elisa实验原理：大肠杆菌宿主残留蛋白

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• elisa实验原理：大肠杆菌宿主残留蛋白

  elisa实验原理：大肠杆菌宿主残留蛋白本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)水平。用纯化的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)，再与HRP标记的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)浓度。[详细]

  2018-11-16 10:02

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• 大肠杆菌宿主残留蛋白 elisa试剂盒说明书

  试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。1使用目的：本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），药物、血清和尿样中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)残留的定量检测。2实验原理本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)偶联抗原，加入大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)标准品或样品，游离大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)与微孔条上预包被的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)偶联抗原互相竞争抗大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)含量成反比，通过标准曲线计算样品中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)的含量。3试剂盒组成3.1预包被的大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。3.2大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/ml,0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml3.3抗大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体酶结合物：1瓶（6ml）。3.4显色液A：1瓶（6ml）。3.5显色液B：1瓶（6ml）。3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。3.7样本稀释液：1瓶（10×,6ml），用于样品稀释用。3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。3.9说明书一份。4需要而未提供的材料4.1设备4.1.1波长450nm酶标仪。4.1.2粉碎机。4.1.3量筒。4.1.4振荡器。4.1.5漏斗。4.1.6WhatmanNo1或相当的滤纸。4.1.7微量移液器。4.2试剂4.2.1去离子水或蒸馏水。4.2.2甲醇。5贮存5.1试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻5.2未用完的微孔板应该密封干燥保存6注意事项6.1使用试剂盒前请仔细阅读说明书。6.2不要使用过期试剂盒。6.3试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。6.4标准品中含有大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)，使用时应特别注意，操作时应带手套。6.5终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。6.7不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果6.9混合试剂时应避免起泡。7工作液准备7.1大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)标准品溶液：0ug/ml,0.1ug/ml,0.3ug/ml,0.9ug/ml,2.7ug/ml,8.1ug/ml7.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20(1+19)稀释备用7.3样本稀释液：备用7.3显色剂：已备用，避免光线直照7.4反应终止液：已备用8样品处理：（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）一般样品处理8.1取10g粉碎的样品，加20ml70%甲醇溶液8.2QL振荡3分钟8.3用WhatmanNo1滤纸过滤8.4取100μl处理后的样品，加入400μl样本稀释液8.5取100μl稀释液进行分析动物组织前处理8.6准确称取1±0.05g匀浆后的组织样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干8.8加入3.2mL样品稀释液,750rpm涡旋20s8.9取100ml用于分析饲料前处理方法8.10准确称取1±0.05g粉碎饲料样品到50ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干8.12加入2.8mL样品稀释液,涡旋20s，混匀后取100ml用于分析牛奶前处理方法8.13取1ml牛奶样品到5ml聚苯乙烯离心管中；加入4ml样品稀释液，混匀后取100ml用于分析奶粉前处理方法8.14准确称取0.3g奶粉样品到7ml的聚苯乙烯离心管中；加入2mlPBS溶液，2ml正己烷，震荡混匀8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中间层，取下层溶液100ml到400ml样品稀释液8.16混匀后取100ml用于分析9酶免分析步骤9.1实验须知9.1.1实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（25±2℃），时间约2小时。回温至室温（25±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的极ng确度和准确度。9.1.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存9.1.3请不要改变分析程序9.1.4请使用极ng确的微量移液器9.1.5操作一旦开始，请不要中断任何程序9.1.6ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作9.1.7为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样9.1.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面9.2分析步骤9.2.1预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测9.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存9.2.3样品稀释液、浓缩洗涤液（20×）稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)9.2.4在B0孔中加入50μl0.0ug/ml标准品溶液9.2.5在各标准孔中加入50μl的标准品溶液9.2.6在各样品孔中加入50μl样品溶液9.2.7在所有孔中加入50μl的抗大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)抗体酶结合物9.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。9.337℃温浴30min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）9.3.1甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板5次，Z后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。9.4反应9.4.1洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入50μl显色液A，再加50μl显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀9.4.237℃温浴10min9.4.3每孔中加入50μl终止液，混匀9.4.4在450nm下检测吸光度，结果在5min内读取。10结果计算10.1定量分析10.1.1所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以**个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以1**%，即百分吸光度值。B标准溶液或样本溶液的平均吸光度值B00ug/ml标准溶液的平均吸光度值10.1.2以大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)浓度的对数值，求得反对数即为测定液中大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)浓度C（ug/ml）10.1.3由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。10.2半定量测定10.1.1目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。10.1.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。11特异性物质交叉反应大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coliP)1**%12试剂盒参数本试剂盒检测下限为0.1ug/mlB0吸光度**值应大于1.0试剂盒吸光度板内误差小于8％，板间误差小于15％。用本说明书提供的组织样本提取方法回收率大于80％。13标准曲线模式（仅供参考）试剂盒提供的标准曲线范围为0.1ug/ml~8.1ug/ml。14分析限制本试剂盒检测为阳性的样品应该用另一种方法如HPLC或GC/MS加以确证。[详细]

