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纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒
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本文由 上海语燕生物技术有限公司 整理汇编
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主要用途纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂是一种旨在通过钙黄绿素载入后离心处理或钴淬灭技术,选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色,而存在于或由线粒体释放到线粒体外的荧光染料,即刻发生荧光去除或淬灭,来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体膜通道孔活性(瞬时或长期开放状态)的检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,分辨率高,操作简捷,性能稳定。技术背景线粒体膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时,线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。膜通道孔的开放,显著改变线粒体的通透性。钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放,而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。钙黄绿素-AM,又称双甲亚胺二乙酸钠荧光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作为荧光探针:**,适宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,几乎不具有膜结合性;第三,不是线粒体酶的底物;第四,容易进入细胞及其线粒体。钙黄绿素-AM进入线粒体后,被内酯酶切离,产生具有极性的荧光性强的钙黄绿素,被线粒体俘获。同时线粒体外的钙黄绿素通过离心去除或受到其淬灭剂钴离子的淬灭。一旦线粒体膜通道孔瞬时开放,钙黄绿素释放出线粒体外,由于离心处理或被钴离子淬灭。线粒体内钙黄绿素荧光的变化,表明膜通道孔的开放状态。产品内容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备黑色96孔板:用于线粒体荧光分析的容器1.5毫升离心管:用于线粒体染色的容器载波片/盖玻片:用于线粒体样品存放后荧光分析微型台式离心机:用于沉淀线粒体培养箱:用于染色孵育(共聚焦)荧光显微镜:用于线粒体荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于线粒体荧光定量分析实验步骤直接法准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品(总量为0.2毫克)到1.5毫升离心管加入xx微升染色液(ReagentA),混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的保存液(ReagentC),混匀颗粒群放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃预热的保存液(ReagentC),混匀颗粒群选择下列方式之一进行操作:(A)使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):1)移取10微升上述悬液到载波片上,盖上盖玻片2)激发波长488nm,散发波长505nm――绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):1)移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪:激发波长488nm,散发波长505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强间接法实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混匀后,标记为染色工作液,置入暗室里。然后进行下列操作。准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品(总量为0.2毫克)到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照选择下列方式之一进行操作:使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):1)移取10微升上述细胞悬液到载波片上,盖上盖玻片(每隔5分钟检测一次,持续30分钟)2)激发波长488nm,散发波长505nm――绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):1)移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪(每隔5分钟检测一次,持续30分钟):激发波长488nm,散发波长505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强
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纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒
- 主要用途纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂是一种旨在通过钙黄绿素载入后离心处理或钴淬灭技术,选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色,而存在于或由线粒体释放到线粒体外的荧光染料,即刻发生荧光去除或淬灭,来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体膜通道孔活性(瞬时或长期开放状态)的检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,分辨率高,操作简捷,性能稳定。技术背景线粒体膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时,线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。膜通道孔的开放,显著改变线粒体的通透性。钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放,而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。