人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒技术分析

本文由 上海研生实业有限公司 整理汇编

2018-09-28 10:00 319阅读次数

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• 人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒技术分析

  人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒技术分析人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)水平。用纯化的人肺炎衣原体（Cpn）抗原包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)，再与HRP标记的人肺炎衣原体（Cpn）抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)浓度。人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒操作步骤加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。[详细]

  2018-09-28 10:00

  产品样册

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• 人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA试剂盒

  人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-09 00:00

  课件

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• 人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)检测试剂盒

  人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)检测试剂盒[详细]

  2015-03-10 00:00

  期刊论文

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• 人肺炎衣原体抗体（Cpn-Ab）试剂盒使用方法

  检测范围：96T4pg/ml-120pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)含量。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)水平。用纯化的人肺炎衣原体（Cpn）抗原包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)，再与HRP标记的人肺炎衣原体（Cpn）抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（240pg/ml）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]

  2018-10-08 10:01

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• 肺炎衣原体IgG ELISA试剂盒说明书

  一.【产品名称】通用名称：肺炎衣原体抗体IgGELISA试剂盒英文名称：CPIgGELISAKit二.CPIgG试剂盒【包装规格】96人份/盒三.CPIgG试剂盒【预期用途】CP试剂盒采用酶联免疫吸附法，用于定性检测人类血清中肺炎衣原体特异性IgG抗体。本试剂盒可作为肺炎衣原体感染诊断的辅助工具。仅用于体外诊断。肺炎衣原体(TWAR)是一种新出现的有传染性的因子，可引起一系列临床表现，包括上呼吸道和下呼吸道感染。衣原体肺炎感染一般是温和的、无症状的，然而，肺炎衣原体感染可能会引起一些严重的疾病如：咽炎、窦炎、急性支气管炎和社区获得性肺炎。如果未检测出和未进行ZL，此感染可能会导致长期持久的疾病。Zxin的数据显示了肺炎衣原体感染和慢性疾病的关联。儿童感染肺炎衣原体的几率较低，到中年时感染率急剧，到老年时持续（>50%）。样本采集的困难性和被感染部位的不易接近性严重影响直接检测方法的有效性。因此，在直接检测方法不是很有效的情况下，血清学检测作为远端和慢性衣原体感染鉴定的非入侵性工具，常规应用于临床。此外，特定的抗体类型的出现也能指示出疾病的状态。早期衣原体感染的特征是在2-4周内出现IgM抗体，随后6-8周内才有IgA和IgG反应。在急性感染肺炎衣原体后，IgM抗体在2-6个月内会消失而IgG抗体滴度会慢慢减少，而IgA抗体趋向于迅速消失。当怀疑衣原体初步感染时，IgM的检测有高度的诊断意义。然而，重复和慢性感染时IgM水平是比较低的，因此如果没有检测到IgM并不排除正在感染的可能性。对于重复感染，IgG和IgA水平升高较快，通常在1至2周内。IgA抗体是一个可靠的原发性、慢性和再感染性的免疫学标记物。这些抗体通常在ZL和根除衣原体感染之后快速下降并回复到基线水平。IgA抗体滴度的维持一般被认为是慢性衣原体感染的标志。IgG抗体维持长时间并下降较慢。因此，IgG抗体的出现主要表示衣原体感染尚未解决。然而，IgG抗体的四倍升高或其[详细]

  2018-10-31 10:00

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• 肺炎衣原体IgM ELISA试剂盒说明书

  一.【产品名称】通用名称：肺炎衣原体抗体IgMELISA试剂盒英文名称：CPIgMELISAKit二.肺炎衣原体抗体IgMELISA试剂盒【包装规格】96人份/盒三.肺炎衣原体抗体IgMELISA试剂盒【预期用途】CP试剂盒是一种酶联免疫吸附测定，用于定性检测人类血清中肺炎衣原体特异性IgM抗体。本试剂盒可通过检测IgM抗体来早期诊断肺炎衣原体现症感染。仅用于体外诊断。肺炎衣原体(TWAR)是一种新出现的有传染性的因子，可引起一系列临床表现，包括上呼吸道和下呼吸道感染。衣原体肺炎感染一般是温和的、无症状的，然而，肺炎衣原体感染可能会引起一些严重的疾病如：咽炎、窦炎、急性支气管炎和社区获得性肺炎。如果未检测出和未进行ZL，此感染可能会导致长期持久的疾病。Zxin的数据显示了肺炎衣原体感染和慢性疾病的关联。儿童感染肺炎衣原体的几率较低，到中年时感染率急剧，到老年时持续（>50%）。样本采集的困难性和被感染部位的不易接近性严重影响直接检测方法的有效性。因此，在直接检测方法不是很有效的情况下，血清学检测作为远端和慢性衣原体感染鉴定的非入侵性工具，常规应用于临床。此外，特定的抗体类型的出现也能指示出疾病的状态。早期衣原体感染的特征是在2-4周内出现IgM抗体，随后6-8周内才有IgA和IgG反应。在急性感染肺炎衣原体后，IgM抗体在2-6个月内会消失而IgG抗体滴度会慢慢减少，而IgA抗体趋向于迅速消失。当怀疑衣原体初步感染时，IgM的检测有高度的诊断意义。然而，重复和慢性感染时IgM水平是比较低的，因此如果没有检测到IgM并不排除正在感染的可能性。对于重复感染，IgG和IgA水平升高较快，通常在1至2周内。[详细]