  2018-09-03 10:00

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• 大肠杆菌宿主残留蛋白试剂盒使用说明书

  Normal07.8磅02falsefalsefalseMicrosoftInternetExplorer4　　　　大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）试剂盒使用说明书检测范围：96T0.6ng/L-16ng/L使用目的：大肠杆菌宿主残留蛋白试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）含量。实验原理大肠杆菌宿主残留蛋白试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）水平。用纯化的大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP），再与HRP标记的大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大肠杆菌宿主残留蛋白（E.coliP）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（32ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。16ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液8ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液4ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液2ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大肠杆菌宿主残留蛋白试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2024-09-14 19:14

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• 大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)检测试剂盒

  大肠杆菌宿主残留蛋白(E.coli P)检测试剂盒[详细]

  2015-09-07 00:00

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• 宿主残留蛋白HCP ELISA抗体覆盖率检测

  美国Azure公司的 Sapphire™ 双模式多光谱激光成像系统，专业技术，带来高质量检测结果。配有四激光，RGB三色激光即可进行2D和2D-DIGE的检测，大平台，检测更顺畅，仪器可进行分辨率，激光强度，聚焦深度的设置，特别是聚焦，采用激光共聚焦光路，减少样品表面灰尘等的干扰，提高信噪比，检测更灵敏。[详细]

  2019-11-01 15:39

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• 人CHO细胞宿主蛋白elisa试剂盒使用方法

  本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T0.6pg/ml-22pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）水平。用纯化的CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP），再与HRP标记的CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）浓度。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 人蛋白酪氨酸激酶（PTK）elisa试剂盒实验原理

  实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人蛋白酪氨酸激酶(PTK)水平。用纯化的人蛋白酪氨酸激酶(PTK)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入蛋白酪氨酸激酶(PTK)，再与HRP标记的蛋白酪氨酸激酶(PTK)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的蛋白酪氨酸激酶(PTK)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人蛋白酪氨酸激酶(PTK)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（8000U/mL）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 兔粘蛋白1（MUC1）ELISA试剂盒实验原理

  兔粘蛋白1（MUC1）酶联免疫分析试剂盒仅供研究使用，用于测定兔血清，血浆及相关液体样本中粘蛋白1（MUC1）的含量。实验注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。8．本试剂不同批号组分不得混用，严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.9.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。注：以上信息仅供参考，具体参考方法请与随货说明书为准。上海华壹生物科技有限公司专业试剂盒供应商，欢迎来电咨询：021-24209192，021-24209195[详细]

  2018-11-15 10:00

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• 人超敏C反应蛋白elisa试剂盒实验原理

  使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中超敏C反应蛋白（hs-CRP）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平。用纯化的人超敏C反应蛋白（hs-CRP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入超敏C反应蛋白（hs-CRP），再与HRP标记的超敏C反应蛋白（hs-CRP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的超敏C反应蛋白（hs-CRP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人超敏C反应蛋白（hs-CRP）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（80μg/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2024-10-02 06:41

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• 微生物铁氧还蛋白(FDX)ELISA试剂盒实验原理

  微生物铁氧还蛋白(FDX)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-08-18 11:44

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• β淀粉样蛋白1-40ELISA试剂盒实验原理

  人β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒仅供科学研究使用实验原理：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）的含量。应用双抗体夹心法测定标本中人β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）水平。用纯化的人β淀粉样蛋白1-40抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入β淀粉样蛋白1-40抗原，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人β淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）抗原浓度。[详细]

  2018-11-15 10:00

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• 人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒实验原理

  人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-08-07 17:22

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• 人β血小板球蛋白β血栓环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒实验原理

  本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-08-30 16:33

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• 大肠杆菌杂交及基因定位实验

  大肠杆菌杂交及基因定位实验[详细]

  2016-01-12 00:00

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• 人心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）酶联免疫分析（ELISA）实验原理是什么?