钙黄绿素-AM,又称双甲亚胺二乙酸钠荧光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作为荧光探针:**,适宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,几乎不具有膜结合性;第三,不是线粒体酶的底物;第四,容易进入细胞及其线粒体。钙黄绿素-AM进入线粒体后,被内酯酶切离,产生具有极性的荧光性强的钙黄绿素,被线粒体俘获。同时线粒体外的钙黄绿素通过离心去除或受到其淬灭剂钴离子的淬灭。一旦线粒体膜通道孔瞬时开放,钙黄绿素释放出线粒体外,由于离心处理或被钴离子淬灭。线粒体内钙黄绿素荧光的变化,表明膜通道孔的开放状态。产品内容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备黑色96孔板:用于线粒体荧光分析的容器1.5毫升离心管:用于线粒体染色的容器载波片/盖玻片:用于线粒体样品存放后荧光分析微型台式离心机:用于沉淀线粒体培养箱:用于染色孵育(共聚焦)荧光显微镜:用于线粒体荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于线粒体荧光定量分析实验步骤直接法准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品(总量为0.2毫克)到1.5毫升离心管加入xx微升染色液(ReagentA),混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的保存液(ReagentC),混匀颗粒群放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃预热的保存液(ReagentC),混匀颗粒群选择下列方式之一进行操作:(A)使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):1)移取10微升上述悬液到载波片上,盖上盖玻片2)激发波长488nm,散发波长505nm――绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):1)移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪:激发波长488nm,散发波长505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强间接法实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混匀后,标记为染色工作液,置入暗室里。然后进行下列操作。准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品(总量为0.2毫克)到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照选择下列方式之一进行操作:使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):1)移取10微升上述细胞悬液到载波片上,盖上盖玻片(每隔5分钟检测一次,持续30分钟)2)激发波长488nm,散发波长505nm――绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):1)移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪(每隔5分钟检测一次,持续30分钟):激发波长488nm,散发波长505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强[详细]
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2018-11-19 10:00
产品样册
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纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒产品说明书
- 主要用途纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂是一种旨在通过钙黄绿素载入后离心处理或钴淬灭技术,选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色,而存在于或由线粒体释放到线粒体外的荧光染料,即刻发生荧光去除或淬灭,来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体膜通道孔活性(瞬时或长期开放状态)的检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,分辨率高,操作简捷,性能稳定。技术背景线粒体膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时,线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。膜通道孔的开放,显著改变线粒体的通透性。钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放,而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。钙黄绿素-AM,又称双甲亚胺二乙酸钠荧光素-乙酰氧基甲基酯【bis(bis-carboxymethylaminomethylfluorescein)-acetoxymethylester】,作为荧光探针:**,适宜的分子量622kd,小于1.5kd;第二,几乎不具有膜结合性;第三,不是线粒体酶的底物;第四,容易进入细胞及其线粒体。钙黄绿素-AM进入线粒体后,被内酯酶切离,产生具有极性的荧光性强的钙黄绿素,被线粒体俘获。同时线粒体外的钙黄绿素通过离心去除或受到其淬灭剂钴离子的淬灭。一旦线粒体膜通道孔瞬时开放,钙黄绿素释放出线粒体外,由于离心处理或被钴离子淬灭。线粒体内钙黄绿素荧光的变化,表明膜通道孔的开放状态。