资料库
ELISA原理(实验条件、技术要点)
-
本文由 上海研谨生物科技有限公司 整理汇编
2018-09-04 10:00 1320阅读次数
文档仅可预览首页内容,请下载后查看全文信息!
-
立即下载
ELISA原理(实验条件、技术要点)实验条件和技术要点:酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,简称ELISA)与免疫酶测定等名称所指的内容是不相同的,ELISA的内容专指固相吸附技术和免疫酶标抗体(或抗原)技术相结合的一种方法,它是将抗原或抗体包被在固相支持物(或称载体上),然后再进行免疫反应,形成酶标记的抗原抗体复合物,反应完毕,借助底物显示特异结合的标记抗体(或抗原)上的酶活性,用酶与底物反应后生成的有色产物进行光密度测定,达到抗原或抗体定量的目的。在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:1,是检测抗体还是抗原?2,检测的结果是定性还是定量?3,是否需要检测特异抗体的类型?4,所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样?(1)检测抗原Z常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶YZ剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。(2)检测抗体检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的**步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。竞争法检测抗体有两种方法:一种是将标记的抗体和标本同时加入反应孔内,但标记的抗体和标本中的抗体必须是结合抗原的不同决定簇;另一种是先加标本,冲洗后再加标记的抗体。竞争法检测抗体比间接法容易判断结果,并且比较敏感和特异。不论选择哪种方法,ELISA都包括6个步骤:1,抗原或抗体吸附于固相;2.加标本和试剂;3,孵育和冲洗;4,加酶标抗原或抗体;5,加适当的底物;6,检测和分析结果。虽然ELISA法在理论上十分简单,但每一步都有要注意的事项。不论是新设计的ELISA还是沿用其他ELISA方法都有以下几方面技术要点:固相载体的选择和试剂的制备,反应条件和操作的标准化。酶标记抗原竞争法利用混合的未标记抗原和酶标记抗原相互竞争抗体上的结合点,从而进行抗原的定量。未标记抗原的量越大,则酶标记抗原和抗体的结合就越受到YZ。但是竞争法在实验时比较复杂,有时在抗原混合液与相应抗体孵育后,在测定游离抗原与抗体相结合抗原的活性以前,要先进行盐析或有机溶剂沉淀或第二抗体沉淀等方法把两种不同存在形态的抗原分开。并且在加入底物后,容易产生血清色的物质。因此,每次测定时都需做空白对照。由于这些缺点,酶标记抗原竞争法使用不多。促销期间有精美礼品赠送还可以享受免费代测服务。您只需要把标本寄给我们,一星期左右就可以出实验数据。欢迎购买我公司的ELISA试剂盒,我们承诺试剂盒有质量问题包退包换。上海研谨生物公司对外承接RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、WesternBlotting技术服务、动物模型构建服务、SCI论文服务、PCR实验服务,并为广大科研用户提供各种高品质的试剂和服务,如细胞、血清、Elisa试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA产物纯化试剂盒、病毒RNA提取试剂盒、PCR等产品,针对以上各项服务,我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持。
登录或新用户注册
请用手机微信扫描下方二维码
快速登录或注册新账号
微信扫码,手机电脑联动
更多资料
-
ELISA原理(实验条件、技术要点)
- ELISA原理(实验条件、技术要点)实验条件和技术要点:酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,简称ELISA)与免疫酶测定等名称所指的内容是不相同的,ELISA的内容专指固相吸附技术和免疫酶标抗体(或抗原)技术相结合的一种方法,它是将抗原或抗体包被在固相支持物(或称载体上),然后再进行免疫反应,形成酶标记的抗原抗体复合物,反应完毕,借助底物显示特异结合的标记抗体(或抗原)上的酶活性,用酶与底物反应后生成的有色产物进行光密度测定,达到抗原或抗体定量的目的。在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:1,是检测抗体还是抗原?2,检测的结果是定性还是定量?3,是否需要检测特异抗体的类型?4,所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样?(1)检测抗原Z常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶YZ剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。(2)检测抗体检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的**步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。竞争法检测抗体有两种方法:一种是将标记的抗体和标本同时加入反应孔内,但标记的抗体和标本中的抗体必须是结合抗原的不同决定簇;另一种是先加标本,冲洗后再加标记的抗体。竞争法检测抗体比间接法容易判断结果,并且比较敏感和特异。不论选择哪种方法,ELISA都包括6个步骤:1,抗原或抗体吸附于固相;2.加标本和试剂;3,孵育和冲洗;4,加酶标抗原或抗体;5,加适当的底物;6,检测和分析结果。虽然ELISA法在理论上十分简单,但每一步都有要注意的事项。不论是新设计的ELISA还是沿用其他ELISA方法都有以下几方面技术要点:固相载体的选择和试剂的制备,反应条件和操作的标准化。酶标记抗原竞争法利用混合的未标记抗原和酶标记抗原相互竞争抗体上的结合点,从而进行抗原的定量。