考值正常人：小于15％正常人：小于10％阈值：小于30％阈值：小于15％高生育力：0－15％中等生育力：16－27％低或差生育力：27－30％参数意义DNA损伤程度精子成熟程度9．本公司提供系列发育生物学相关检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定荧光清晰[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 精子DNA 吖啶橙（acridine orange）荧光检测试剂盒说明书

  精子DNA 吖啶橙（acridine orange）荧光检测试剂盒说明书[详细]

  2015-05-27 00:00

  课件

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• 活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒产品说明书

  活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-04-23 00:00

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• 细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书

  主要用途细胞DNA损伤彗星（Comet）完全荧光检测试剂是一种旨在采用动物细胞碱性凝胶电泳，在电场环境下，损伤变性的DNA片段迁移形成特定的形态，即DNA移动尾巴，来进行体外评价和半定量分析DNA损伤程度的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于新鲜动物细胞的DNA损伤研究，包括DNA链断裂、氧化性碱基损伤、DNA剪切损伤、DNA交联、DNA修复等，应用于环境和药物毒理学、放射学、氧化应急反应等研究。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，操作简便，重复一致。技术背景彗星检测技术（Cometassay），又称为单细胞凝胶电泳检测技术（singlecellgelelectrophoresisassay；SCGE）或微凝胶电泳检测技术（microgelelectrophoresisassay），是基于变性切离的DNA片段，在电场的影响下，从细胞中移出的原理，而完整的超螺旋DNA仍然保持在细胞核内。通过凝胶电泳，呈现出分子迁移图形，形成彗星拖尾（comettail）现象，即完整DNA的细胞染色体为“头"，而松散和断裂的DNA为“尾"，以此评价DNA损伤程度。这是分析单一细胞DNA链断裂的敏感方法之一。其技术方法的基本步骤是：**，细胞固定包埋在凝胶里；第二，细胞裂解处理；第三，DNA变性处理；第四，电泳迁移；第五，染色和图像分析。由此观察DNA迁移形态，进行体外检测，成为细胞DNA损伤研究的基本手段。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-12 00:00

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• 活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）-完整性吖啶橙荧光检测试剂盒