产品内容染色液(ReagentA)微升中和液(ReagentB)毫升保存液(ReagentC)毫升产品说明书1份保存方式保存染色液(ReagentA)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保证6月用户自备黑色96孔板:用于线粒体荧光分析的容器1.5毫升离心管:用于线粒体染色的容器载波片/盖玻片:用于线粒体样品存放后荧光分析微型台式离心机:用于沉淀线粒体培养箱:用于染色孵育(共聚焦)荧光显微镜:用于线粒体荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪:用于线粒体荧光定量分析实验步骤直接法准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品(总量为0.2毫克)到1.5毫升离心管加入xx微升染色液(ReagentA),混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的保存液(ReagentC),混匀颗粒群放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去保存液(ReagentC)小心加入xx微升37℃预热的保存液(ReagentC),混匀颗粒群选择下列方式之一进行操作:(A)使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):1)移取10微升上述悬液到载波片上,盖上盖玻片2)激发波长488nm,散发波长505nm――绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):1)移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪:激发波长488nm,散发波长505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强间接法实验开始前,将-20℃冰箱里的试剂盒中的染色液(ReagentA)置入冰槽里融化,中和液(ReagentB)放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液(ReagentA)到新的1.5毫升离心管,加入xx微升中和液(ReagentB),混匀后,标记为染色工作液,置入暗室里。然后进行下列操作。准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品(总量为0.2毫克)到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如eppendorf5415)小心抽去上清液加入xx微升含有染色液(ReagentA)和中和液(ReagentB)的染色工作液,充分混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟,避免光照选择下列方式之一进行操作:使用(共聚焦)荧光显微镜观察(定性检测):1)移取10微升上述细胞悬液到载波片上,盖上盖玻片(每隔5分钟检测一次,持续30分钟)2)激发波长488nm,散发波长505nm――绿色荧光减弱,表明膜通道孔活性(MPTP)增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测(定量检测):1)移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2)即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪(每隔5分钟检测一次,持续30分钟):激发波长488nm,散发波长505nm――RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP)增强注意事项本产品为20次操作操作时,须戴手套染色前,所有试剂溶液,除染色液(ReagentA)外,需37℃预热建议染色完成后,即刻进行荧光检测分析孵育时,必须避免光照本产品友好使用于双重染色或重叠染色如果不具备505nm散发波长的滤波器,可以使用505nm至530nm中的任一波长如果黑色96孔板的背景读数过高,可以选择530nm散发波长如果膜通道孔为瞬时开放(transient),则荧光缓慢且自发降低本公司提供膜通道孔YZ剂:D0.2毫摩尔环胞素A(cyclosporineA)-12226,维护荧光完整本公司提供系列线粒体分析试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定荧光清晰[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒产品说明书(中文版)
- 纯化线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2016-03-10 00:00
产品样册
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冰冻切片组织线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒产品说明书
- 冰冻切片组织线粒体膜通道孔(MPTP)荧光检测试剂盒产品说明书[详细]
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2016-03-15 00:00
实验操作
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BEIZHUO 纯化线粒体膜通道孔(MPTP)比色法检测试剂盒产品说明书
- BEIZHUO纯化线粒体膜通道孔(MPTP)比色法检测试剂是一种旨在通过比色法检测线粒体的体积(膨胀性)变化,来实时分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体膜通道孔活性的检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,分辨率高,操作简捷,性能稳定。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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兔子线粒体膜通道孔(MPTP)elisa试剂盒试剂盒使用说明书
- 兔子线粒体膜通道孔(MPTP)elisa试剂盒试剂盒使用说明书[详细]
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2014-02-24 00:00
选购指南
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活体细胞线粒体膜通道孔(MPTP)红色荧光(TMRM)检测
- 主要用途活体细胞线粒体膜通道孔(MPTP)红色荧光(TMRM)检测试剂是一种旨在通过四甲基罗丹明甲酯染料,选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色,一旦释放到细胞浆,即刻发生荧光淬灭,来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞线粒体(动物、人体、昆虫等)膜通道孔活性(开放状态)的检测。产品严格无菌,即到即用,活体检测,分辨率高,操作简捷,性能稳定。技术背景线粒体膜通道孔(mitochondrialpermeabilitytransitionpore;MPTP)是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时,线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。线粒体膜电位的去极化(depolarization),导致膜通道孔的开放,显著改变线粒体的通透性,使之线粒体膨胀(swel领),内容物释放。其中钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放,而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。四甲基罗丹明甲酯(tetramethylrhodaminemethylester;TMRM),为罗丹明衍生物阳离子染料,作为电势测定(potentiometric)荧光探针:**,具有亲脂性的;第二,与线粒体内膜负电极结合而聚集;第三,容易进入细胞及其线粒体。四甲基罗丹明甲酯进入细胞后,被细胞内酯酶切离,产生四甲基罗丹明。四甲基罗丹明进入线粒体后,被线粒体俘获,呈现强烈荧光。一旦线粒体膜通道孔开放,四甲基罗丹明释放出来而在胞浆重新分布,其荧光性显著降低。线粒体内荧光的变化,表明膜通道孔的开放状态。[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒
- PCR纯化试剂盒/DNA纯化试剂盒[详细]
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2015-09-11 00:00
标准
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PCR 纯化试剂盒/DNA 纯化试剂盒
- PCR 纯化试剂盒/DNA 纯化试剂盒[详细]
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2014-12-11 00:00
期刊论文
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质粒小提纯化试剂盒
- 资料名称:质粒小提纯化试剂盒
适用产品:本试剂盒适用于小量提取质粒DNA。
正文语言:中文
文件编号:BP020-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
内容简介:CommaX™质粒小提纯化试剂盒采用碱裂解法和新型硅胶膜吸附技术, 能够快速提取和纯化质粒DNA。菌体经碱裂解后上样到离心柱中。在高盐和低pH条件下,质粒DNA特异性地吸附到硅胶膜上;而在低盐或水溶液状态下,DNA解吸附而被洗脱下来,从而得到纯化。用本试剂盒提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染多种细胞等实验。[详细]
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2018-05-18 15:21
其它
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质粒中提纯化试剂盒
- 资料名称:质粒中提纯化试剂盒
适用产品:适用于中量提取质粒DNA。
正文语言:中文
文件编号:BP026-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
内容简介:CommaX™系列产品采用经典的硅胶膜吸附技术。质粒中提纯化柱由收集管、吸附柱、筛板、硅胶膜和压圈五部分组成。在高盐和低pH条件下,硅胶膜专一性地吸附DNA;而在低盐或水溶液状态下,DNA解吸附而被洗脱下来,从而得到纯化。此方法具有简便、无毒、回收率高和纯化效果好等特点。用质粒中提纯化柱提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染多种细胞等实验。[详细]
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2018-05-23 09:52
其它
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质粒中提纯化试剂盒
- 资料名称:质粒中提纯化试剂盒
适用产品:适用于中量提取质粒DNA。
正文语言:中文
文件编号:BP026-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
内容简介:CommaX™系列产品采用经典的硅胶膜吸附技术。质粒中提纯化柱由收集管、吸附柱、筛板、硅胶膜和压圈五部分组成。在高盐和低pH条件下,硅胶膜专一性地吸附DNA;而在低盐或水溶液状态下,DNA解吸附而被洗脱下来,从而得到纯化。此方法具有简便、无毒、回收率高和纯化效果好等特点。用质粒中提纯化柱提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染多种细胞等实验。[详细]
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2018-05-23 16:27
其它
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质粒大提纯化试剂盒
- 资料名称:质粒大提纯化试剂盒
适用产品:适用于大量提取质粒DNA。
正文语言:中文
文件编号:BP027-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
内容简介:CommaX™系列产品采用经典的硅胶膜吸附技术。质粒大提纯化柱由收集管、吸附柱、筛板、硅胶膜和压圈五部分组成。在高盐和低pH条件下,硅胶膜专一性地吸附DNA;而在低盐或水溶液状态下,DNA解吸附而被洗脱下来,从而得到纯化。此方法具有简便、无毒、回收率高和纯化效果好等特点。用质粒大提纯化柱提取的质粒DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接、转化和转染等多种细胞等实验。[详细]
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2018-05-23 16:28
其它
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PCR产物纯化试剂盒
- 资料名称:PCR产物纯化试剂盒
适用产品:本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附技术,能够快速提取来自酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段。
正文语言:中文
文件编号:BP034-1
文件版本:1.0
文件格式:PDF
文件大小:0.9MB
内容简介:本试剂盒采用独特的硅胶膜吸附技术,能够快速提取来自酶切、PCR等反应溶液中的DNA片段。采用独特的缓冲液系统,可Zda限度的去除杂蛋白、其他有机物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,残留的少量杂质可使用漂洗液进行去除,Z后使用洗脱液进行洗脱收集,获得高纯度的DNA片段。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、连接和转化等实验。[详细]
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2024-09-11 17:37
其它
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液相色谱法检测大孔吸附树脂纯化胡芦巴中原薯蓣皂苷
- 液相色谱法检测大孔吸附树脂纯化胡芦巴中原薯蓣皂苷[详细]
