通用型DNA损伤彗星检测试剂盒（中文版说明书）

本文由 上海铭博生物科技有限公司 整理汇编

2018-11-08 10:00 859阅读次数

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• 通用型DNA损伤彗星检测试剂盒（中文版说明书）

  通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途通用型DNA损伤彗星检测试剂是一种旨在采用组织细胞碱性凝胶电泳，在电场环境下，损伤变性的DNA片段迁移形成特定的形态，即DNA移动尾巴，来进行体外评价和半定量分析DNA损伤程度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于新鲜动物细胞、组织、血液、等样品的DNA损伤研究，包括DNA链断裂、氧化性碱基损伤、DNA剪切损伤、DNA交联、DNA修复等，应用于环境和药物毒理学、放射学、氧化应急反应等研究。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，操作简便，重复一致。技术背景彗星检测技术（Cometassay），又称为单细胞凝胶电泳检测技术（singlecellgelelectrophoresisassay；SCGE）或微凝胶电泳检测技术（microgelelectrophoresisassay），是基于变性切离的DNA片段，在电场的影响下，从细胞中移出的原理，而完整的超螺旋DNA仍然保持在细胞核内。通过凝胶电泳，呈现出分子迁移图形，形成彗星拖尾（comettail）现象，即完整DNA的细胞染色体为“头”，而松散和断裂的DNA为“尾”，以此评价DNA损伤程度。这是分析单一细胞DNA链断裂的敏感方法之一。其技术方法的基本步骤是：**，细胞固定包埋在凝胶里；第二，细胞裂解处理；第三，DNA变性处理；第四，电泳迁移；第五，染色和图像分析。由此观察DNA迁移形态，进行体外检测，成为细胞DNA损伤研究的基本手段。其中电泳条件将决定检测的敏感程度。碱性电泳（alkalineelectrophoresis）为常规电泳检测，可以检测单链DNA断裂、双链DNA断裂、大部分无嘌呤核酸位点（apurinicsite）和无嘧啶核酸位点（apyrimidicsite）、碱不稳定DNA结合物（alkali-labileDNAadduct）等DNA损伤。[详细]

  2018-11-08 10:00

  产品样册

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• 通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书

  通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-09-15 00:00

  产品样册

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• 通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书

  通用型DNA损伤彗星检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-05-04 00:00

  课件

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• 细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-12 00:00

  选购指南

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• 细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书

  主要用途细胞DNA损伤彗星（Comet）完全荧光检测试剂是一种旨在采用动物细胞碱性凝胶电泳，在电场环境下，损伤变性的DNA片段迁移形成特定的形态，即DNA移动尾巴，来进行体外评价和半定量分析DNA损伤程度的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于新鲜动物细胞的DNA损伤研究，包括DNA链断裂、氧化性碱基损伤、DNA剪切损伤、DNA交联、DNA修复等，应用于环境和药物毒理学、放射学、氧化应急反应等研究。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，操作简便，重复一致。技术背景彗星检测技术（Cometassay），又称为单细胞凝胶电泳检测技术（singlecellgelelectrophoresisassay；SCGE）或微凝胶电泳检测技术（microgelelectrophoresisassay），是基于变性切离的DNA片段，在电场的影响下，从细胞中移出的原理，而完整的超螺旋DNA仍然保持在细胞核内。通过凝胶电泳，呈现出分子迁移图形，形成彗星拖尾（comettail）现象，即完整DNA的细胞染色体为“头"，而松散和断裂的DNA为“尾"，以此评价DNA损伤程度。这是分析单一细胞DNA链断裂的敏感方法之一。其技术方法的基本步骤是：**，细胞固定包埋在凝胶里；第二，细胞裂解处理；第三，DNA变性处理；第四，电泳迁移；第五，染色和图像分析。由此观察DNA迁移形态，进行体外检测，成为细胞DNA损伤研究的基本手段。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 通用型细胞冻存试剂盒产品说明书（中文版）

  通用型细胞冻存试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2024-09-28 00:08

  期刊论文

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• 损伤分子说明书试剂盒检测说明

  损伤分子说明书试剂盒检测说明本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T2ng/L-80ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肾损伤分子-1（Kim-1）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肾损伤分子-1（Kim-1）水平。用纯化的人肾损伤分子-1（Kim-1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肾损伤分子-1（Kim-1），再与HRP标记的肾损伤分子-1（Kim-1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肾损伤分子-1（Kim-1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肾损伤分子-1（Kim-1）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（160ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-28 07:03