未标记抗原的量越大,则酶标记抗原和抗体的结合就越受到YZ。但是竞争法在实验时比较复杂,有时在抗原混合液与相应抗体孵育后,在测定游离抗原与抗体相结合抗原的活性以前,要先进行盐析或有机溶剂沉淀或第二抗体沉淀等方法把两种不同存在形态的抗原分开。并且在加入底物后,容易产生血清色的物质。因此,每次测定时都需做空白对照。由于这些缺点,酶标记抗原竞争法使用不多。促销期间有精美礼品赠送还可以享受免费代测服务。您只需要把标本寄给我们,一星期左右就可以出实验数据。欢迎购买我公司的ELISA试剂盒,我们承诺试剂盒有质量问题包退包换。上海研谨生物公司对外承接RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、WesternBlotting技术服务、动物模型构建服务、SCI论文服务、PCR实验服务,并为广大科研用户提供各种高品质的试剂和服务,如细胞、血清、Elisa试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA产物纯化试剂盒、病毒RNA提取试剂盒、PCR等产品,针对以上各项服务,我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持。[详细]
-
2018-09-04 10:00
产品样册
-
实验条件
- 总结了一些常见的实验方法[详细]
-
2018-04-09 10:49
应用文章
-
ELISA的技术要点--试剂的制备
- ELISA的技术要点--试剂的制备试剂的制备 ELISA的主要试剂有固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体和与标记酶直接关联的酶反应底物。以下分别介绍这些试剂的原料和制备方法。 (一)固相载体 检测中可作ELISA中载体的物质很多,Z常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。在ELISA测定过程中,它作为载体和容器,不参与化学反应。重要的是聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后依然保留原来的免疫活性。加之它的价格低廉,所以被普遍采用。 ELISA载体的形状主要有三种:小试管、小珠和微量反应板。小试管的特点是兼作反应的容器,Z后放入分光光度计中比色。小珠一般为直径0.6cm的圆球,表面经磨砂处理后吸附面积大增加。如用特殊的洗涤器,在洗涤过程中使圆珠滚动淋洗,效果更好。Z常用的载体为微量反应板,专用于ELISA测定的产品也称为ELISA试剂盒,国际通用的标准板形是8×12的96孔式。为便于作少量标本的检测,有制成8联或12联孔条的,放入座架后,大小与标准ELISA板相同。ELISA试剂盒的特点是可以同时进行大量标本的检测,并可在特定的比色计上迅速读出结果。现在已有多种自动化仪器用于微量反应板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操作的标准化有重要意义。 良好的ELISA试剂盒应该是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之间和同一板各孔之间性能相近。聚苯乙烯ELISA板由于配料的不同和制作工艺的差别,各种产品的质量差异很大。因此每一批号的聚苯乙烯制品在使用前须检查其性能。常用的检查方法为:以一定浓度的人IgG(一般为10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔内加入适当稀释的酶标抗人IgG抗人IgG抗体,保温后洗涤,加底物显色,终止酶反应后分别测每孔溶液的吸光度。控制反应条件,使各读数在0.8左右。计算所有读数的平均值。所有单个读数与平均读数之差应小于10%。 与聚苯乙烯类似的塑料为聚氯乙烯。作为ELISA固相载体,聚氯乙烯板的特点为质软板薄,可切割,价廉、但光洁度不如聚苯乙烯板。聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯高,但空白值有时也略高。 为比较不同固相在某一ELISA测定中的优劣,可用以下方法加以检验:用其它免疫学测定方法选出一个典型的阳性标本和一个典型的阴性标本。将它们分别进行一系列稀释后,在不同的固相载体上按预定的ELISA操作步骤进行测定,然后比较测定结果。在哪一种载体上阳性结果与阴性结果判别Zda,这种载体就是这一ELISA测定的Z合适的固相载体。 除塑料制品外,固相酶免疫测定的载体还有两种材料:一是微孔滤膜,如硝酸纤维素膜、尼龙膜等。另一种载体是以含铁的磁性微粒制作的,反应时固相微粒悬浮在溶液中,具有液相反应的速率,反应结束后用磁铁吸引作为分离的手段,洗涤也十分方便,但需配备特殊的仪器。 (二)抗原和抗体 在ELISA实施过程中,抗原和抗体的质量是实验是否成功的关键因素。本法要求所用抗原纯度高,抗体效价高、亲和力强。 ELISA所用抗原有三个来源:天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于动物组织或体液、微生物培养物等,一般含有多种抗原成分,需经纯化,提取出特定的抗原成分后才可应用,因此也称提纯抗原(purifiedantigen)。重组抗原(recombinantantigen)和多肽抗原(peptideantigen)均为人工合成品,使用安全,而且纯度高,干扰物质少。因此虽然制备合成抗原有较高的技术难度且要求较为昂贵的仪器设备和试剂,其应用仍十分普遍,特别是对那些天然抗原不易得到的试验,更显出其独到之处。 用于ELISA的抗体有多克隆的和单克隆的。抗血清成分复杂,应从中提取IgG才可用于包被固相或酶标记。含单克隆抗体的小鼠腹水中的特异性抗体含量较高,有时可适当稀释后直接进行包被。制备酶结合物用的抗体的质量往往要求有较高的纯度。经硫酸铵盐析纯化的IgG可进一步用各种分子筛层析提纯。也可用亲和层析法提纯特异性IgG,如用酶消化IgG后提取的Fab片段,则效果更好。 (三)免疫吸附剂 固相的抗原或抗体称为免疫吸附剂。将抗原或抗体固相化的过程称为包被(coating)。