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伯努利原理实验集锦
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本文由 许昌瑞泰丰科技有限公司 整理汇编
2016-05-12 00:00 363阅读次数
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伯努利原理实验集锦
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2016-05-12 00:00
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- V-P实验原理注意事项(1)原理:有些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧产生乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在碱性环境中,被空气中的氧氧化为二乙酰,二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的胍基发生反应生成红色的化合物。若培养基中的胍基含量过少,则可加入少量含胍基的化合物等。(2)V-P试剂:肌酸0.3%或原粉,40%的NaOH溶液。(3)实验方法:接种实验菌于葡萄糖蛋白胨水培养基(与甲基红实验相同)中,每次两个重复,置适温培养2-6d,取培养液和40%NaOH等量相混,加入少许肌酸,10min如培养液出现红色,即为实验阳性反应,有时需要放置更长时间才出现红色反应。(4)应用:本实验常与甲基红实验一起用,因为前者阳性的细菌,后者通常为阴性。[详细]
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- 库伯勒编码器原理特点参数下载一、库伯勒编码器简介库伯勒编码器如以信号原理来分可分为两者一般都应用于速度控制或位置控制系统的检测元件.库伯勒增量型编码器与库伯勒型编码器的区分按照工作原理编码器可分为库伯勒增量式和库伯勒式两类。库伯勒增量式编码器是将位移转换成周期性的电信号,再把这个电信号转变成计数脉冲,用脉冲的个数表示位移的大小。式编码器的每一个位置对应一个确定的数字码,因此它的示值只与测量的起始和终止位置有关,而与测量的中间过程无关。库伯勒旋转增量式编码器以转动时输出脉冲,通过计数设备来知道其位置,当编码器不动或停电时,依靠计数设备的内部记忆来记住位置。这样,当停电后,编码器不能有任何的移动,当来电工作时,编码器输出脉冲过程中,也不能有干扰而丢失脉冲,不然,计数设备记忆的零点就会偏移,而且这种偏移的量是无从知道的,只有错误的生产结果出现后才能知道。解决的方法是增加参考点,编码器每经过参考点,将参考位置修正进计数设备的记忆位置。在参考点以前,是不能保证位置的准确性的。为此,在工控中就有每次操作先找参考点,开机找零等方法。比如,打印机扫描仪的定位就是用的增量式编码器原理,每次开机,我们都能听到噼哩啪啦的一阵响,它在找参考零点,然后才工作。这样的方法对有些工控项目比较麻烦,甚至不允许开机找零(开机后就要知道准确位置),于是就有了库伯勒编码器的出现。库伯勒型旋转光电编码器,因其每一个位置**、抗干扰、无需掉电记忆,已经越来越广泛地应用于各种工业系统中的角度、长度测量和定位控制。库伯勒编码器光码盘上有许多道刻线,每道刻线依次以2线、4线、8线、16线。。。。。。编排,这样,在编码器的每一个位置,通过读取每道刻线的通、暗,获得一组从2的零次方到2的n-1次方的**的2进制编码(格雷码),这就称为n位编码器。这样的编码器是由码盘的机械位置决定的,它不受停电、干扰的影响。库伯勒旋转编码器/库伯勒增量或值编码器/库伯勒拉线编码器库伯勒编码器由机械位置决定的每个位置的**性,它无需记忆,无需找参考点,而且不用一直计数,什么时候需要知道位置,什么时候就去读取它的位置。这样,编码器的抗干扰特性、数据的可靠性大大提高了。由于库伯勒编码器在定位方面明显地优于增量式编码器,已经越来越多地应用于工控定位中。型编码器因其高精度,输出位数较多,如仍用并行输出,其每一位输出信号必须确保连接很好,对于较复杂工况还要隔离,连接电缆芯数多,由此带来诸多不便和降低可靠性,因此,编码器在多位数输出型,一般均选用串行输出或总线型输出,德国生产的型编码器串行输出Z常用的是SSI(同步串行输出)。二、库伯勒编码器工作原理由一个ZX有轴的光电码盘,其上有环形通、暗的刻线,有光电发射和接收器件读取,获得四组正弦波信号组合成A、B、C、D,每个正弦波相差90度相位差(相对于一个周波为360度),将C、D信号反向,叠加在A、B两相上,可增强稳定信号;另每转输出一个Z相脉冲以代表零位参考位。由于A、B两相相差90度,可通过比较A相在前还是B相在前,以判别编码器的正转与反转,通过零位脉冲,可获得编码器的零位参考位。编码器码盘的材料有玻璃、金属、塑料,玻璃码盘是在玻璃上沉积很薄的刻线,其热稳定性好,精度高,金属码盘直接以通和不通刻线,不易碎,但由于金属有一定的厚度,精度就有限制,其热稳定性就要比玻璃的差一个数量级,塑料码盘是经济型的,其成本低,但精度、热稳定性、寿命均要差一些。分辨率编码器以每旋转360度提供多少的通或暗刻线称为分辨率,也称解析分度、或直接称多少线,一般在每转分度5~10000线。三、库伯勒旋转编码器特点:库伯勒旋转编码器是集光机电技术于一体的速度位移传感器。当库伯勒旋转编码器轴带动光栅盘旋转时,经发光元件发出的光被光栅盘狭缝切割成断续光线,并被接收元件接收产生初始信号。该信号经后继电路处理后,输出脉冲或代码信号。其特点是体积小,重量轻,品种多,功能全,频响高,分辨能力高,力矩小,耗能低,性能稳定,可靠使用寿命长等特点。四、库伯勒编码器参数请看下载资料[详细]
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2018-11-16 10:02
