亲和层析技术

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亲和层析技术

亲和层析技术[详细]
2013-04-09 00:00
标准
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链亲和素

链亲和素[详细]
2014-09-29 00:00
标准
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亲和层析柱使用说明

亲和层析柱北京索莱宝科技有限公司供应各种规格亲和层析柱产品说明亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。它是利用生物分子间存在很多特异性的相互作用（如抗原和抗体、酶和底物或YZ剂、激素和受体等），通过将具有亲和力的两个分子中的一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化。索莱宝提供的亲和层析柱工具可应用于如下方面：①纯化重组蛋白；②纯化抗原和抗体；③纯化多肽；④纯化DNA；⑤糖蛋白的纯化；⑥纯化磷酸化蛋白和肽；⑦DNA结合蛋白的纯化；⑧去除内毒素，等。亲和层析柱空柱管的材质为YL级的聚丙烯，这种工程材料通过大量的应用证明具有清洁无毒，不与生物分子结合和低溶解度的优点。亲和层析柱空柱所用的筛板是选用纯净的UHWM-PE（超高分子量聚乙烯）为原料，经独特的工艺加工而成，具有亲水性。筛板在装填时安置在填料基质的上下端，以阻挡昂贵的基质渗出。亲水性筛板采用了领xian的亲水性UHWM-PE生产技术，该筛板能保证使用重力法时的流速为1-2ml/分钟或1-2滴/秒。同时，该筛板和其它同类产品相比，不会由于亲水性基团的引入而对蛋白质产生吸附。另外，该亲水性筛板在使用过程中不易形成气泡，气泡会使流速降低，液体通过基质不均匀。亲和层析柱产品应用1，抗体纯化纯化抗体一般用ProteinA作为纯化的配体，也可以用ProteinG或ProteinL或异源性抗体作为配体。2，小分子物质提取（以提取黄曲霉毒素M1为例）试样通过免疫亲和柱时,黄曲霉毒素M1被提取。亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上,当样品通过亲和柱时,抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合，形成抗体一抗原复合体。用水洗柱除去柱内杂质,然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1,收集洗脱液。用带有荧光检测器的GX液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1含量。3，重组蛋白纯化近年来，随着生物技术，特别是基因工程技术的迅猛发展，重组蛋白表达和纯化越来越容易。常用的重组蛋白表达策略是把蛋白与亲和标签融合表达，利用亲和标签一步纯化出目标蛋白。此方法无需了解蛋白质的生化特性或生理活性，就可通过带标签的重组融合蛋白选择性地与层析基质上的配体结合，从而得以纯化任何蛋白质。此方法与常规的层析方法不同之处在于，无需针对不同的蛋白质开发特定的配体和方法。采用保护蛋白质结构和功能完整性的温和条件，可一步亲和层析从粗提物中纯化出重组蛋白，纯度可达90％以上。亲和标签已成为后基因组学时代纯化重组蛋白常用手段。亲和标签系统一般具有以下特征：(a)一步的吸附纯化；(b)对三级结构和生物活性影响小；(c)可方便且专一的去除以产生天然蛋白质；(d)在纯化过程中重组蛋白的分析简便准确；(e)适用于大量的不同蛋白质。但是没有哪个标签是wan美的，只能根据实际需要去自己筛选，下表是分的标签以及纯化的方案。[详细]
2018-08-25 10:00
产品样册
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亲和层析柱工具套装

资料名称：亲和层析柱工具套装适用产品：逗点生物提供的亲和层析工具套装可用于：1) 纯化重组蛋白；2) 纯化抗原和抗体；3) 纯化多肽；4) 纯化DNA；5) 纯化糖蛋白；6) 纯化磷酸化蛋白和肽；7) 纯化DNA结合蛋白；8) 去除内毒素等真菌毒素。正文语言：中文文件编号：BP010-2 文件版本：2.0 文件格式：PDF 文件大小：1.0MB 内容简介：亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的纯化技术。生物分子间存在多种特异性相互作用（如抗体-抗原、酶-底物/YZ剂、激素-受体），从而可将具有亲和力的两种分子中的一种固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一种分子进行纯化。[详细]
2018-05-18 15:18
其它
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亲和层析柱工具套装

