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ELISA检测技术
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本文由 上海沪宇生物科技有限公司 整理汇编
2024-09-29 06:55 494阅读次数
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**章:ELISA技术的-操作要点优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。更多资料请下载文件elisa试剂盒
更多资料
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ELISA检测技术
- **章:ELISA技术的-操作要点优质的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的形成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式ELISA各个操作步骤的注意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,两者均有详细的使用说明,严格遵照规定操作,必能得出准确的结果。更多资料请下载文件elisa试剂盒[详细]
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2024-09-29 06:55
产品样册
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农药残留检测技术
- 农药残留检测技术[详细]
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2011-05-19 00:00
实验操作
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清洁度检测技术
- 清洁度检测技术[详细]
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2024-03-06 14:23
应用文章
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高光谱成像检测技术
- 高光谱成像检测技术[详细]
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2011-11-28 00:00
选购指南
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射线粉尘检测技术
- 射线粉尘检测技术[详细]
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2014-06-17 00:00
专利
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浅谈农药残留检测技术
- 浅谈农药残留检测技术[详细]
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2014-11-13 00:00
安装说明
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农药残留检测技术进展
- 农药残留检测技术进展[详细]
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2014-11-13 00:00
应用文章
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食品安全与检测技术
- 食品安全与检测技术[详细]
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2024-09-16 00:06
操作手册
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ELISA 的检测
- 标准曲线的绘制方法可以采用各种绘图软件来绘制ELISA标准曲线,下面以“CurveExert1.3”软件为例,绘制ELISA标准曲线的方法如下;1启动“CurveExpert1.3”2.X轴输入标准品的OD值,Y轴输入所对应的浓度值,如图:3.单击[运行]按钮,出现如下对话框4.单击[ok]按钮,出现如下两个对话框,关闭下面一个对话框5.在对话框的右上角出现一些曲线的名称,从“1”开始依次点击曲线名称,在右下角会出现相应拟合的曲线,。6.根据拟合的曲线选取ELISA拟合度**的曲线双击,出现如下对话框:注意:选择系数(即“r”值)**的曲线方程来进行运算。在下面的对话框右上角有“r”值,当“r”值越接近1拟合度越好7.按[Ctrl]键+[L]键,出现如下对话框:8.输入标准的OD值,单击[Calculate]按忸,即可得到待测蛋白的实际含量。(标本稀释了N倍,运算出的数值应在成以N)。9.如想得到ELISA拟合曲线的方程,可在步骤6的对话框空白处右击,选择”Information”10.得到如下对话框:点击“Copy”在你需要的位置粘贴即可得到如下数据:RationalFunction:y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)CoefficientData:a=-21.531017b=212.05019c=-0.24054479d=0.018060778拜力生物整理编辑:http://www.blswtech.com/进口elisa试剂盒,国产elisa试剂盒,elisa试剂盒,试剂盒,dna提取试剂盒,免疫组化试剂盒,rna提取试剂盒,质粒提取试剂盒,dna试剂盒[详细]