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- ELISA原理(实验条件、技术要点)实验条件和技术要点:酶联免疫吸附测定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,简称ELISA)与免疫酶测定等名称所指的内容是不相同的,ELISA的内容专指固相吸附技术和免疫酶标抗体(或抗原)技术相结合的一种方法,它是将抗原或抗体包被在固相支持物(或称载体上),然后再进行免疫反应,形成酶标记的抗原抗体复合物,反应完毕,借助底物显示特异结合的标记抗体(或抗原)上的酶活性,用酶与底物反应后生成的有色产物进行光密度测定,达到抗原或抗体定量的目的。在应用ELISA时,首先要清楚下面内容:1,是检测抗体还是抗原?2,检测的结果是定性还是定量?3,是否需要检测特异抗体的类型?4,所用抗体/单克隆抗体的亲和力怎样?(1)检测抗原Z常用于检测抗原的方法是非竞争性的双抗体夹心法,其次是竞争法。但竞争法在具体实验中有些困难,特别是检测微生物的抗原,因为需要标记抗原,这对于某些抗原是很难做到的,甚至是不可能的。另外在竞争法中,酶标记的抗原与标本直接混合在一起,许多标本中含有酶YZ剂或蛋白A样物质,可影响ELISA的结果。(2)检测抗体检测抗体种类常用的方法是检测抗体种类的捕获法,这个方法常用于检测特异性IgG、IgA和IgM.。这个方法的**步是捕获所需要检测的一个种类的抗体,接下来是检测捕获的抗体是否是特异性抗原的抗体。间接ELISA在检测IgG时比较简单,但不适用于检测其他种类的抗体,因为血清中如果有特异IgG存在将与IgM或IgA等竞争结合抗原。竞争法检测抗体有两种方法:一种是将标记的抗体和标本同时加入反应孔内,但标记的抗体和标本中的抗体必须是结合抗原的不同决定簇;另一种是先加标本,冲洗后再加标记的抗体。竞争法检测抗体比间接法容易判断结果,并且比较敏感和特异。不论选择哪种方法,ELISA都包括6个步骤:1,抗原或抗体吸附于固相;2.加标本和试剂;3,孵育和冲洗;4,加酶标抗原或抗体;5,加适当的底物;6,检测和分析结果。虽然ELISA法在理论上十分简单,但每一步都有要注意的事项。不论是新设计的ELISA还是沿用其他ELISA方法都有以下几方面技术要点:固相载体的选择和试剂的制备,反应条件和操作的标准化。酶标记抗原竞争法利用混合的未标记抗原和酶标记抗原相互竞争抗体上的结合点,从而进行抗原的定量。未标记抗原的量越大,则酶标记抗原和抗体的结合就越受到YZ。但是竞争法在实验时比较复杂,有时在抗原混合液与相应抗体孵育后,在测定游离抗原与抗体相结合抗原的活性以前,要先进行盐析或有机溶剂沉淀或第二抗体沉淀等方法把两种不同存在形态的抗原分开。并且在加入底物后,容易产生血清色的物质。因此,每次测定时都需做空白对照。由于这些缺点,酶标记抗原竞争法使用不多。促销期间有精美礼品赠送还可以享受免费代测服务。您只需要把标本寄给我们,一星期左右就可以出实验数据。欢迎购买我公司的ELISA试剂盒,我们承诺试剂盒有质量问题包退包换。上海研谨生物公司对外承接RT-PCR技术服务、细胞培养技术服务、原位杂交技术服务、免疫沉淀技术服务、WesternBlotting技术服务、动物模型构建服务、SCI论文服务、PCR实验服务,并为广大科研用户提供各种高品质的试剂和服务,如细胞、血清、Elisa试剂盒、质粒提取试剂盒、DNA产物纯化试剂盒、病毒RNA提取试剂盒、PCR等产品,针对以上各项服务,我们均有具有丰富服务经验和深厚专业背景的人员团队为您提供技术服务和支持。[详细]
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2018-09-04 10:00
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NADH氧化酶酶联免疫分析实验原理
- 使用目的:本试剂盒用于测定微生物样本中NADH氧化酶含量。NADH氧化酶酶联免疫分析实验原理实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中NADH氧化酶水平。用纯化的NADH氧化酶抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入NADH氧化酶,再与HRP标记的NADH氧化酶抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的NADH氧化酶呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中NADH氧化酶浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(32pg/mL)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。NADH氧化酶酶联免疫分析实验原理操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。16pg/mL5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液8pg/mL4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液4pg/mL3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液2pg/mL2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液1pg/mL1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液?2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。NADH氧化酶酶联免疫分析实验原理注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-19 10:00
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鲑鱼补体蛋白3elisa试剂盒实验原理