资料名称：亲和层析柱工具套装适用产品：逗点生物提供的亲和层析工具套装可用于：1) 纯化重组蛋白；2) 纯化抗原和抗体；3) 纯化多肽；4) 纯化DNA；5) 纯化糖蛋白；6) 纯化磷酸化蛋白和肽；7) 纯化DNA结合蛋白；8) 去除内毒素等真菌毒素。正文语言：中文文件编号：BP010-2 文件版本：2.0 文件格式：PDF 文件大小：1.0MB 内容简介：亲和层析是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的纯化技术。生物分子间存在多种特异性相互作用（如抗体-抗原、酶-底物/YZ剂、激素-受体），从而可将具有亲和力的两种分子中的一种固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一种分子进行纯化。[详细]
2018-05-18 15:18
其它
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TOSOH亲和填料产品目录（AFC）

TOSOH亲和填料产品目录（AFC）[详细]
2016-02-03 00:00
专利
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TSKgel Protein A-5PW 亲和色谱柱产品介绍

TSKgel Protein A-5PW 亲和色谱柱产品介绍[详细]
2016-05-27 00:00
标准
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GE 凝胶过滤、亲和、新填料秋季75折大促销

GE 凝胶过滤、亲和、新填料秋季75折大促销[详细]
2012-09-29 00:00
课件
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亲和素和生物素的ELISA试剂盒的应用

亲和素和生物素的ELISA试剂盒的应用[详细]
2015-05-18 00:00
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黄曲霉毒素分析方法---免疫亲和净化柱/UVE法

黄曲霉毒素分析方法---免疫亲和净化柱/UVE法[详细]
2024-09-17 10:26
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默克密理博Eshmuno® A蛋白A亲和填料产品样册

默克密理博Eshmuno® A蛋白A亲和填料产品样册[详细]
2016-10-20 10:08
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使用椭圆偏振光谱仪表征用于生物材料的生物素-亲和素系

使用椭圆偏振光谱仪表征用于生物材料的生物素-亲和素系[详细]
2024-09-16 02:52
期刊论文
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大鼠核因子B亚基p65亲和肽(NF-B p65)ELISA试剂盒

大鼠核因子B亚基p65亲和肽(NF-B p65)ELISA试剂盒[详细]
2013-12-10 00:00
报价单
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兔核因子B亚基p65亲和肽(NF-B p65)ELISA试剂盒

兔核因子B亚基p65亲和肽(NF-B p65)ELISA试剂盒[详细]
2024-09-30 15:23
报价单
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默克密理博ProSep® Ultra Plus 蛋白A亲和填料产品样册

默克密理博ProSep® Ultra Plus 蛋白A亲和填料产品样册[详细]
2016-10-20 10:08
标准
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人核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κB p65）ELISA试剂盒

人核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）水平。用纯化的人核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65），再与HRP标记的核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
2018-10-19 10:00
产品样册
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人核转录因子-κB亚基p65亲和肽ELISA试剂盒操作步骤

人核转录因子-κB亚基p65亲和肽ELISA试剂盒操作步骤使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）水平。用纯化的人核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65），再与HRP标记的核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人核转录因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）浓度。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。480pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液240pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液120pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液60pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液30pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]
2018-12-30 10:00
产品样册
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人核转录因子-κB亚基p65亲和肽elisa试剂盒实验原理

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)水平。用纯化的人核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)，再与HRP标记的核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的核转录因子-κB亚基p65亲和(NF-κBp65)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人核转录因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（4800ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个[详细]
2024-10-02 03:28
产品样册
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人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit文献

人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit文献[详细]
2014-08-21 00:00
应用文章
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人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit说明书

人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA Kit说明书[详细]
2014-08-21 00:00
其它
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该会员其他资料: 做好免疫组化染色必须注意的问题; ELISA中的试剂－免疫吸附剂; 酶联免疫吸附测定（ELISA）操作要点; ELISA实验质量控制问题; ELISA常见问题; ELISA中的试剂－酶的底物; 体外诊断试剂-超级ELISA优化方案; 实验室常见小故障的处理; ELISA中非特异性显色原因分析; ELISA操作要点

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