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2016-05-19 00:00
其它
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AIP荧光检测
- AIP荧光检测[详细]
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2024-09-30 11:18
课件
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PCR产物纯化试剂盒说明书
- PCR产物纯化试剂盒说明书[详细]
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2016-05-25 00:00
实验操作
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粪便DNA高质纯化试剂盒
- 粪便DNA高质纯化试剂盒产品说明书主要用途粪便DNA高质纯化试剂是一种旨在经过标准分离法以后,由粪便(人体、动物等)中分离获得的DNA,进行二度亲和纯化,Zda限度地去除复杂又难以去除的蛋白、金属成分、杂质等非核酸类物质的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其应用于即时PCR、RLPF分析、测序、杂交、遗传鉴定、突变分析、性别鉴定、司法鉴定等。产品即到即用,性能稳定,操作简单,纯度出色,重复性好,堪称国际上同类产品**。技术背景粪便中含有许多污染成分,降解DNA和YZPCR反应。针对标准处理无法有效地去除顽固干扰因子的情况下,运用特殊亲和技术,达到高度纯化的效果。产品内容缓冲液(ReagentA)2毫升亲和液(ReagentJ)2毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备1.5毫升离心管:用于DNA纯化操作的容器微型台式离心机(例如EPPENDORF5415):用于沉淀反应物恒温水槽:用于孵育反应物实验步骤1.准备好从1克粪便样品分离的DNA产物(100微克DNA总量)2.移入到1.5毫升离心管3.加入适量的缓冲液(ReagentA)到总容量为100微升4.加入100微升亲和液(ReagentB)(注意:使用前,先摇匀沉淀的亲和液(ReagentB))5.用手充分混匀6.放进56℃恒温水槽孵育30分钟,期间用手混匀一次7.放进微型台式离心机离心5分钟,速度为16000g(或13000RPM,例如EPPENDORF5415)8.小心移出180微升上清液到新的1.5毫升离心管9.移出适量DNA溶液进行后续PCR反应或保存在-20℃冰箱里注意事项1.本产品为20次(1克粪便样品的DNA产物)操作或50次(200毫克粪便样品的DNA产物)操作2.操作时,须戴手套3.根据用户样品量大小,相应调整试剂用量4.亲和液(ReagentB)使用前,须摇匀5.建议使用粪便DNA分离试剂盒(HL20011.1)作为标准分离法操作6.本公司提供系列粪便核酸纯化试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定纯度优异[详细]
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2018-11-18 10:00
产品样册
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细菌基因组DNA纯化试剂盒
- 本公司新推出的全新细菌基因组纯化试剂盒,操作简便,纯化量大,可纯化革兰氏阳性和阴性菌的基因组DNA。细菌基因组DNA提取试剂盒使用说明本试剂盒可用于革兰氏阴性和阳性菌的基因组DNA提取,由细菌重悬液、裂解液、蛋白沉淀液以及DNA溶解液组成。可从1-5ml菌液中提取基因组DNA。整个提取过程不超过45分钟。提取过程包括:1菌液离心,重悬。2裂解菌体,释放基因组DNA。3盐析沉淀蛋白,分离DNA。4异丙醇沉淀脱盐并浓缩。570%乙醇清洗,晾干并用DNA溶解液溶解。本试剂盒采用复合裂解液,其中含有YZDNA酶的成分,在加热(65°C)状态下,可保证完整的细菌基因组DNA的充分裂解释放,本试剂盒即可提取异丙醇沉淀时,罕见浑浊的蛋白质杂质的共沉淀。提取的基因组可用于PCR扩增、内切酶消化以及膜杂交等。一、试剂盒组成(本试剂盒提供的组份,至少可提取100份1-5ml菌液基因组DNA的纯化,每种组份均有足够的富余量)1.复合裂解液:30ml1瓶。2.蛋白沉淀液:300ml1瓶。3.DNA溶解液:20ml1瓶。4.操作说明书一份。二、本试剂盒未提供,须用户自备的试剂为:异丙醇,70%乙醇(国产分析纯)。三、提取操作:1.菌液离心:取革兰氏阴性菌菌液1-2ml;或者革兰氏阳性菌菌液2-5ml,1000rpm离心1分钟。2.加入细菌重悬液100ul,震荡使菌体重悬。3.将复合裂解液置65°C水浴加热,使结晶成分溶解,每个细菌重悬液中分别加入300ul的复合裂解液。4.混璇器震荡混匀10秒,置65°C水浴中反应10分钟(革兰氏阴性菌),20分钟(革兰氏阳性菌)。5.各管中加入300ul蛋白沉淀液。上下颠倒5-6次使两者混匀。6.13000-16000×g,离心3-5分钟。7.将上清液转移至新的离心管中(注意:由于有些细菌含有多糖或者脂蛋白成分,离心后会出现细胞成分上浮的情况,此时取漂浮层下的均一透明液体),加入等体积异丙醇,此时可见透明的絮状物,混匀后离心,同步骤5,吸去上清。8.离心管中加入200ul,70%的乙醇溶液,来回倒置,清洗管壁,离心同上。9.移去70%乙醇,倒置离心管于干净的滤纸上,自然干燥10-15分钟,加入DNA溶解液100ul。10.快速漩涡震荡1-2秒,使DNA溶解液冲刷到所有沉淀的DNA。11.将纯化的全血基因组置65C水浴1小时,或4C过夜使DNA充分溶解(要求不严格的PCR试验可缩短时间或省去该步),轻轻弹动管壁有助于溶解基因组DNA可直接进行PCR等下一步操作。四、注意事项:1.用户可选择使用RNaseA,使用方法为:在第3步完成后1.5ulRNaseA,混匀后,37C孵育15分钟,冷却至室温。(RNaseA的配法:将RNaseA溶于TEbuffer中,浓度为4mg/ml,煮沸10分钟,以去除DNase,分装后-20C保存;也可购买配好的试剂使用。)2.革兰氏阳性菌由于细胞壁的存在,纯化的量较阴性菌要少一倍以上。3.提取得DNA样本在70%乙醇中,存于-80C,可长期保存。五、储存条件:本试剂盒在室温条件下可保存一年。[详细]
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2024-09-29 11:00
产品样册
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精子细胞氧化应激活性氧(ROS)高质荧光检测试剂盒
- 精子细胞氧化应激活性氧(ROS)高质荧光检测试剂盒[详细]
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2015-05-07 00:00
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