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人前列腺素E1(PGE1)检测试剂盒
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本文由 上海信裕生物技术有限公司 整理汇编
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人前列腺素E1(PGE1)检测试剂盒
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人前列腺素E1(PGE1)检测试剂盒
- 人前列腺素E1(PGE1)检测试剂盒[详细]
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2015-03-16 00:00
专利
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人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒
- 人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
产品样册
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人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒
- 人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒[详细]
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2015-01-13 00:00
应用文章
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人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒
- 人前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒[详细]
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2015-09-11 00:00
专利
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大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒
- 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-11 00:00
专利
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大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA Kit
- 公司将ELISA试剂盒操纵中各个环节常泛起的问题我们总结一下:首先选择试剂:选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂仿单进行操纵,操纵前将试剂在室温下平衡30-60分钟,试验以敏捷度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的应用,但操纵中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不留意,有可能导致显色不全、花板等结果,请避免反复冻融。特别要留意加样问题。加样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操纵的试剂,加样对数据的影响比较大。显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制;尺度品:有的试剂盒中尺度品是已经配制好的,4度保留;有的是要现配制的;按照仿单操纵;浓缩生物素结合的二抗和HRP:假如需要配制,试剂盒没注明配好可以保留多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);原则是ELISA试剂盒上没有指出配制物的蕴藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以後总量不够。不好的操作原因:不会准确使用加样器;血清或血浆标天职离不好即进行加样;手工操纵中,加样板过多造成加样後放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外;参考预备实验的准确步骤,实验的事前预备工作,标本收集与保留:避免使用肉眼可见的溶血标本、高脂标本和混浊标本;2-8℃下,标本可放置24-48小时,长期保留需放置-20℃下。详细请参照:ELISA实验标本的采集与处理:ELISA实验标本的保留:试剂使用中的预备工作及留意事项:试剂盒中会有提示,一般需要预备的有:洗涤液;用前配制;有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月;假如没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。TPS(HumanTotalproteinS)ELISAKit人总蛋白SX2073396TSDPR(humanserumdeprivationresponse)ELISAKit人血清剥夺反应相关蛋白X2073496THNP1-3(Humanneutrophilpeptide1-3)ELISAKit人中性粒细胞防御素1-3X2073596TECP(Humaneosinophilcationicprotein)ELISAKit人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白X2073696TPS(HumanplasmaanticoagulantproteinS)ELISAKit人血浆抗凝蛋白SX2073796TPC(Humanplasma大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISAKitanticoagulantproteinC)ELISAKit人血浆抗凝蛋白CX2073896T[详细]
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2018-09-27 10:00
产品样册
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人前列腺素F(PGF)检测试剂盒
- 人前列腺素F(PGF)检测试剂盒[详细]
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2015-03-16 00:00
期刊论文
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48T人前列腺素E2ELISA检测试剂盒
- 人前列腺素E2ELISA检测试剂盒 本试剂仅供研究使用标本:细胞上清液试验原理: PGE2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知PGE2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PGE2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PGE2的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。人前列腺素E2ELISA检测试剂盒 操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人前列腺素E2ELISA检测试剂盒 操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。人前列腺素E2ELISA检测试剂盒 结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的PGE2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的PGE2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlrecProteinA/RBITC罗丹明标记重组纯化蛋白A0.3mlBovineIgG/RBITC罗丹明标记牛IgG0.3mlHER2receptor(NT)(erbB-2isoform2receptorN-Terminus)抗c-erbB-2受体抗体(N端)0.2mlHGF(hepatocytegrowthfactor)肝细胞生长因子抗体0.1mlHGF(hepatocytegrowthfactor)肝细胞生长因子抗体0.2mlHGV(HepatitisGvivus)庚型肝炎病毒抗体0.2mlHHV8/ORFK2(Humanherpesvirus8)人类疱疹病毒8抗体0.1mlHHV8/ORF50(Humanherpesvirus8typeP)人类疱疹病毒8抗体0.1mlHHV8/ORF50(Humanherpesvirus8typeP)人类疱疹病毒8抗体0.2mlChickenIgG/RBITC罗丹明标记鸡IgG0.3mlChickenIgM/RBITC罗丹明标记鸡IgM0.3mlHHV8/ORFK2(Humanherpesvirus8typeP)人类疱疹病毒8抗体0.1mlHHV8/ORFK2(Humanherpesvirus8typeP)人类疱疹病毒8抗体0.2mlHIF-1α(Hypoxia-induciblefactor-1α)人类疱疹病毒8抗体0.1mlHIF-1α(Hypoxia-induciblefactor-1α)缺氧诱导因子1α抗体0.2mlHIF-1β/ARNT1(Hypoxia-induciblefactor-1β)缺氧诱导因子1α抗体0.2mlHIF-2α(Hypoxia-induciblefactor-2α)缺氧诱导因子1β抗体0.2mlHistoneH2/HTB901抗乙酰化组蛋白H1b抗体0.2mlphosphoHistoneH1,4(pSer27)组蛋白H3样蛋白抗体(BrassicajunceaN端抗体0.2mldogIgM/RBITC罗丹明标记狗IgM0.3mlGoatIgM/RBITC罗丹明标记羊IgM0.3mlGuineaIgG/RBITC罗丹明标记豚鼠IgG0.3mlGuineaIgM/RBITC罗丹明标记豚鼠IgM0.3ml[详细]