- 使用目的:本试剂盒用于测定鲑鱼血清、血浆及相关液体样本中补体蛋白3(C3)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鲑鱼补体蛋白3(C3)水平。用纯化的鲑鱼补体蛋白3(C3)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入补体蛋白3(C3),再与HRP标记的补体蛋白3(C3)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的补体蛋白3(C3)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鲑鱼补体蛋白3(C3)浓度。[详细]
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2018-10-08 10:01
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白细胞介素1(IL-1)实验原理分析
- 白细胞介素1(IL-1)实验原理分析实验原理:广锐生物-国内高、优Elisa试剂盒供应商本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-1(IL-1)水平。用纯化的人白细胞介素-1(IL-1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-1(IL-1),再与HRP标记的白细胞介素-1(IL-1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-1(IL-1)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-1(IL-1)含量。白细胞介素1(IL-1)实验原理分析试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:180ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分2钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。[详细]
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2018-10-23 10:30
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人白介素12ELISA试剂盒实验原理
- 人白介素12(IL-12/P40)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒仅供研究使用,用于测定人血清,细胞上清及相关液体样本中白介素12(IL-12/P40)的含量。应用双抗体夹心法测定标本中人白介素12(IL-12/P40)水平。用纯化的人白介素12(IL-12/P40)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素12(IL-12/P40),再与HRP标记的白介素12(IL-12/P40)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素12(IL-12/P40)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白介素12(IL-12/P40)浓度。人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa试剂盒人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)酶联免疫分析试剂盒人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)elisa试剂盒人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)酶联免疫分析试剂盒人色素上皮衍生因子(PEDF)elisa试剂盒人色素上皮衍生因子(PEDF)酶联免疫分析试剂盒人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)elisa试剂盒人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)酶联免疫分析试剂盒人核因子?b(NF?b)elisa试剂盒 人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)elisa试剂盒人核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κBp65)酶联免疫分析试剂盒人脑红蛋白(NGB)elisa试剂盒人脑红蛋白(NGB)酶联免疫分析试剂盒人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)elisa试剂盒人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)酶联免疫分析试剂盒人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)elisa试剂盒人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)酶联免疫分析试剂盒人血清一氧化氮(NO)elisa试剂盒人血清一氧化氮(NO)酶联免疫分析试剂盒人超氧化物歧化酶(SOD)elisa试剂盒人超氧化物歧化酶(SOD)酶联免疫分析试剂盒人热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)elisa试剂盒人热休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)酶联免疫分析试剂盒人低氧诱导因子1α(HIF-1