由于载体的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体,通常将抗原或抗体溶于缓冲液(Z常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于ELISA板孔中在4℃,经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低,固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖,其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面,Z后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下,如在包被后再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除这种干扰。这一过程称为封闭(blocking)。包被好的ELISA试剂盒在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。 (四)酶和底物 ELISA中所用的酶要求纯度高、催化反应的转化率高、专一性强、性质稳定、来源丰富、价格不贵、制备成的酶标抗体或抗原性质稳定,继续保留着它的活性部分和催化能力。**在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。另外它的相应底物应易于制备和保存,价格低廉,有色产物易于测定,光吸收高。ELISA中Z常用的酶为辣根过氧化酶(HRP)和从牛肠粘膜或大肠杆菌提取的碱性磷酸酶(AP)。HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,纯化方法也不复杂。它是一种糖蛋白,含糖量约18%;分子量为44kD;是一种复合酶,由主酶(酶蛋白)和辅基(亚铁血红素)结合而成的一种卟啉蛋白质。主酶为无色糖蛋白,在275nm波长处有Z高吸收峰;辅基是深棕色的含铁卟啉环.[详细]
-
2018-09-27 10:00
产品样册
-
食品安全elisa试剂盒技术的-操作要点
- ELISA技术的-操作要点:优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点.本文将叙述板式注意要点,要详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果.在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物.加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡.常见elisa试剂盒:1、细胞因子检测试剂盒:如白介素、选择素、集落刺激因子,肿瘤坏死因子,干扰素,转化生长因子,趋化因子,细胞因子受体,粘附分子,生长因子,凋亡因子等等2、心肌梗塞检测试剂盒:如肌钙蛋白,肌红蛋白,C-反应蛋白等等3、内分泌检测试剂盒:如甲状腺,,性激素,孕酮,睾酮,生长激素,生长抑素,内皮素,皮质醇,骨钙素,催乳素,促肾上腺皮质激素,促卵泡素,雌二醇,雌三醇等等4、肝纤维化检测试剂盒:如纤维连接蛋白,透明质酸,胶原,基质金属蛋白酶YZ因子,基质金属蛋白酶,层粘蛋白等等5、自身免疫检测试剂盒:如甲状腺,抗核抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体等等6、肿瘤标志物检测试剂盒:如肿瘤标志物,组织多肽抗原,肿瘤相关因子等等7、优生优育检测试剂盒:8、传染病检测试剂盒如百日咳,EB病毒,A族链球菌等等9、特种蛋白检测试剂盒如免疫球蛋白,抗链O-aso,类风湿因子RF,C反应蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,铁蛋白,转铁蛋白transferrin等等按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂.ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的.自配的缓冲液应用pH计测量较正.从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用.试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存.[详细]
-
2024-10-05 18:10
产品样册
-
ELISA实验原理、步骤、问题分析
- 上海恒远生物科技有限公司专业供应各种属elisa试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量1**%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换。若需要了解试剂盒的详细信息,请来的咨询:电话:021-6052049813636351217业务QQ:1005074258何经理ELISA实验原理、步骤、ELISA问题分析ELISA实验原理酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度类型及步骤ELISA的主要常用类型及步骤1.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。2)加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。3)加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。4)加底物显色。2.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原Z常用的方法,操作步骤如下:1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2)加受检样本,保温反应。样本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与样本中受检抗原的量相关。4)加底物显色。3.