  人心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）酶联免疫分析（ELISA）如何操作试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本ZX型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）水平。用纯化的人心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP），再与HRP标记的H-FABP抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人心型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）浓度。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA试剂盒实验原理

  人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA试剂盒实验原理 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。[详细]

  2023-08-07 17:21

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• ELISA原理（实验条件、技术要点）

  ELISA原理（实验条件、技术要点）实验条件和技术要点：酶联免疫吸附测定（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,简称ELISA）与免疫酶测定等名称所指的内容是不相同的，ELISA的内容专指固相吸附技术和免疫酶标抗体（或抗原）技术相结合的一种方法，它是将抗原或抗体包被在固相支持物（或称载体上），然后再进行免疫反应，形成酶标记的抗原抗体复合物，反应完毕，借助底物显示特异结合的标记抗体（或抗原）上的酶活性，用酶与底物反应后生成的有色产物进行光密度测定，达到抗原或抗体定量的目的。在应用ELISA时，首先要清楚下面内容：1，是检测抗体还是抗原？2，检测的结果是定性还是定量？3，是否需要检测特异抗体的类型？4，所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样？(1)检测抗原Z常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法，其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难，特别是检测微生物的抗原，因为需要标记抗原，这对于某些抗原是很难做到的，甚至是不可能的。另外在竞争法中，酶标记的抗原与标本直接混合在一起，许多标本中含有酶YZ剂或蛋白A样物质，可影响ELISA的结果。(2)检测抗体检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法，这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的**步是捕获所需要检测的一个种类的抗体，接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单，但不适用于检测其他种类的抗体，因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。竞争法检测抗体有两种方法：一种是将标记的抗体和标本同时加入反应孔内，但标记的抗体和标本中的抗体必须是结合抗原的不同决定簇；另一种是先加标本，冲洗后再加标记的抗体。竞争法检测抗体比间接法容易判断结果，并且比较敏感和特异。不论选择哪种方法，ELISA都包括6个步骤：1，抗原或抗体吸附于固相；2.加标本和试剂；3，孵育和冲洗；4，加酶标抗原或抗体；5，加适当的底物；6，检测和分析结果。虽然ELISA法在理论上十分简单，但每一步都有要注意的事项。不论是新设计的ELISA还是沿用其他ELISA方法都有以下几方面技术要点：固相载体的选择和试剂的制备，反应条件和操作的标准化。酶标记抗原竞争法利用混合的未标记抗原和酶标记抗原相互竞争抗体上的结合点，从而进行抗原的定量。未标记抗原的量越大，则酶标记抗原和抗体的结合就越受到YZ。但是竞争法在实验时比较复杂，有时在抗原混合液与相应抗体孵育后，在测定游离抗原与抗体相结合抗原的活性以前，要先进行盐析或有机溶剂沉淀或第二抗体沉淀等方法把两种不同存在形态的抗原分开。并且在加入底物后，容易产生血清色的物质。因此，每次测定时都需做空白对照。由于这些缺点，酶标记抗原竞争法使用不多。促销期间有精美礼品赠送还可以享受免费代测服务。您只需要把标本寄给我们，一星期左右就可以出实验数据。欢迎购买我公司的ELISA试剂盒，我们承诺试剂盒有质量问题包退包换。上海研谨生物公司对外承接RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、WesternBlotting技术服务、动物模型构建服务、SCI论文服务、PCR实验服务，并为广大科研用户提供各种高品质的试剂和服务，如细胞、血清、Elisa试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA产物纯化试剂盒、病毒RNA提取试剂盒、PCR等产品，针对以上各项服务，我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持。[详细]