α)elisa试剂盒人低氧诱导因子1α(HIF-1α)酶联免疫分析试剂盒人黑色素细胞抗体(MCAb)elisa试剂盒人黑色素细胞抗体(MCAb)酶联免疫分析试剂盒人组织蛋白去乙酰化酶(HD)elisa试剂盒人组织蛋白去乙酰化酶(HD)酶联免疫分析试剂盒人甲基化酶(Methylase)elisa试剂盒人甲基化酶(Methylase)酶联免疫分析试剂盒人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)elisa试剂盒人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)酶联免疫分析试剂盒人αL岩藻糖苷酶(AFU)elisa试剂盒人αL岩藻糖苷酶(AFU)酶联免疫分析试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)elisa试剂盒人热休克蛋白90(HSP-90)酶联免疫分析试剂盒人热休克蛋白70(HSP-70)elisa试剂盒人热休克蛋白70(HSP-70)酶联免疫分析试剂盒人热休克蛋白40(HSP-40)elisa试剂盒人热休克蛋白40(HSP-40)酶联免疫分析试剂盒人热休克蛋白20(HSP-20)elisa试剂盒人热休克蛋白20(HSP-20)酶联免疫分析试剂盒人细胞周期素D3(Cyclin-D3)elisa试剂盒人细胞周期素D3(Cyclin-D3)酶联免疫分析试剂盒人细胞周期素D2(Cyclin-D2)elisa试剂盒人细胞周期素D2(Cyclin-D2)酶联免疫分析试剂盒人细胞周期素D1(Cyclin-D1)elisa试剂盒人细胞周期素D1(Cyclin-D1)酶联免疫分析试剂盒人凝溶胶蛋白(Gelsolin)elisa试剂盒人凝溶胶蛋白(Gelsolin)酶联免疫分析试剂盒人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)elisa试剂盒人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)酶联免疫分析试剂盒人前列腺酸性磷酸酶(PAP)elisa试剂盒人前列腺酸性磷酸酶(PAP)酶联免疫分析试剂盒人前列腺素D合成酶(PGDS)elisa试剂盒人前列腺素D合成酶(PGDS)酶联免疫分析试剂盒人胃蛋白酶原C(PG-C)elisa试剂盒人胃蛋白酶原C(PG-C)酶联免疫分析试剂盒人胃蛋白酶原A(PG-A)elisa试剂盒人胃蛋白酶原A(PG-A)酶联免疫分析试剂盒人组织多肽抗原(TPA)elisa试剂盒人组织多肽抗原(TPA)酶联免疫分析试剂盒人肺癌标志物elisa试剂盒人肺癌标志物酶联免疫分析试剂盒人胃癌标志物elisa试剂盒人胃癌标志物酶联免疫分析试剂盒人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)elisa试剂盒人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)酶联免疫分析试剂盒人癌标志物CA242elisa试剂盒人癌标志物CA242酶联免疫分析试剂盒人胃肠癌标志物CA199elisa试剂盒人胃肠癌标志物CA199酶联免疫分析试剂盒人乳腺癌标志物-CA153elisa试剂盒人乳腺癌标志物-CA153酶联免疫分析试剂盒人卵巢癌标志物CA125elisa试剂盒人卵巢癌标志物CA125酶联免疫分析试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa试剂盒人甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)酶联免疫分析试剂盒人游离前列腺特异性抗原(fPSA)elisa试剂盒人游离前列腺特异性抗原(fPSA)酶联免疫分析试剂盒人前列腺特异性抗原(PSA)elisa试剂盒人前列腺特异性抗原(PSA)酶联免疫分析试剂盒人癌胚抗原(CEA/CD66)elisa试剂盒人癌胚抗原(CEA/CD66)酶联免疫分析试剂盒人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)elisa试剂盒人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)酶联免疫分析试剂盒人肝脂酶(HL)elisa试剂盒人肝脂酶(HL)酶联免疫分析试剂盒人乙酰肝素酶(HPA)elisa试剂盒人乙酰肝素酶(HPA)酶联免疫分析试剂盒人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)elisa试剂盒人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)酶联免疫分析试剂盒人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)elisa试剂盒人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)酶联免疫分析试剂盒人低分子肝素(LMWH)elisa试剂盒人低分子肝素(LMWH)酶联免疫分析试剂盒人抗肝细胞膜抗体(LMA)elisa试剂盒人抗肝细胞膜抗体(LMA)酶联免疫分析试剂盒人抗肝肾微粒体抗体(LKM)elisa试剂盒人抗肝肾微粒体抗体(LKM)酶联免疫分析试剂盒人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体(HIT)elisa试剂盒人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体(HIT)酶联免疫分析试剂盒人抗可溶性肝抗原抗体(SLA)elisa试剂盒人抗可溶性肝抗原抗体(SLA)酶联免疫分析试剂盒人游离脂肪酸(FFA)elisa试剂盒人游离脂肪酸(FFA)酶联免疫分析试剂盒人颗粒酶B(Gzms-B)elisa试剂盒人颗粒酶B(Gzms-B)酶联免疫分析试剂盒人颗粒酶A(Gzms-A)elisa试剂盒人颗粒酶A(Gzms-A)酶联免疫分析试剂盒人丙二醛(MDA)elisa试