  活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒产品说明书主要用途活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂是一种旨在通过吖啶橙吸收和细胞内再分布检测技术，选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色，即存在于或由溶酶体释放到细胞浆的荧光染料的不同荧光强度变化，来分析和观察溶酶体膜通透性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞溶酶体（动物、人体、昆虫等）膜通透性的检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。技术背景溶酶体（lysosome）是一种动态性的、多态性的、含有水解酶的细胞器，具有接受和降解来自于分泌性、内吞性（endocytic）、自噬性（autophagic）、吞噬性（phagocytic）膜运转通路中的大分子。其功能是膜依赖性，具有和防御作用。溶酶体膜是溶酶体内基质和胞浆之间的生理屏障，为整合性糖蛋白，防止细胞自我降解。一旦溶酶体膜去稳定（destabilization），例如碱性化或内容物移位（translocation），将导致质子和水解酶外漏，而造成细胞器功能异常，进而产生细胞坏死、凋亡，以及病理症状，例如朊病毒脑病（prionencephalopathies）、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰质炎病毒感染、补体激活型肺损伤（complementactivation-producedlunginjury）、急性组织损伤等疾病。其中膜通透性增加，是溶酶体膜去稳定性或去完整性的标志之一，溶酶体内容物大量释放到胞浆中，直接影响细胞的存活。吖啶橙（acridineorange；AO）是一种亲溶酶体（lysomotropic）异染性（metachromatic）的荧光染料，在完整的溶酶体内，为质子化（protonated）寡聚体（oligomeric）形式，呈现红色荧光（激发波长555nm，散发波长617nm），而在胞浆内，为单体去质子化形式，呈现绿色荧光（激发波长490nm，散发波长528nm）。吖啶橙进入溶酶体后重新分布，即吸收和细胞内再分布（uptakeandredistribution），用于分析溶酶体膜通透性状况。产品内容清理液（ReagentA）毫升染色液（ReagentB）微升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备24孔细胞培养板：用于贴壁细胞染色的容器1.5毫升离心管：用于细胞染色的容器微型台式离心机：用于沉淀细胞培养箱：用于染色孵育（共聚焦）荧光显微镜：用于细胞荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于细胞荧光定量分析细胞流式仪：用于细胞荧光分析实验步骤贴壁细胞染色准备1个细胞培养24孔板的待测细胞（注意：可以使用载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和其它培养孔板，见注意事项8）小心抽去细胞培养液小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA）到1个细胞培养孔，覆盖培养孔表面小心抽去清理液小心沿着孔壁加入xx微升染色液（ReagentB）到1个细胞培养孔，覆盖培养孔表面放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟，避免光照小心抽去染色液（ReagentB）小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA）到细胞培养孔小心抽去清理液重复实验步骤8和9一次小心沿着孔壁加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA）到细胞培养孔选择下列方式之一进行操作：（A）使用倒置荧光显微镜观察（定性检测）：激发波长490nm，散发波长528nm――绿色荧光增强，表明膜通透性（LMP）增强激发波长555nm，散发波长617nm――红色荧光减弱，表明膜通透性（LMP）增强使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测（定量检测）：激发波长490nm，散发波长528nm――RFU升高，表明膜通透性（LMP）增强激发波长555nm，散发波长617nm――RFU降低，表明膜通透性（LMP）增强悬浮细胞或脱离细胞染色将悬浮细胞或脱离细胞（1X106细胞）移入到1.5毫升离心管放进微型台式离心机离心5分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA），混匀细胞颗粒群放进微型台式离心机离心5分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA），混匀细胞颗粒群加入xx微升含有染色液（ReagentB），充分混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟，避免光照放进微型台式离心机离心5分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA），混匀细胞颗粒群放进微型台式离心机离心5分钟，速度为300g（或2000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液重复实验步骤12至14一次加入xx微升37℃预热的清理液（ReagentA），混匀细胞颗粒群选择下列方式之一进行操作：进行细胞流式仪分析：FL1（激发波长488nm，散发波长528nm），或FL3（激发波长555nm，散发波长617nm）观察10000个细胞以上――FL1：波峰右移，表明膜通透性（LMP）增强FL3：波峰左移，表明膜通透性（LMP）增强或使用（共聚焦）荧光显微镜观察（定性检测）：1）移取10微升上述细胞悬液到载波片上，盖上盖玻片激发波长490nm，散发波长528nm――绿色荧光增强，表明膜通透性（LMP）增强激发波长555nm，散发波长617nm――红色荧光减弱，表明膜通透性（LMP）增强或使用荧光分光光度仪检测（定量检测）：1）移取500微升上述细胞悬液到1毫升比色杯2）加入xx微升清理液（ReagentA）3）上下倾倒混匀数次4）放进荧光分光光度仪：激发波长490nm，散发波长528nm――RFU升高，表明膜通透性（LMP）增强激发波长555nm，散发波长617nm――RFU降低，表明膜通透性（LMP）增强注意事项本产品为20次（0.5毫升体系/次）操作操作时，须戴手套操作时，避免污染母液建议细胞染色完成后，即刻进行荧光检测分析孵育时，必须避免光照本产品适合各种规格的培养细胞：载玻片，载玻片培养皿，35mm培养皿，和各种培养孔板，须相应调整处理液：操作容器建议操作体系载玻片100微升载玻片培养皿1毫升35mm培养皿1毫升96孔培养板100微升48孔培养板200微升24孔培养板500微升12孔培养板1毫升6孔培养板2毫升25cm2细胞培养瓶3毫升可以使用绿色荧光中激发波长490nm±20，散发波长528±38；红色荧光中激发波长555±28，散发波长617±50用户可以持续读数5分钟，观察荧光读数的增强或减低，以表明荧光染料的移位变化本公司提供系列溶酶体分析试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定荧光清晰[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂盒

  主要用途活体细胞溶酶体膜通透性（LMP）/完整性吖啶橙荧光检测试剂是一种旨在通过吖啶橙吸收和细胞内再分布检测技术，选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色，即存在于或由溶酶体释放到细胞浆的荧光染料的不同荧光强度变化，来分析和观察溶酶体膜通透性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞溶酶体（动物、人体、昆虫等）膜通透性的检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。技术背景溶酶体（lysosome）是一种动态性的、多态性的、含有水解酶的细胞器，具有接受和降解来自于分泌性、内吞性（endocytic）、自噬性（autophagic）、吞噬性（phagocytic）膜运转通路中的大分子。其功能是膜依赖性，具有和防御作用。溶酶体膜是溶酶体内基质和胞浆之间的生理屏障，为整合性糖蛋白，防止细胞自我降解。一旦溶酶体膜去稳定（destabilization），例如碱性化或内容物移位（translocation），将导致质子和水解酶外漏，而造成细胞器功能异常，进而产生细胞坏死、凋亡，以及病理症状，例如朊病毒脑病（prionencephalopathies）、阿茨罕默病、心肌缺血、脊髓灰质炎病毒感染、补体激活型肺损伤（complementactivation-producedlunginjury）、急性组织损伤等疾病。其中膜通透性增加，是溶酶体膜去稳定性或去完整性的标志之一，溶酶体内容物大量释放到胞浆中，直接影响细胞的存活。吖啶橙（acridineorange；AO）是一种亲溶酶体（lysomotropic）异染性（metachromatic）的荧光染料，在完整的溶酶体内，为质子化（protonated）寡聚体（oligomeric）形式，呈现红色荧光（激发波长555nm，散发波长617nm），而在胞浆内，为单体去质子化形式，呈现绿色荧光（激发波长490nm，散发波长528nm）。吖啶橙进入溶酶体后重新分布，即吸收和细胞内再分布（uptakeandredistribution），用于分析溶酶体膜通透性状况。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 精子蛋白17（Sp17）ELISA试剂盒说明书

  精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：体液精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒试验原理：BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒操作注意事项1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。精子蛋白17(Sp17)ELISA试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的BFGF标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/mlT4兔子甲状腺素规格：48T/96TTIMP-1兔子基质金属蛋白酶YZ因子1规格：48T/96TMMP-9兔子基质金属蛋白酶9规格：48T/96TMMP-5兔子基质金属蛋白酶5规格：48T/96TMMP-4兔子基质金属蛋白酶4规格：48T/96TMMP-3兔子基质金属蛋白酶3规格：48T/96TCr兔子骨胶原交联规格：48T/96TT兔子睾酮规格：48T/96THGF兔子肝细胞生长因子规格：48T/96TTE兔子端粒酶规格：48T/96TCETP兔子胆固醇酯转移蛋白规格：48T/96TMCP-1/CCL2/MCAF兔子单核细胞趋化蛋白1规格：48T/96TPRL兔子催乳素规格：48T/96T[详细]

  2018-10-09 10:00

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• 粪便DNA高质纯化试剂盒产品说明书

  粪便DNA高质纯化试剂盒产品说明书主要用途粪便DNA高质纯化试剂是一种旨在经过标准分离法以后，由粪便（人体、动物等）中分离获得的DNA，进行二度亲和纯化，Zda限度地去除复杂又难以去除的蛋白、金属成分、杂质等非核酸类物质的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其应用于即时PCR、RLPF分析、测序、杂交、遗传鉴定、突变分析、性别鉴定、司法鉴定等。产品即到即用，性能稳定，操作简单，纯度出色，重复性好，堪称国际上同类产品**。技术背景粪便中含有许多污染成分，降解DNA和YZPCR反应。针对标准处理无法有效地去除顽固干扰因子的情况下，运用特殊亲和技术，达到高度纯化的效果。产品内容缓冲液（ReagentA）2毫升亲和液（ReagentJ）2毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于DNA纯化操作的容器微型台式离心机（例如EPPENDORF5415）：用于沉淀反应物恒温水槽：用于孵育反应物实验步骤1．准备好从1克粪便样品分离的DNA产物（100微克DNA总量）2．移入到1.5毫升离心管3．加入适量的缓冲液（ReagentA）到总容量为100微升4．加入100微升亲和液（ReagentB）（注意：使用前，先摇匀沉淀的亲和液（ReagentB））5．用手充分混匀6．放进56℃恒温水槽孵育30分钟，期间用手混匀一次7．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如EPPENDORF5415）8．小心移出180微升上清液到新的1.5毫升离心管9．移出适量DNA溶液进行后续PCR反应或保存在－20℃冰箱里注意事项1．本产品为20次（1克粪便样品的DNA产物）操作或50次（200毫克粪便样品的DNA产物）操作2．操作时，须戴手套3．根据用户样品量大小，相应调整试剂用量4．亲和液（ReagentB）使用前，须摇匀5．建议使用粪便DNA分离试剂盒（HL20011.1）作为标准分离法操作6．本公司提供系列粪便核酸纯化试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定纯度优异[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒产品说明书

  植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒产品说明书[详细]

  2024-09-28 00:05

  期刊论文

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• 胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书

  胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书[详细]

  2014-12-26 00:00

  期刊论文

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• 纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒产品说明书