  2018-09-04 10:00

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• ELISA实验原理、步骤、问题分析

  上海恒远生物科技有限公司专业供应各种属elisa试剂盒，提供免费代测服务，保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量1**%保证，若存在质量问题，我们无条件包退换。若需要了解试剂盒的详细信息，请来的咨询：电话：021-6052049813636351217业务QQ:1005074258何经理ELISA实验原理、步骤、ELISA问题分析ELISA实验原理酶联免疫吸附测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量测定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度类型及步骤ELISA的主要常用类型及步骤1.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体（二抗）以检测与固相抗原结合的受检抗体，故称为间接法。操作步骤如下：1）将特异性抗原与固相载体联结，形成固相抗原，洗涤除去未结合的抗原及杂质。2）加稀释的样本，保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体，样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。3）加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合，从而间接记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。4）加底物显色。2.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原Z常用的方法，操作步骤如下：1）将特异性抗体与固相载体联结，形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2）加受检样本，保温反应。样本中的抗原与固相抗体结合，形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3）加酶标抗体，保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与样本中受检抗原的量相关。4）加底物显色。3.双抗原夹心法测抗体反应原理和模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体4.竞争法测抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的酶标抗原愈少，Z后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。ELISAQ&A如何选择合适的阳性对照?阳性对照的基本组成应该尽量与检测样本的组成一致，一般阳性对照多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质，加入一定量的待检物质。比如，以人血清为标本的测定，阳性对照多用确定的病人血清或者以复钙人血浆为原料加入一定量标准品。如何选择合适的阴性对照?阴性对照的基本组成也应该尽量与检测样本的组成一致，**先行检测确定其中不含待检物质。比如，检测人血清标本时，阴性对照应该选择正常人血清;检测免疫动物血清中抗体效价时，阴性对照应该选择该动物的免疫前血清。如何选择Zyou化的包被条件?1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被，对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被（先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上，再通过特异性反应使抗原固相化）。经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物，由于分子量太小，往往难于直接吸附在酶标板上，一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联，偶联物吸附于固相载体上。2.包被液的选择一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液，如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话，也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液。3.包被温度的选择通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时，我们强烈建议4-8度条件下包被，有利于蛋白活性的保持。4.包被浓度的选择包被的Z适浓度随固相载体和包被物的性质变化，一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml，要明确针对特定包被抗原的Z适包被浓度需要通过实验来确定。包板后需要封闭吗?应该选择什么样的封闭体系?封闭是否必要，取决于ELISA的模式及具体的实验条件。一般说来，双抗体夹心法，只要酶标记物是高活性的，操作时洗涤彻底，不经封闭也可得到满意的结果。而在间接法测定中，封闭一般是必不可少的。常用的封闭剂有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明胶、5%的脱脂奶粉，AbMART推荐使用5%脱脂奶粉，价廉而且封闭能力强，不过5%脱脂奶粉只适合短期内使用，不宜长期保存，所以试剂盒中较少使用。如何正确使用酶结合物?1.酶结合物的稀释液在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质（例如1%BSA或5%脱脂奶粉），通过竞争YZ酶结合物在固相载体上的非特异性吸附。一般还加入能够YZ蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂，如吐温20（0.05%的浓度较为适宜）。2.正确稀释酶结合物酶结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定，浓度过高易导致本底偏高，浓度过低则会导致阳性信号的减弱。酶结合物**在使用前稀释，稀释后的酶结合物不宜长期保存，因为低浓度的酶结合物极易失活。问题可能的原因解决方法阴性对照产生了阳性的结果试剂或者耗材污染更换试剂，使用一次性耗材洗板出现问题更换更强配方的洗涤液，增加洗板次数，延长洗板时间如果是在双抗体夹心法中出现，有可能是包被抗体与二抗间有交叉反应更换包被抗体或二抗使用了过多的抗体减少抗体使用量整板出现高背景二抗产生了非特异性吸附减少二抗使用量，缩短二抗反应时间显色液不新鲜使用现配的显色液显色反应时间过长没有终止控制显色反应时间，及时终止反应试剂或者耗材污染更换试剂，使用一次性耗材反应温度过高导致的非特异性吸附严格控制反应在Z适温度下进行封闭条件不佳导致的非特异性吸附更换封闭能力更强的封闭液，延长封闭时间反应信号偏低包被条件不合适提高包板浓度，延长包板时间抗原抗体反应不够充分延长反应时间，确保反应在Z适温度下进行显色液配方不恰当增加显色底物的量二抗结合不够提高二抗浓度，延长反应时间，更换效果更好的二抗梯度稀释做ELISA时产生跳孔现象酶标板叠放导致传热不均匀，各孔反应温度有差异尽量避免酶标板叠放在一起移液器稀释时未能保持连续性定期校准移液器，确保移液器的正确使用反应溶液蒸发酶标板用封条密封或者加盖洗板不均匀确定洗板机能够正常工作酶标板底有杂物或者水珠读板时清理干净酶标板底部[详细]

  2018-11-16 10:02

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• CHO细胞宿主蛋白酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  96T使用目的：本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）表达。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）表达。用纯化的CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中CHO细胞宿主蛋白（CHO-HCP）的存在与否。[详细]

  2018-10-03 10:00

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• 人金属肽酶含血小板反应蛋白1酶联elisa试剂盒实验原理

  人金属肽酶含血小板反应蛋白1酶联elisa试剂盒实验原理[详细]

  2024-09-11 17:41

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