剂盒人丙二醛(MDA)酶联免疫分析试剂盒人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)elisa试剂盒人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)酶联免疫分析试剂盒人透明质酸(HA)elisa试剂盒人透明质酸(HA)酶联免疫分析试剂盒人Ⅳ型胶原(ColⅣ)elisa试剂盒人Ⅳ型胶原(ColⅣ)酶联免疫分析试剂盒人Ⅲ型胶原(ColⅢ)elisa试剂盒人Ⅲ型胶原(ColⅢ)酶联免疫分析试剂盒人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)elisa试剂盒人基质金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)酶联免疫分析试剂盒人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)elisa试剂盒人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)酶联免疫分析试剂盒人丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)elisa试剂盒人丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)酶联免疫分析试剂盒人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)elisa试剂盒人天门冬氨酸转氨酶/谷草转氨酶(GOT/GPT)酶联免疫分析试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)elisa试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)酶联免疫分析试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)elisa试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗体(HBcAb-IgM)酶联免疫分析试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗体(HBcAb-IgG)elisa试剂盒人抗乙型肝炎病毒核心IgG抗体(HBcAb-IgG)酶联免疫分析试剂盒人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)elisa试剂盒人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)酶联免疫分析试剂盒人抗乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)elisa试剂盒人抗乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)酶联免疫分析试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMVIgM)elisa试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgM(anti-CMVIgM)酶联免疫分析试剂盒人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(anti-HAV)elisa试剂盒人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(anti-HAV)酶联免疫分析试剂盒人抗甲型肝炎病毒IgG抗体(anti-HAV)elisa试剂盒人抗甲型肝炎病毒IgG抗体(anti-HAV)酶联免疫分析试剂盒人抗弓形体IgM抗体(anti-toxIgM)elisa试剂盒人抗弓形体IgM抗体(anti-toxIgM)酶联免疫分析试剂盒人抗弓形体IgG抗体(anti-toxIgG)elisa试剂盒人抗弓形体IgG抗体(anti-toxIgG)酶联免疫分析试剂盒人抗丁型肝炎病毒抗体(anti-HDV)elisa试剂盒人抗丁型肝炎病毒抗体(anti-HDV)酶联免疫分析试剂盒人抗丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)elisa试剂盒人抗丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)酶联免疫分析试剂盒人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)elisa试剂盒人谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)酶联免疫分析试剂盒人谷胱甘肽(GSH)elisa试剂盒人谷胱甘肽(GSH)酶联免疫分析试剂盒人谷氨酸脱氢酶(GDH)elisa试剂盒人谷氨酸脱氢酶(GDH)酶联免疫分析试剂盒人抗平滑肌抗体(ASMA)elisa试剂盒人抗平滑肌抗体(ASMA)酶联免疫分析试剂盒人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)elisa试剂盒人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)酶联免疫分析试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgG(anti-CMVIgG)elisa试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgG(anti-CMVIgG)酶联免疫分析试剂盒人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)elisa试剂盒人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