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2018-09-14 10:01
产品样册
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人前列腺素E2(PGE2)检测试剂盒
- 人前列腺素E2(PGE2)检测试剂盒[详细]
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2024-09-29 23:15
实验操作
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雌酮(E1)检测试剂盒说明书
- 雌酮(E1)检测试剂盒适用生物General,通用雌酮(E1)检测试剂盒检测范围24.69-2000pg/mL灵敏度8.86pg/mL样本类型Serum,plasmaandotherbiologicalfluids.实验时长2.5h实验方法竞争YZ法雌酮(E1)检测试剂盒规格96T雌酮(E1)检测试剂盒ELISAKitforEstrone(E1)FORINVITROANDRESEARCHUSEONLY,NOTFORUSEINCLINICALDIAGNOSTICPROCEDURES!OrganismspeciesGeneralProductNo.CEB003GeSampletypeSerum,plasmaandotherbiologicalfluids.Format96-wellstripplateAssaylength2.5hoursDetectionrange24.69-2000pg/mLThestandardcurveconcentrationsusedfortheELISA’swere2000pg/mL,666.67pg/mL,222.22pg/mL,74.07pg/mL,24.69pg/mLSensitivityTheminimumdetectabledoseofthiskitistypicallylessthan8.86pg/mL.SpecificityThisassayhashighsensitivityandexcellentspecificityfordetectionofEstrone(E1).Nosignificantcross-reactivityorinterferencebetweenEstrone(E1)andanalogueswasobserved.RecoveryMatriceslistedbelowwerespikedwithcertainlevelofrecombinantEstrone(E1)andtherecoveryrateswerecalculatedbycomparingthemeasuredvaluetotheexpectedamountofEstrone(E1)insamples.MatrixRecoveryrange(%)Average(%)serum(n=5)80-9085EDTAplasma(n=5)97-105102heparinplasma(n=5)96-105101PrecisionIntra-assayPrecision(Precisionwithinanassay):3sampleswithlow,middleandhighlevelEstrone(E1)weretested20timesononeplate,respectively.Inter-assayPrecision(Precisionbetweenassays):3sampleswithlow,middleandhighlevelEstrone(E1)weretestedon3differentplates,8replicatesineachplate.CV(%)=SD/meanX100Intra-Assay:CV<10%Inter-Assay:CV<12%LinearityThelinearityofthekitwasassayedbytestingsamplesspikedwithappropriateconcentrationofEstrone(E1)andtheirserialdilutions.Theresultsweredemonstratedbythepercentageofcalculatedconcentrationtotheexpected.Sample1:21:41:81:16serum(n=5)93-101%84-98%84-98%87-96%EDTAplasma(n=5)92-105%93-101%79-90%91-99%heparinplasma(n=5)88-101%91-102%83-99%93-101%StabilityThestabilityofkitisdeterminedbythelossrateofactivity.Thelossrateofthiskitislessthan5%withintheexpirationdateunderappropriatestoragecondition.Tominimizeextrainfluenceontheperformance,operationproceduresandlabconditions,especiallyroomtemperature,airhumidity,incubatortemperature首ldbestrictlycontrolled.Itisalsostronglysuggestedthatthewholeassayisperformedbythesameoperatorfromthebeginningtotheend.ReagentsandmaterialsprovidedReagentsQuantityReagentsQuantityPre-coated,readytouse96-wellstripplate1Platesealerfor96wells4Standard2StandardDiluent1×20mLDetectionReagentA1AssayDiluentA1×12mLDetectionReagentB1×120μLAssayDiluentB1×12mLReagentDiluent1×300μLStopSolution1×6mLTMBSubstrate1×9mLInstructionmanual1WashBuffer(30×concentrate)1×20mLAssayproceduresummary1.Prepareallreagents,samplesandstandards;2.Add50μLstandardorsampletoeachwell.Andthenadd50μLpreparedDetectionReagentAimmediately.Shakeandmix.Incubate1hourat37oC;3.Aspirateandwash3times;4.Add100μLpreparedDetectionReagentB.Incubate30minutesat37oC;5.Aspirateandwash5times;6.Add90μLSubstrateSolution.Incubate15-25minutesat37oC;7.Add50μLStopSolution.Readat450nmimmediately.TestprincipleThisassayemploysthecompetitiveinhibitionenzymeimmunoassaytechnique.AmonoclonalantibodyspecifictoEstrone(E1)hasbeenpre-coatedontoamicroplate.AcompetitiveinhibitionreactionislaunchedbetweenbiotinlabeledEstrone(E1)andunlabeledEstrone(E1)(Standardsorsamples)withthepre-coatedantibodyspecifictoEstrone(E1).Afterincubationtheunboundconjugateiswashedoff.Next,avidinconjugatedtoHorseradishPeroxidase(HRP)isaddedtoeachmicroplatewellandincubated.TheamountofboundHRPconjugateisreverseproportionaltotheconcentrationofEstrone(E1)inthesample.Afteradditionofthesubstratesolution,theintensityofcolordevelopedisreverseproportionaltotheconcentrationofEstrone(E1)inthesample.[详细]
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2018-10-31 10:00
产品样册