双抗原夹心法测抗体反应原理和模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体4.竞争法测抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,Z后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。ELISAQ&A如何选择合适的阳性对照?阳性对照的基本组成应该尽量与检测样本的组成一致,一般阳性对照多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质,加入一定量的待检物质。比如,以人血清为标本的测定,阳性对照多用确定的病人血清或者以复钙人血浆为原料加入一定量标准品。如何选择合适的阴性对照?阴性对照的基本组成也应该尽量与检测样本的组成一致,**先行检测确定其中不含待检物质。比如,检测人血清标本时,阴性对照应该选择正常人血清;检测免疫动物血清中抗体效价时,阴性对照应该选择该动物的免疫前血清。如何选择Zyou化的包被条件?1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化)。经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。2.包被液的选择一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液。3.包被温度的选择通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持。4.包被浓度的选择包被的Z适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的Z适包被浓度需要通过实验来确定。包板后需要封闭吗?应该选择什么样的封闭体系?封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。而在间接法测定中,封闭一般是必不可少的。常用的封闭剂有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明胶、5%的脱脂奶粉,AbMART推荐使用5%脱脂奶粉,价廉而且封闭能力强,不过5%脱脂奶粉只适合短期内使用,不宜长期保存,所以试剂盒中较少使用。如何正确使用酶结合物?1.酶结合物的稀释液在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1%BSA或5%脱脂奶粉),通过竞争YZ酶结合物在固相载体上的非特异性吸附。一般还加入能够YZ蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂,如吐温20(0.05%的浓度较为适宜)。2.正确稀释酶结合物酶结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定,浓度过高易导致本底偏高,浓度过低则会导致阳性信号的减弱。酶结合物**在使用前稀释,稀释后的酶结合物不宜长期保存,因为低浓度的酶结合物极易失活。问题可能的原因解决方法阴性对照产生了阳性的结果试剂或者耗材污染更换试剂,使用一次性耗材洗板出现问题更换更强配方的洗涤液,增加洗板次数,延长洗板时间如果是在双抗体夹心法中出现,有可能是包被抗体与二抗间有交叉反应更换包被抗体或二抗使用了过多的抗体减少抗体使用量整板出现高背景二抗产生了非特异性吸附减少二抗使用量,缩短二抗反应时间显色液不新鲜使用现配的显色液显色反应时间过长没有终止控制显色反应时间,及时终止反应试剂或者耗材污染更换试剂,使用一次性耗材反应温度过高导致的非特异性吸附严格控制反应在Z适温度下进行封闭条件不佳导致的非特异性吸附更换封闭能力更强的封闭液,延长封闭时间反应信号偏低包被条件不合适提高包板浓度,延长包板时间抗原抗体反应不够充分延长反应时间,确保反应在Z适温度下进行显色液配方不恰当增加显色底物的量二抗结合不够提高二抗浓度,延长反应时间,更换效果更好的二抗梯度稀释做ELISA时产生跳孔现象酶标板叠放导致传热不均匀,各孔反应温度有差异尽量避免酶标板叠放在一起移液器稀释时未能保持连续性定期校准移液器,确保移液器的正确使用反应溶液蒸发酶标板用封条密封或者加盖洗板不均匀确定洗板机能够正常工作酶标板底有杂物或者水珠读板时清理干净酶标板底部[详细]
-
2018-11-16 10:02
产品样册
-
条件性恐惧实验
- 条件性恐惧实验[详细]
-
2014-09-22 00:00
产品样册
-
顶空进样器重复性实验条件
- 顶空进样器重复性实验条件[详细]
-
2013-07-16 00:00
课件
-
ELISA操作要点
- ELISA操作要点[详细]
-
2024-09-28 05:15
产品样册
-
鸡γ干扰素(IFN-γ)Elisa试剂盒实验原理
- 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的鸡γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与HRP标记的鸡γ干扰素(IFN-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡γ干扰素(IFN-γ)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液[详细]
-
2018-10-08 10:01
产品样册
-
elisa实验原理:大肠杆菌宿主残留蛋白
- elisa实验原理:大肠杆菌宿主残留蛋白本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)水平。用纯化的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP),再与HRP标记的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)浓度。[详细]
-
2018-11-16 10:02
产品样册
-
兔子谷胱甘肽(GSH)Elisa试剂盒实验原理