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2024-09-28 10:49
产品样册
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常用蛋白电泳检测技术与检测项目
- 常用蛋白电泳检测技术与检测项目血清蛋白电泳新鲜血清经电泳后可极ng确地描绘出患者蛋白质的全貌,有助于许多临床疾病判断的参考,在各类教材书上已清晰的描述了各种病理现象所显现的图像,一般常见的是白蛋白降低,某个球蛋白区域升高,提示不同的临床意义。如球蛋白多克隆(poly-clonal),β-γ融合的桥连现象,在γ区呈现细而密的寡克隆(oligoclonal)区带,及由单一克隆浆细胞异常增殖所产生的单克隆(monoclonal)免疫球蛋白区带,又称M蛋白(MonoclonalProtein)带,血清蛋白电泳是其的实验诊断方法。血清蛋白电泳目前Z常用的检查方法是醋酸纤维膜电泳法。免疫固定电泳血清免疫固定电泳(Immunofixation,IF)技术是血清蛋白质在琼脂糖凝胶介质上经电泳分离后,应用蛋白质固定剂和各型免疫球蛋白及其轻链抗血清,加于凝胶表面的泳道上,经孵育和扩散后,若有对应的抗原存在,则在适应位置形成抗原抗体复合物并沉淀下来。染色后蛋白质电泳参考泳道和抗原抗体沉淀区带被氨基黑着色,根据电泳移动距离分离出单克隆组份,可对各类免疫球蛋白及其轻链进行分型。血清免疫固定电泳技术用于M蛋白的型、亚型和轻链型,本周(Bence-Jonse)蛋白和游离轻链的分型和鉴别。同工酶电泳血清乳酸脱氢酶同工酶电泳血清肌酸激酶及其亚型同工酶电泳血清碱性磷酸酶同工酶电泳血清碱性磷酸酶同工酶电泳具有三种不同结构的基因编码或在转移后修饰的结果,按其氨基酸序列可分为小肠型、胎盘型和组织非特异型(肝、肾、骨),它们各自表达产物可在血清中呈现,具有不同的意义。利用麦胚凝集素(wheatgermagglutinin,WGA)与ALP-L1和ALP-B糖链亲和力的不同,血清与WGA作用再经电泳后可将ALP同工酶予以分离。肝外胆道阻塞转移肝癌时,高分子ALP(ALP-L2)明显,在原发性肝癌时肝型ALP(ALP-L1)明显,骨转移性癌时ALP-B。脂蛋白电泳应用自动电泳系统可将血清中脂蛋白组份进行分离,呈现LDL、VLDL和HDL条带,输入TC值,计算各种脂蛋白中胆固醇含量,LDL-C/HDL-C比值在正常人群组与冠心病患者组存在显著差异(p<0.001);诊断临界值(cut-offpoint)为3.89,诊断灵敏度76.7%,特异性79.8%。LDL-C/HDL-C比值是粥样硬化性冠脉疾病重要的危险因子之一,明显优于胆固醇或其它血脂的单个含量指标,且随比值的增加,患冠脉疾病的危险性相应增大。在凝胶中脂蛋白的等电点不同,不仅可区分α,前β和β区带,又因介质中含有抗LP(a)抗体及阳离子存在,抗LP(a)抗体与患者血清中LP(a)结合形成复合物,阳离子则YZ其它脂蛋白的泳动速度,LP(a)便与其它脂蛋白分离开来。清晰的LP(a)条带呈现在前β与γ区域之间,阳性条带扫描后,可获得区带的面积及其百分含量,提高了对心、脑血管独立的危险因子LP(a)检测的敏感性和特异性。血红蛋白电泳血红蛋白电泳可使正常血红蛋白HbA与HbA2分离,也可检测出大部分异常血红蛋白如:HbS、HbD、HbC和HbE。当HbA2、HbC和HbE>20%时,则难以分离和鉴别。应先用碱性琼脂糖凝胶血红蛋白电泳进行正常和异常血红蛋白的分离和检测,通常用于孕妇的筛选,然后再进行酸性琼脂糖凝胶血红蛋白电泳,对异常血红蛋白予以分离和鉴别。血红蛋白遗传性分子病常分为异常Hb病和地中海贫血两大类。异常Hb病如镰状细胞贫血,在碱性缓冲液中异常HbS电泳区带的位置呈现在HbA与HbA2之间,异常血红蛋白的HbC和HbE电泳迁移率都十分缓慢,HbC和HbA2可重叠。在PH6.2的枸橼酸缓冲液的是琼脂糖介质电泳中,由于HbC不能与HbA分离,这样就可检测出HbE。异常血红蛋白HbD是在碱性缓冲液中其电泳迁移率如同HbS,而在PH6.2枸橼酸缓冲液的琼脂糖介质中,因HbS与HbA不能分离,这样就可以分离和检测出HbD。β-地中海贫血是HbA的合成受损,电泳图谱可呈现HbA2与HbF区带。糖化血红蛋白电泳非浓缩尿蛋白电泳脑脊液电泳血清蛋白电泳正常参考值:白蛋白:0.55~0.69球蛋白α1:0.03~0.08球蛋白α2:0.04~0.09球蛋白β:0.10~0.18球蛋白γ:0.04~0.13脑脊液蛋白电泳主要用于多发性硬化症,神经梅毒及亚急性硬化性全脑炎等的诊断。血清蛋白电泳的临床意义白蛋白:椎管阻塞,脑水肿,缺氧性脑病,格林-巴利综合征,结缔组织疾病等。球蛋白:神经梅毒,脑炎,多发性硬化症等。在肝细胞受损时,血清白蛋白、α1球蛋白和α2球蛋白减少,同时受损赶下包作为自身抗原刺激淋巴系统,使λ球蛋白增加,知识肝病患者血清蛋白电泳的共同特征。轻症急性肝炎时电泳结果多无异常,病情加重后白蛋白,α和β球蛋白减少,γ球蛋白增加。球蛋白增加的程度与肝炎的严重程度相关,如持续提示肝炎转化为慢性。肝硬化时候白蛋白中毒或者高度减少,α1,α2和β球蛋白也有降低倾向,γ球蛋白明显增加。肝细胞肝癌常与肝硬化并存在,故蛋白电泳图像和肝硬化相似,但常有α球蛋白升高,偶可见甲胎蛋白带的出现。临床电泳临床中何时需要病人的电泳结果?1.怀疑有多发性瘤病;2.不明的外周神经病(糖尿病、毒素照射、化疗除外);3.根据其它实验室的数据,需要做蛋白电泳3.1总蛋白异常或白蛋白异常3.2尿蛋白升高3.3由于恶变而引起的血钙过多(如临床相关的症状为失重,疲劳,骨痛,异常出血)3.4WBC、RBC升高4.临床上出现如下症状时炎症疾病、自身免疫性疾病、肾病、肝病、蛋白质丢失的相关疾病临床蛋白电泳的地位1.用于初筛,对疾病进行Z初的评估;2.避免漏诊;3.方法学稳定。相关产品优质试剂质量放心价格Zdi为ZG生物产业做贡献上海索来宝特价促销联系021-54100800手机18018609966[详细]
