小鼠RAW264.7（巨噬）细胞上清液中的TRAP含量选什么试剂盒？

本文由 江莱-试剂,Elisa试剂盒供应商 整理汇编

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• 小鼠RAW264.7（巨噬）细胞上清液中的TRAP含量选什么试剂盒？

  小鼠RAW264.7（巨噬）细胞上清液中的TRAP含量选什么试剂盒？[详细]

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  2018-11-18 10:00

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  主要用途细胞抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）活性染色试剂是一种旨在使用偶联偶氮技术，在酸性环境和酒石酸存在的情况下，呈现出紫红色沉淀现象，来分析细胞样本中酸性磷酸酶表达的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心改良、成功实验证明的。主要适用于动物原生代或培养细胞尤其是细胞和破骨细胞的酶活性检测。可用于骨质细胞病理生理的研究的鉴定。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，灵敏牢固，显色清晰。技术背景抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrateresistantacidphosphatase；TRAP）是一种在哺乳动物内表达的糖化单体金属蛋白酶，970多碱基，320多氨基酸，分子量为35kD。作为破骨细胞的标志，抗酒石酸酸性磷酸酶与破骨细胞调节的骨resorption活性和骨生成代谢有关。抗酒石酸酸性磷酸酶是以酶原形式合成，通过蛋白酶裂解和还原后活化。在酸性环境下，催化磷酸酯键的水解，产生醇和释放磷酸。其特征性为酒石酸抗性而与其它酸性磷酸酶区别。抗酒石酸酸性磷酸酶在破骨细胞（osteoclast）、活化的巨噬细胞、神经细胞以及怀孕期的猪内皮层子宫内膜（endometrium）高度表达。在网状内皮组织增殖（leukaemicreticuloendotheliosis）或毛细胞性白血病（hairycellleukaemia）、戈谢病（Gaucher’sdisease）、爱兹性脑病（HIV-inducedencephalopathy）、骨巨细胞瘤（osteoclastoma）、骨质疏松症（osteoporosis）和代谢性骨病等病人体内抗酒石酸酸性磷酸酶显著。基于底物萘酚AS-MX磷酸盐（naphtholAS-MXphosphate），在酸性环境和酒石酸（tartrate）存在的条件下，酸性磷酸酶催化其水解，释放出萘酚（naphthol-AS），进而与重氮盐耐晒红紫（Fastredviolet）偶联，于是在酶的活动处形成不溶性紫红色沉淀的偶氮染料，由此证明抗酒石酸酸性磷酸酶活性。其反应体系为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com小鼠B7-H4（B7-H4）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗小鼠B7-H4单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的B7-H4与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠B7-H4，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液，在450nm处测OD值，B7-H4浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中B7-H4浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：40ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，配成40ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品4000、2000、1000、500、250、125、62.5、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应B7-H4含量即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的B7-H4检测浓度小于30pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的小鼠B7-H4。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2024-09-29 12:41

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• 电压击穿试验仪选什么传感器精度Z高

  电压击穿试验仪选什么传感器精度Z高[详细]

  2024-09-16 12:00

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• 电压击穿试验仪选什么传感器精度Z高

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  2024-09-20 21:38

  应用文章

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• 使用ImageXpress Pico个人型高内涵系统分析细胞自噬

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  2021-02-20 09:40

  应用文章

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• 使用 ImageXpress Pico 个人型高内涵系统分析细胞自噬

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  2024-09-19 04:52

  应用文章

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• 使用三重四极杆同时分析哺乳动物的细胞培养上清液

  生产生物燃料或生物制药的工业发酵需要常规监测介质条件，如pH、溶解气体、碳源（葡萄糖）和氮源（谷氨酰胺）等，从而优化及控制发酵过程。然而除上述因素外，培养基中还包含其他一些重要生物成分如维生素、核酸和其他主要代谢物，如果一起监控，可以得到更多有关生物过程技术的详细信息。为满足全面分析培养基成分的需求，我们优化了分析条件，开发出“细胞培养分析方法包”，该方法包可以监控下面列出的95种化合物的相对丰度。使用这个方法包，我们研究在杂交癌细胞一周期5天内生长过程中培养基成分的丰度变化。[详细]

  2018-08-26 10:00

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• 电位滴定法测定镀铜液中甲醛的含量

  一、前言 化学镀铜是在具有催化活性的表面上，通过还原剂的作用使铜离子还原析出铜，在化学镀铜中，一个典型的配方是酒石酸钠、硫酸铜、甲醛、氢氧化钠。[详细]

  2025-01-18 16:04

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• 电位滴定法测定泵液中铜离子的含量

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  2025-06-06 15:59

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