- 兔子谷胱甘肽(GSH)Elisa试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔子谷胱甘肽(GSH)水平。用纯化的兔子谷胱甘肽(GSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽(GSH),再与HRP标记的谷胱甘肽(GSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽(GSH)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中兔子谷胱甘肽(GSH)浓度。[详细]
-
2018-11-16 10:02
产品样册
-
大鼠铁蛋白 FE ELISA试剂盒实验原理
- 大鼠铁蛋白 FE ELISA试剂盒实验原理
本生生物公司供应:ELISA试剂盒,动物血清,荧光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量离心管,进口冻存管,细胞培养皿,培养板,培养瓶,进口吸头,仪器及手套,色谱耗材,针头过滤器等。[详细]
-
2022-10-13 11:43
应用文章
-
人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒实验原理
- 人胶原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。[详细]
-
2023-08-07 17:21
应用文章
-
猪甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒实验原理
- 猪甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒实验原理本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。[详细]
-
2023-08-18 11:45
应用文章
-
人单胺氧化酶A(MAO-A)ELISA试剂盒实验原理
- 人单胺氧化酶A(MAO-A)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。本生试剂盒[详细]
-
2023-09-07 10:46
应用文章
-
小鼠褪黑素(MT)ELISA试剂盒实验原理
- 小鼠褪黑素(MT)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。[详细]
-
2024-09-14 08:14
应用文章
-
ELISA试剂盒实验原理与操作步骤
- 上海劲马生物科技有限公司ELISA试剂盒实验原理与操作步骤实验方法:酶联免疫法/酶免法(ELISA)检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法操作步骤:具体请参照说明书(详细说明书请联系我司业务人员:021-60517348,13817140470。)注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:2-8℃2.有效期:6个月[详细]
-
2024-09-11 18:03
产品样册
-
盐雾试验箱技术条件
- 盐雾试验箱技术条件[详细]
-
2012-12-26 00:00
安装说明
-
干燥箱技术条件
- 干燥箱技术条件资料下载:http://www.010sy17.com/bjhtfk-Products-6729673干燥箱规格与技术参数:型号(mm)台式电热恒温鼓风干燥箱DHG-9000系列DHG-9030ADHG-9030ADDHG-9070ADHG-9070ADDHG-9140ADHG-9140ADDHG-9240ADHG-9240AD内胆尺寸340×325×325450×400×450550×450×550600×550×750外形尺寸625×510×490740×580×630830×650×730880×770×930输入功率870W1570W2070W2470W控温范围RT+10℃~250℃温度分辨率0.1℃恒温波动度±1℃定时范围1~9999min电源电压AC220V50Hz载物托架2块工作环境温度5℃-40℃型号(mm)台式电热恒温鼓风干燥箱DHG-9003系列DHG-9023ADHG-9023ADDHG-9053ADHG-9053ADDHG-9123ADHG-9123ADDHG-9203ADHG-9203AD内胆尺寸340×325×300420×400×345550×450×550600×600×650外形尺寸620×540×490720×580×530830×650×730880×770×825输入功率870W1120W2070W2470W控温范围RT+10℃~250℃温度分辨率0.1℃恒温波动度±1℃定时范围1~9999min电源电压AC220V50Hz载物托架2块工作环境温度5℃-40℃型号(mm)台式电热恒温鼓风干燥箱DHG-9005系列DHG-903DHG-903DDHG-905DHG-905DDHG-907DHG-907DDHG-914DHG-914DDHG-924DHG-924D内胆尺寸340×325×325420×400×345450×400×450550×450×550600×550×750外形尺寸625×510×490720×580×530740×580×630830×650×730800×770×930输入功率970W1220W1670W2170W2870W控温范围RT+10℃~300℃温度分辨率0.1℃恒温波动度±1℃定时范围1~9999min电源电压AC220V50Hz载物托架2块工作环境温度5℃-40℃北京恒泰丰科试验设备有限公司[详细]
-
2018-10-05 10:01
产品样册
-
湿热试验箱技术条件
- 本标准规定了湿热试验箱的术语和定义、使用条件,技术要求、试验方法、检验规则及标志、包装、贮存。本标准适用于对电工、电子及其他产品、零部件及材料进行湿热试验的试验箱。[详细]
-
2018-10-13 10:00
产品样册
Copyright 2004-2026 yiqi.com All Rights Reserved , 未经书面授权 , 页面内容不得以任何形式进行复制
参与评论
登录后参与评论