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2018-09-02 10:00
产品样册
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肉品检测技术的研究进展
- 肉品检测技术的研究进展[详细]
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2014-11-05 00:00
安装说明
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ELISPOT细胞因子检测技术应用
- 目前,ELISPOT已被用于检测药物、化学制剂及其它CK复合物的特性及功能等方面,因此为体内免疫功能的调节效应提供了检测依据。近几年来,ELISPOT技术在肿瘤疫苗评价试验、免疫监测及免疫学研究中越来越被广泛地使用。在抗肿瘤免疫及相关领域中的应用在许多研究中,该技术已被用于免疫动物外周血淋巴细胞中抗原特异的细胞毒性T细胞(CTL)的数量检测。近期,ELISPOT技术已用于分析和评价从传染病病人的PBMC中检测肽特异的T淋巴细胞以及在癌症病人中诱导肿瘤特异的T细胞的疫苗试验。ELISPOT检测T细胞反应时敏感性、特异性和可重复性都很高,操作简单迅速,需要少量标本,在检测抗原特异性细胞数量的同时也反应其功能,并与临床结果相关。ELISPOT平板可以提前大量准备,移液、洗板和读板都可自动化,因而大批量检查也可做到快速GX。在与与其他方法的比较后,ELISPOT很可能成为定量分析肿瘤或病毒特异性的T细胞反应的。在抗感染免疫中的应用CTL在抗病毒感染的免疫应答中占有主要地位,而CD4+辅助性T细胞亚群Th1/Th2的平衡在抵御病毒感染中起着同样重要的作用。在HIV研究方面,由MHC-1类分子加工的不同抗原经CTL识别并产生免疫应答在控制HIV-1感染中同样起重要作用。利用ELISPOT方法检测CK如IFN2γ就可以进一步了解到针对HIV特异的CTL应答及相关免疫信息。此外,ELISPOT法还用于评价由HIV-1感染引起粘膜的CD4+T细胞免疫应答以及HIVgp120g与霍乱毒素共表达的DNA疫苗的免疫源性。在其他研究中,ELISPOT还用来检测通过直肠免疫低剂量甲肝疫苗而产生的细胞免疫应答。在急性的自限性肝炎中,以Th1为主的应答促进细胞介导的免疫,且在控制病毒感染及延缓慢性疾病的发展方面有重要作用。在许多抗细菌免疫研究中,该方法也发挥了重要作用。例如:应用ELISPOT试验证实表达大肠杆菌MalE蛋白的重组卡介苗(rBCG.MalE)诱导的T细胞应答是CD4+T细胞依赖的,rBCG.MalE诱导的特异CD4+T细胞应答存在Th1/Th2平衡转换现象,并逐步形成Th1/Th2混合应答。细胞因子检测技术的临床应用目前,已经实现临床检验的领域是对肺结核(TB)的检测。而Z近的研究热点就是对于移植的预测。受体对供体特异性HLA抗体一直以来都是器官移植的一大障碍,因为它们的存在不仅介导超急性排斥反应而且还可导致急性排斥反应。因此,HLA抗体的存在限制了异体抗原敏感患者对供体器官的需要,因而增加了等待移植的时间。在心脏,肝脏和肾脏异体移植后早期出现的并发症如急性排斥反应与移植前存在的异体免疫临床相关性迫切需要一种恰当的检测方法在器官移植前能了解受体对供体特异性体液免疫的功能状态。在接受移植的人群中,部分因有多次输血、或既往有异体移植失败或多次妊娠史体内曾经存在阳性异体抗体,在他们接受异体移植时,现有的检测方法只能显示他们对异体的免疫功能正常。但他们体内存在记忆B淋巴细胞,一旦受到相应HLA抗原的刺激则会唤起免疫反应,这不仅影响着移植的结果,甚至会出现危及患者生命的、与移植相关的并发症。ELISPOT是一种强有效的检测单个抗体分泌细胞的方法,具有很高的敏感性。因此,刺激记忆B淋巴细胞增殖、分化成浆细胞,并建立一种特异性ELISPOT方法检测HLA抗体产生细胞是**手段。如果ELISPOT要进一步推广应用,特别是临床应用,其标准化将是一个十分重要的问题。美国FDA和NIH等已经开始建立ELISPOT的标准化流程,相信随着ELISPOT技术的成熟、标准化程序的建立,它的应用将更加广泛。[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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颜色检测测量技术理论基础
- 颜色检测测量技术理论基础[详细]
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2024-09-27 23:54
其它
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食品安全快速检测技术展望
- 1、食品安全快速检测技术现状 目前,国内外化肥污染物硝酸盐快速测定方法主要有硝酸盐电极法、硝酸盐比色法、硝酸盐试粉试纸法。 2、食品安全快速检测技术展望 我国研究者在研究硝酸盐快速测定方法上已有很大的进展,研制出了硝酸盐试纸快速测定法。 [详细]
