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鸡γ干扰素(IFN-γ)Elisa试剂盒实验原理

本文由 上海沪宇生物科技有限公司 整理汇编

2018-10-08 10:01 272阅读次数

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本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡γ干扰素(IFN-γ)水平。用纯化的鸡γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与HRP标记的鸡γ干扰素(IFN-γ)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡γ干扰素(IFN-γ)浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。120pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液15pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液7.5pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液

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