  产品样册

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• －3′末端DNA 生物素标记试剂盒产品说明书（中文版）

  －3′末端DNA 生物素标记试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-06-18 00:00

  操作手册

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• 全血线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书（中文版）

  全血线粒体DNA萃取试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-06-11 00:00

  选购指南

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• 活体细胞线粒体损伤/氧化荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）

  主要用途活体细胞线粒体损伤/氧化荧光测定试剂是一种旨在通过特异性染色剂分析线粒体膜心磷脂的变化来定性或定量测定线粒体内含质量以及自由基、氧化物等对细胞线粒体的毒性与损伤作用的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。技术背景心磷脂（Cardiolipin）是线粒体膜上的主要成分之一。它对细胞氧化特别敏感。线粒体脂类分解，致使心磷脂显著减少，Z终造成线粒体的严重损害。Nonyl-AcrydineOrange（NAO）是一种可自由通过细胞膜的染色剂，特异性地染色线粒体上的心磷脂，并发出荧光。一旦线粒体膜质量减少或受到损害以及被氧化，其荧光显著减弱。[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

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• 真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化（NAO）荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）

  真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化（NAO）荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-02-06 00:00

  期刊论文

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• 真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化（NAO）荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）

  真菌/酵母细胞线粒体损伤/氧化（NAO）荧光测定试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-01-29 00:00

  期刊论文

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• 高通量RNA干扰技术筛选DNA损伤

  本文我们列举了如何通过对磷酸化的组蛋白H2AX和DNA进行免疫荧光双色分析方法来检测DNA损伤。组蛋白H2AX在丝氨酸139位点的磷酸化被认为是药物或辐射造成的DNA损伤的敏感标记。文中也阐明了我们利用RNAi对双色标定DNA损伤分析是一个敏感和快速的自动化过程，而且这种方法被证明可以有效发现新的目标。[详细]

  2021-02-19 13:46

  应用文章

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• 通用型LAMP试剂盒使用说明书

  通用型LAMP试剂盒使用说明书[详细]

  2015-04-21 00:00

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• 组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 说明书（中文版）

  组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 说明书（中文版）[详细]

  2014-12-29 00:00

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• 大鼠（Rat）肾损伤分子（KIM-1） ELISA 检测试剂盒说明书

  大鼠（Rat）肾损伤分子(KIM-1)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：尿液试验原理：KIM-1试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知KIM-1浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将KIM-1和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中KIM-1的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：800pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗KIM-1抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：800pg/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。400pg/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液200pg/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液100pg/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液50pg/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液25pg/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（pg/ml）A800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的KIM-1标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的KIM-1含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-800pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[详细]

  2018-09-14 10:00

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• Z新DNA损伤检测法——应用ImageXpress Nano成像分析系统

  本文详细介绍了自动细胞成像检测DNA损伤的实验方法，细胞样品由小分子化合物处理，经过磷酸化组蛋白H2AX免疫荧光染色后成像。另外，实验中选用了三种细胞系，CHO、Hela和PC-12，分别加入丝裂霉素和依托泊苷进行处理来检测化合物对其的影响。[详细]

  2024-09-12 16:05

  应用文章

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• 植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过钙离子特异性荧光探针Fluo-4，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定植物组织裂解悬液中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解萃取样品中总钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求。Fluo-4，一种与钙离子结合，其荧光强度迅速增强100倍的荧光探针，可以敏感测定微量游离钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长485nm，散发波长520nm，来定量测定植物组织细胞的钙浓度。产品内容清理液（ReagentA）60毫升裂解液（ReagentB）20毫升反应液（ReagentC）6毫升饱和液（ReagentD）2毫升阴性液（ReagentE）2毫升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；反应液（ReagentC）避免光照；有效保证6月[详细]

  2018-11-08 10:00

  产品样册

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• COMPAC-50_彗星试验箱

  COMPAC-50_彗星试验箱[详细]

  2014-11-17 00:00

  标准

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• 病毒基因组提取试剂盒（DNA）说明书

  病毒基因组提取试剂盒（DNA）说明书[详细]

  2016-05-25 00:00

  操作手册

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