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2024-09-28 03:38
其它
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农药残留检测技术应用研究进展
- 农药残留检测技术应用研究进展[详细]
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2024-09-28 12:59
其它
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肉品品质检测技术综述
- 肉品品质检测技术综述[详细]
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2024-09-28 00:38
实验操作
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PVC粉末杂质检测技术
- PVC树脂中杂质产生的途径有很多,有外来的杂质,有聚合釜内产生的,还有浆料在工艺过程中由于高温或者停留时间过长,树脂发生降解甚至焦化产生的“黑黄点”等。
在塑料加工过程中,如果杂质偏多,会给生产、制品性能及消耗带来不利影响。比如在型材加工成型中,杂质多,会在型材表面出现斑点,严重影响外观质量。另外,由于杂质一般不塑化或虽然塑化但强度低,降低Z终制品的机械力学性能。
由于杂质对Z终制品性能带来不利的影响,在来料、生产、运输等各个环节都需要对杂质进行有效的控制和检验,通过对杂质的检测数据,分析问题产生的真实原因,从而优化生产工艺,提升产品品质和企业品牌形象,同时也能避免不必要的损失。[详细]
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2024-10-03 06:20
产品样册
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水环境检测中重金属检测技术的应用
- 水环境检测中重金属检测技术的应用[详细]
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2024-01-19 13:34
应用文章
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ELISA原理(实验条件、技术要点)
- ELISA原理(实验条件、技术要点)实验条件和技术要点:酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,简称ELISA)与免疫酶测定等名称所指的内容是不相同的,ELISA的内容专指固相吸附技术和免疫酶标抗体(或抗原)技术相结合的一种方法,它是将抗原或抗体包被在固相支持物(或称载体上),然后再进行免疫反应,形成酶标记的抗原抗体复合物,反应完毕,借助底物显示特异结合的标记抗体(或抗原)上的酶活性,用酶与底物反应后生成的有色产物进行光密度测定,达到抗原或抗体定量的目的。在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:1,是检测抗体还是抗原?2,检测的结果是定性还是定量?3,是否需要检测特异抗体的类型?4,所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样?(1)检测抗原Z常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶YZ剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。(2)检测抗体检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的**步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。竞争法检测抗体有两种方法:一种是将标记的抗体和标本同时加入反应孔内,但标记的抗体和标本中的抗体必须是结合抗原的不同决定簇;另一种是先加标本,冲洗后再加标记的抗体。竞争法检测抗体比间接法容易判断结果,并且比较敏感和特异。不论选择哪种方法,ELISA都包括6个步骤:1,抗原或抗体吸附于固相;2.加标本和试剂;3,孵育和冲洗;4,加酶标抗原或抗体;5,加适当的底物;6,检测和分析结果。虽然ELISA法在理论上十分简单,但每一步都有要注意的事项。不论是新设计的ELISA还是沿用其他ELISA方法都有以下几方面技术要点:固相载体的选择和试剂的制备,反应条件和操作的标准化。酶标记抗原竞争法利用混合的未标记抗原和酶标记抗原相互竞争抗体上的结合点,从而进行抗原的定量。未标记抗原的量越大,则酶标记抗原和抗体的结合就越受到YZ。但是竞争法在实验时比较复杂,有时在抗原混合液与相应抗体孵育后,在测定游离抗原与抗体相结合抗原的活性以前,要先进行盐析或有机溶剂沉淀或第二抗体沉淀等方法把两种不同存在形态的抗原分开。并且在加入底物后,容易产生血清色的物质。因此,每次测定时都需做空白对照。由于这些缺点,酶标记抗原竞争法使用不多。促销期间有精美礼品赠送还可以享受免费代测服务。您只需要把标本寄给我们,一星期左右就可以出实验数据。欢迎购买我公司的ELISA试剂盒,我们承诺试剂盒有质量问题包退包换。上海研谨生物公司对外承接RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、WesternBlotting技术服务、动物模型构建服务、SCI论文服务、PCR实验服务,并为广大科研用户提供各种高品质的试剂和服务,如细胞、血清、Elisa试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA产物纯化试剂盒、病毒RNA提取试剂盒、PCR等产品,针对以上各项服务,我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持。[详细]