)酶联免疫分析试剂盒人α干扰素(IFN-α)elisa试剂盒人α干扰素(IFN-α)酶联免疫分析试剂盒人内毒素(ET)elisa试剂盒人内毒素(ET)酶联免疫分析试剂盒人内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)elisa试剂盒人内皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)酶联免疫分析试剂盒人细胞色素C(Cyt-C)elisa试剂盒人细胞色素C(Cyt-C)酶联免疫分析试剂盒人脂蛋白脂酶(LPL)elisa试剂盒人脂蛋白脂酶(LPL)酶联免疫分析试剂盒人内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)elisa试剂盒人内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)酶联免疫分析试剂盒人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBVpreS2Ab)elisa试剂盒人乙型肝炎病毒前S2抗体(HBVpreS2Ab)酶联免疫分析试剂盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)elisa试剂盒人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBVpreS2Ag)酶联免疫分析试剂盒人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)elisa试剂盒人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)酶联免疫分析试剂盒人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)elisa试剂盒人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)酶联免疫分析试剂盒人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)elisa试剂盒人输血传播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)酶联免疫分析试剂盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)elisa试剂盒人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)酶联免疫分析试剂盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)elisa试剂盒人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)酶联免疫分析试剂盒人丁型肝炎IgM(HDVIgM)elisa试剂盒人丁型肝炎IgM(HDVIgM)酶联免疫分析试剂盒人丁型肝炎IgG(HDVIgG)elisa试剂盒人丁型肝炎IgG(HDVIgG)酶联免疫分析试剂盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)elisa试剂盒人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)酶联免疫分析试剂盒人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)elisa试剂盒人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)酶联免疫分析试剂盒人单胺氧化酶(MAO)elisa试剂盒人单胺氧化酶(MAO)酶联免疫分析试剂盒人抗流行性出血热病毒抗体IgM(EHF)elisa试剂盒人抗流行性出血热病毒抗体IgM(EHF)酶联免疫分析试剂盒人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)elisa试剂盒人抗狂犬病毒抗体(anti-RV)酶联免疫分析试剂盒人抗副流感病毒IgM抗体(anti-PIVIgM)elisa试剂盒人抗副流感病毒IgM抗体(anti-PIVIgM)酶联免疫分析试剂盒人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RVIgG)elisa试剂盒人抗风疹病毒IgG抗体(anti-RVIgG)酶联免疫分析试剂盒人抗斑疹伤寒抗体(anti-typhus-Ab)elisa试剂盒人抗斑疹伤寒抗体(anti-typhus-Ab)酶联免疫分析试剂盒人抗EB病毒抗体(EBV)elisa试剂盒人抗EB病毒抗体(EBV)酶联免疫分析试剂盒人肺炎支原体抗体(MP-Ab)elisa试剂盒人肺炎支原体抗体(MP-Ab)酶联免疫分析试剂盒人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)elisa试剂盒人肺炎衣原体抗体(Cpn-Ab)酶联免疫分析试剂盒人单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)elisa试剂盒人单核细胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)酶联免疫分析试剂盒人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)elisa试剂盒人单纯疱疹病毒Ⅱ型抗体(HSVⅡ-Ab)酶联免疫分析试剂盒人腺相关病毒(AAV)elisa试剂盒人腺相关病毒(AAV)酶联免疫分析试剂盒人皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)elisa试剂盒人皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)酶联免疫分析试剂