  主要用途纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂是一种旨在通过钙黄绿素载入后离心处理或钴淬灭技术，选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色，而存在于或由线粒体释放到线粒体外的荧光染料，即刻发生荧光去除或淬灭，来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体膜通道孔活性（瞬时或长期开放状态）的检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。技术背景线粒体膜通道孔（mitochondrialpermeabilitytransitionpore；MPTP）是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时，线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。膜通道孔的开放，显著改变线粒体的通透性。钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放，而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。钙黄绿素-AM，又称双甲亚胺二乙酸钠荧光素－乙酰氧基甲基酯【bis（bis-carboxymethylaminomethylfluorescein）-acetoxymethylester】，作为荧光探针：**，适宜的分子量622kd，小于1.5kd；第二，几乎不具有膜结合性；第三，不是线粒体酶的底物；第四，容易进入细胞及其线粒体。钙黄绿素-AM进入线粒体后，被内酯酶切离，产生具有极性的荧光性强的钙黄绿素，被线粒体俘获。同时线粒体外的钙黄绿素通过离心去除或受到其淬灭剂钴离子的淬灭。一旦线粒体膜通道孔瞬时开放，钙黄绿素释放出线粒体外，由于离心处理或被钴离子淬灭。线粒体内钙黄绿素荧光的变化，表明膜通道孔的开放状态。产品内容染色液（ReagentA）微升中和液（ReagentB）毫升保存液（ReagentC）毫升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentA）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备黑色96孔板：用于线粒体荧光分析的容器1.5毫升离心管：用于线粒体染色的容器载波片/盖玻片：用于线粒体样品存放后荧光分析微型台式离心机：用于沉淀线粒体培养箱：用于染色孵育（共聚焦）荧光显微镜：用于线粒体荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于线粒体荧光定量分析实验步骤直接法准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品（总量为0.2毫克）到1.5毫升离心管加入xx微升染色液（ReagentA），混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟，避免光照放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的保存液（ReagentC），混匀颗粒群放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去保存液（ReagentC）小心加入xx微升37℃预热的保存液（ReagentC），混匀颗粒群选择下列方式之一进行操作：（A）使用（共聚焦）荧光显微镜观察（定性检测）：1）移取10微升上述悬液到载波片上，盖上盖玻片2）激发波长488nm，散发波长505nm――绿色荧光减弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测（定量检测）：1）移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪：激发波长488nm，散发波长505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增强间接法实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentA）置入冰槽里融化，中和液（ReagentB）放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液（ReagentA）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升中和液（ReagentB），混匀后，标记为染色工作液，置入暗室里。然后进行下列操作。准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品（总量为0.2毫克）到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升含有染色液（ReagentA）和中和液（ReagentB）的染色工作液，充分混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟，避免光照选择下列方式之一进行操作：使用（共聚焦）荧光显微镜观察（定性检测）：1）移取10微升上述细胞悬液到载波片上，盖上盖玻片（每隔5分钟检测一次，持续30分钟）2）激发波长488nm，散发波长505nm――绿色荧光减弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测（定量检测）：1）移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪（每隔5分钟检测一次，持续30分钟）：激发波长488nm，散发波长505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增强注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套染色前，所有试剂溶液，除染色液（ReagentA）外，需37℃预热建议染色完成后，即刻进行荧光检测分析孵育时，必须避免光照本产品友好使用于双重染色或重叠染色如果不具备505nm散发波长的滤波器，可以使用505nm至530nm中的任一波长如果黑色96孔板的背景读数过高，可以选择530nm散发波长如果膜通道孔为瞬时开放（transient），则荧光缓慢且自发降低本公司提供膜通道孔YZ剂：D0.2毫摩尔环胞素A（cyclosporineA）－12226，维护荧光完整本公司提供系列线粒体分析试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定荧光清晰[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 精子细胞氧化应激活性氧（ROS）高质荧光检测试剂盒产品说明书

  主要用途精子细胞氧化应激活性氧（ROS）高质荧光检测试剂是一种旨在使用透膜荧光染色剂氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯，在细胞氧化条件下，产生荧光，来定量检测精子细胞内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于动物和人体精子细胞的活性氧族的检测。可以被用于细胞凋亡、衰老、代谢和营养学，以及发育生物学（男性不育）等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简便，性能稳定，荧光清晰。技术背景超氧自由基阴离子（superoxideradical；O2-）、过氧化氢（hydrogenperoxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxylradical；OH-）、过氧化基（peroxylradical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、单线态氧气（singletoxygen）等细胞内活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的产生和增多，甚而导致诸如男性不育、冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。其中精子细胞（spermatozoa）对于活性氧较为敏感：低浓度活性氧可以调节正常精子功能、精子获能、顶体反应、精卵融合等；高浓度活性氧则影响精子细胞的质量和功能，因为精子细胞质膜含有大量不饱和脂肪酸，胞浆含有少量的祛除活性氧的相关酶蛋白，由此活性氧容易造成精子质膜的流动性和DNA完整性受到损害，精子运动能力降低，不能参与授精活动，Z终导致特发性不育症（idiopathicinfertility）。氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester；CM－H2DCFDA）是取代二氯二氢荧光素二乙酯（2′,7′-dichlorodihydrofluorescindiacetate；DCFH-DA）的升级产品，一种完全自由通过细胞膜，并在细胞内长期滞留而不易外漏的染色剂。一旦被过氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化，便产生荧光。据此测定精子细胞内活性氧族的浓度。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书