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2018-09-04 10:00
产品样册
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ELISA试剂盒测定技术的发展
- 临床诊断的ELISA试剂盒培养方法。因此,这些难于采用传统培养方法检测的病原体感染诊断ZL的要求,迫使人们必须去寻找其他的检测途径,直接的或是间接的。此外,即使是可以用传统培养方法培养的病原体,仅进行形态及生物化学鉴定,有时并不足以完全准确地鉴定病原体,仍具有一定程度的盲目性。于是,随着人们对病原体感染与机体免疫应答的逐步认识,以抗原抗体特异反应为基础的,更为快速简便的免疫检验方法就应运而生了。人们就希望能尽快尽早地知道机体所感染的是何种病原体,传统的病原体感染诊断一般要经过这样一个过程,ELISA试剂盒即首先对可能存在有病原体的体液或分泌物标本进行体外培养,培养后,再通过分析其形态学、生物学和生物化学特性,以确定其到底是哪一类及哪一种病原体。ELISA试剂盒法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。现代免疫学ELISA试剂盒的发展与微生物学尤其是细菌学是密不可分的,临床免疫测定技术的发展亦是如此。当机体感染病原微生物时,要想使临床医师尽早采取适当的措施进行ZL。E-(Hu)(01)-00154人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒,英文名:cholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00155人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒,英文名:α1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00156人丙二醛(MDA)ELISA试剂盒,英文名:malondialchehyche,MDAELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00157人胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒,英文名:cholecystokinin,CCKELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00158人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒,英文名:N-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00159人Ⅱ型胶原(ColⅡ)ELISA试剂盒,英文名:CollagenTypeⅡ,ColⅡELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00160人Ⅰ型胶原(ColⅠ)ELISA试剂盒,英文名:CollagenTypeⅠ,ColⅠELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00161人Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒,英文名:procollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢNTELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00162人透明质酸(HA)ELISA试剂盒,英文名:Hyaluronicacid,HAELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00163人Ⅳ型胶原(ColⅣ)ELISA试剂盒,英文名:CollagenTypeⅣ,ColⅣELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00164人Ⅲ型胶原(ColⅢ)ELISA试剂盒,英文名:CollagenTypeⅢ,ColⅢELISAKit,规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00165人层连蛋白/板层素(LN)ELISA试剂盒,英文名:Laminin,LNELISAKit,ELISA试剂盒规格:96T/48TE-(Hu)(01)-00166人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒,英文名:Fibronectin,FNELISAKit,规格:96T/48T[详细]
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2018-09-14 10:00
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