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人8异前列腺素(8-iso-PG)检测试剂盒
- 人8异前列腺素(8-iso-PG)检测试剂盒[详细]
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2015-03-16 00:00
选购指南
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人8-异构前列腺素(8-isoprostane)检测试剂盒
- 人8-异构前列腺素(8-isoprostane)检测试剂盒[详细]
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2015-03-06 00:00
专利
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人6酮前列腺素(6-K-PG)检测试剂盒
- 人6酮前列腺素(6-K-PG)检测试剂盒[详细]
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2015-03-16 00:00
实验操作
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人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)检测试剂盒
- 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)检测试剂盒[详细]
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2015-03-13 00:00
期刊论文
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人前列腺素E2(PGE2) ELISA检测试剂盒说明书
- 人前列腺素E2(PGE2) ELISA检测试剂盒说明书[详细]
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2015-03-02 00:00
产品样册
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人前列腺素E2(PGE2) ELISA检测试剂盒说明书
- 人前列腺素E2(PGE2) ELISA检测试剂盒说明书[详细]
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2015-03-02 00:00
实验操作
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大鼠雌一醇(E1)检测试剂盒
- 大鼠雌一醇(E1)检测试剂盒[详细]
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2024-09-28 21:49
应用文章
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小鼠丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1) ELISA试剂盒
- 小鼠丙酮酸脱氢酶E1(PDH E1) ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-09 00:00
课件
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特价促销人前列腺素E2ELISA检测试剂盒使用说明书
- 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:PGE2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知PGE2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PGE2和生物素标记的抗体同时温育。人前列腺素E2ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PGE2的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。人前列腺素E2ELISA检测试剂盒底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的PGE2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的PGE2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、敏感度:1.0pg/mlRC080-5ugRecombinantHumanMIP-3alpha/CCL20(rHuMIP-3a/CCL20)5ugRC081-2ugRecombinant人前列腺素E2ELISA检测试剂盒MurineSDF-1beta/CXCL12(rMuCXCL12)2ugRC082-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-34(rHuPTH1-34)重组激素100ugRC083-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone7-34(rHuPTH7-34)重组激素100ugRC084-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-84(rHuPTH1-84)重组激素100ugRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重组鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml细胞分离液1.077200ml[详细]
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2018-09-19 10:00
产品样册
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小鼠前列腺素E2ELISA 检测试剂盒
- 试验原理:PGE2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知PGE2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PGE2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PGE2的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:2000pg/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(4.0ml)1瓶(2.0ml)即用型生物素标记的抗PGE2抗体1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型小鼠前列腺素E2ELISA检测试剂盒自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。小鼠前列腺素E2ELISA检测试剂盒安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1.标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:2000pg/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。1000pg/ml(5号标准品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液500pg/ml(4号标准品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液250pg/ml(3号标准品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液125pg/ml(2号标准品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液62.5pg/ml(1号标准品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0pg/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2.洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤1.使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。4.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5.每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的PGE2标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的PGE2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-2000pg/ml4、敏感度:1.0pg/ml[详细]
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2018-09-27 10:00
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