  2018-10-31 10:00

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• 肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法）

  肺炎衣原体抗体检测试剂盒（胶体金法）[详细]

  2024-09-28 11:52

  实验操作

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• 人衣原体抗体（CHLA-AbCasset）试剂盒说明书

  人衣原体抗体（CHLA-AbCasset）试剂盒（ELISA）使用说明书l本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人衣原体抗体（CHLA-AbCasset）的含量。l有效期：6个月l保存条件：2-8℃l本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断实验原理试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人衣原体抗体（CHLA-AbCasset）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的人衣原体抗体（CHLA-AbCasset）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样本处理及要求1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2.血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3.组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶YZ剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。Z后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。4.细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。注：标本溶血会影响Z后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。标本处理1.本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。2.实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。3.若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。4.使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。5.若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。6.某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。7.建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。需要而未提供的试剂和器材酶标仪（450nm）高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL37℃恒温箱蒸馏水或去离子水试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板8孔×12条8孔×6条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无备注：1.标准品浓度依次为：48、24、12、6、3、0ng/mL2.经过大量正常标本检验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内，实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过Zda标准品浓度时，可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。注意事项严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。试剂准备试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。操作步骤1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。实验结果计算以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。试剂盒性能1.检测范围：1.5ng/mL48ng/mL。2.灵敏度：Zdi检测浓度小于0.1ng/mL。3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。4.重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。说明1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析，本产品可能存在一定的质量技术风险。2.Z终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关，请务必准备充足的标本备份。3.不同批次的同一产品可能会有少许差别，如：检测限、灵敏度以及显色时间等，请依据试剂盒内说明书进行实验操作，网站电子版说明书仅作参考。4.只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果，不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到**的检测结果。问题解答若实验效果不好，请及时对显色结果拍照，保留所用板条及未使用试剂，并妥善保存，然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料：问题可能原因解决方案标准曲线差吸取及洗涤不充分充分的吸取及洗涤移液不极ng确检查和校正移液器精密度低洗涤不充分按说明书要求充分洗涤和浸泡混匀不充分和吸取试剂不足充分混匀和吸取试剂重复利用吸头、容器和覆膜使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜加样不极ng确检查和校正移液器O.D值低每孔加的试剂量不极ng确校正移液器，极ng确加入试剂温育时间不正确保证充足的温育时间温育温度不正确试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度酶标记物或底物失效通过混合酶标记物和底物，颜色应迅速显现来检查没有加入终止液按照说明书实验操作步骤加入终止液超出读数时间读数在说明书推荐的读数时间内读数样本值不正确的样本储存方式正确储存样本，使用新鲜样本进行实验不正确的样本收集和处理方法采取正确的样本收集和处理方法待测物质在样本中含量低使用新鲜样本，重复实验[详细]

  2018-11-16 10:01

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• 人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒

  人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-18 02:57

  专利

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• 人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒

  人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-25 23:48

  实验操作

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• 人沙眼衣原体抗体(CT)检测试剂盒

  人沙眼衣原体抗体(CT)检测试剂盒[详细]

  2024-09-28 00:39

  应用文章

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• ELISA法测定肺炎衣原体实验步骤

  ELISA法测定肺炎衣原体实验步骤[详细]

  2015-04-08 00:00

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• 人沙眼衣原体抗体IgM(CT-IgM)ELISA试剂盒

  人沙眼衣原体抗体IgM(CT-IgM)ELISA试剂盒[详细]

  2015-01-13 00:00

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• 人沙眼衣原体抗体IgM(CT-IgM)检测试剂盒

  人沙眼衣原体抗体IgM(CT-IgM)检测试剂盒[详细]

  2015-03-16 00:00

  专利

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• 人沙眼衣原体抗体IgG(CT-IgG)检测试剂盒

  人沙眼衣原体抗体IgG(CT-IgG)检测试剂盒[详细]

  2015-03-16 00:00

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• 人沙眼衣原体抗体IgG(CT-IgG)ELISA试剂盒

  人沙眼衣原体抗体IgG(CT-IgG)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 17:22

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• 人沙眼衣原体（CT）酶联免疫分析 试剂盒使用说明书

  检测范围：96T2ng/L-48ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中沙眼衣原体（CT）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人沙眼衣原体（CT）水平。用纯化的人沙眼衣原体（CT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入沙眼衣原体（CT），再与HRP标记的沙眼衣原体（CT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的沙眼衣原体（CT）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人沙眼衣原体（CT）浓度。[详细]

  2018-09-19 10:01

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• 人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒

  人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒[详细]

  2013-12-06 00:00

  操作手册

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• 人沙眼衣原体(CT)检测试剂盒

  人沙眼衣原体(CT)检测试剂盒[详细]

  2015-03-12 00:00

  实验操作

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• 人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒

  人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-18 19:19

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