  细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书[详细]

  2024-09-28 00:46

  安装说明

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• 通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书

  通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-09-15 00:00

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• 通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书

  通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-05-04 00:00

  课件

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• 荧光指示剂 吖啶橙|价格

  10127-02-3吖啶橙促销产品简介AcridineOrange吖啶橙产品编号规格价格A8120-11g50.00A8120-55g240.00A8120-2525g700.00说明：肿瘤细胞和细菌的染色；荧光指示剂，用于检测琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中的核酸。别名：3,6-Bis(dimethylamino)acridinehydrochloridezincchloridedoublesalt；3,6-Bis(dimethylamino)acridiniumchloridehemi(zincchloridesalt)；BasicOrange14分子式：C17H20ClN3HCl1/2ZnCl2分子量：369.96CAS＃：10127-02-3外观：橙红色粉末特性：组成：染料含量，~80%溶解性：溶于水，参考浓度1mg/ml。储存条件：室温干燥保存FromSigmaA601410127-02-3吖啶橙促销特价促销5g240元热线电话【021-54100800】其他产品附录：CAS号货号solarbio品名产地规格S0083槲皮素标准品solarbio20mg146-68-9I8150碘硝基氯化四氮唑蓝(INT）进分250mg79-14-1G8840羟基乙酸glycolicacid进分100g134-03-2S9440Sodiumascorbate抗坏血酸钠solarbio25g13573-16-5R8160Reineckesalt雷氏盐（利英纳克盐）solarbio25g120-72-9I8190Indole吲哚solarbio10G1465-25-4N8320N-1-萘基乙二胺盐酸盐solarbio5G6409-77-4C8850Nuclearfastred核固红进分5G60-92-4C8860cAMP环磷酸腺苷solarbio1G259962L8100水解乳蛋白BactoTMTCLactalbuminHydrolysateBD500g259962L8100水解乳蛋白BactoTMTCLactalbuminHydrolysateBD100G620-45-1D87102.6-Dichorophenoindophenol,Na2.6二氯酚靛酚钠alfa1G148-24-3H82608-Hydroxyquinoline8-羟基喹啉Solarbio25g68157-60-8F8080-1Forchiorfennron氯吡苯脲（KT-30cppu)国产1G51-21-80597F83005-Fluoro-2'-Deoxyuridine5-氟尿嘧啶amresco1G12771-68-9431Ancymidol环丙嘧啶醇Sigma原装25MG153-18-4R8170Rutinhydrate芸香叶苷（芦丁）国产25G6151-25-3Q8010Meletin或Sophretin.槲皮素国产10G7761-88-8S8480Silvernitrate硝酸银国产10G102129-65-7A8760ADPG腺苷二磷酸葡萄糖sigma10MG21931-53-3U81005-UDP（尿苷-5-二磷酸）solarbio100MG28053-08-9U4625U8080UDPG尿苷5-二磷酸葡萄糖二钠sigma100MG100684-32-0M0630M8090Myoglobin肌球蛋白（肌红蛋白）sigma100mg9007-83-4G5009G8410V-Globulinsfrombovinebloodv-球蛋白sigma1g9010-66-6Z3625Z8010Zein玉米蛋白sigma25gXAD7AmberliteXAD7HP吸附树脂（20-60目）sigma100g优质试剂质量放心价格Zdi为ZG生物产业做贡献ShanghaisolarbioBioscience&TechnologyCo.,LTD[详细]

  2018-09-02 10:00

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• 病毒基因组提取试剂盒（DNA）说明书

  病毒基因组提取试剂盒（DNA）说明书[详细]

  2016-05-25 00:00

  操作手册

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• 细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2016-03-15 00:00

  选购指南

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• 纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2016-03-10 00:00

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