盒人细菌性阴道病(BV)elisa试剂盒人细菌性阴道病(BV)酶联免疫分析试剂盒人伤寒抗原(St-Ag)elisa试剂盒人伤寒抗原(St-Ag)酶联免疫分析试剂盒人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)elisa试剂盒人类嗜T淋巴细胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)酶联免疫分析试剂盒人麻疹病毒(MV)elisa试剂盒人麻疹病毒(MV)酶联免疫分析试剂盒人流行性腮腺炎(EP)elisa试剂盒人流行性腮腺炎(EP)酶联免疫分析试剂盒人抗流行性出血热病毒抗体IgG(EHF)elisa试剂盒人抗流行性出血热病毒抗体IgG(EHF)酶联免疫分析试剂盒人痢疾内阿米巴抗原elisa试剂盒人痢疾内阿米巴抗原酶联免疫分析试剂盒人莱姆IgG(Lyme-IgG)elisa试剂盒人莱姆IgG(Lyme-IgG)酶联免疫分析试剂盒人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)elisa试剂盒人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)酶联免疫分析试剂盒人副肿瘤性天疱疮抗体(PNP)elisa试剂盒人副肿瘤性天疱疮抗体(PNP)酶联免疫分析试剂盒人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)elisa试剂盒人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)酶联免疫分析试剂盒人脊髓灰质炎病毒IgG(PV-IgG)elisa试剂盒人脊髓灰质炎病毒IgG(PV-IgG)酶联免疫分析试剂盒人刚地弓形虫(T.gondii)elisa试剂盒人刚地弓形虫(T.gondii)酶联免疫分析试剂盒人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIVIgG)elisa试剂盒人抗副流感病毒IgG抗体(anti-PIVIgG)酶联免疫分析试剂盒人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RVIgM)elisa试剂盒人抗风疹病毒IgM抗体(anti-RVIgM)酶联免疫分析试剂盒人大疱性类天疱疮抗体(BP)elisa试剂盒人大疱性类天疱疮抗体(BP)酶联免疫分析试剂盒人肠病毒(Enterovirus)elisa试剂盒人肠病毒(Enterovirus)酶联免疫分析试剂盒人包虫抗体IgGelisa试剂盒人包虫抗体IgG酶联免疫分析试剂盒人百日咳毒素(PT)elisa试剂盒人百日咳毒素(PT)酶联免疫分析试剂盒人白色念珠菌(C.albicans)elisa试剂盒人白色念珠菌(C.albicans)酶联免疫分析试剂盒人冠状病毒(CoronavirusesIgG)elisa试剂盒人冠状病毒(CoronavirusesIgG)酶联免疫分析试剂盒人不耐热肠毒素B亚单位(LTB)elisa试剂盒人不耐热肠毒素B亚单位(LTB)酶联免疫分析试剂盒人血吸虫(schistosoma)elisa试剂盒人血吸虫(schistosoma)酶联免疫分析试剂盒人轮状病毒抗原(RVAg)elisa试剂盒人轮状病毒抗原(RVAg)酶联免疫分析试剂盒人军团菌抗原(LPAg)elisa试剂盒人军团菌抗原(LPAg)酶联免疫分析试剂盒人大肠菌素(colicin)elisa试剂盒人大肠菌素(colicin)酶联免疫分析试剂盒人腺病毒抗原(ADV-Ag)elisa试剂盒人腺病毒抗原(ADV-Ag)酶联免疫分析试剂盒[详细]
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2018-11-15 10:00
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ELISA实验原理、步骤、问题分析
- 上海恒远生物科技有限公司专业供应各种属elisa试剂盒,提供免费代测服务,保证实验结果客观真实性。我公司对试剂盒质量1**%保证,若存在质量问题,我们无条件包退换。若需要了解试剂盒的详细信息,请来的咨询:电话:021-6052049813636351217业务QQ:1005074258何经理ELISA实验原理、步骤、ELISA问题分析ELISA实验原理酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)原理1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高,故可极大地地放大反应效果,从而使测定方法达到很高的敏感度类型及步骤ELISA的主要常用类型及步骤1.间接法测抗体间接法是检测抗体常用的方法。其原理为利用酶标记的抗抗体(二抗)以检测与固相抗原结合的受检抗体,故称为间接法。操作步骤如下:1)将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原,洗涤除去未结合的抗原及杂质。2)加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上只留下特异性抗体,样本中的其他成份在洗涤过程中被洗去。3)加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。4)加底物显色。2.双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是检测抗原Z常用的方法,操作步骤如下:1)将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。2)加受检样本,保温反应。样本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。3)加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与样本中受检抗原的量相关。4)加底物显色。3.双抗原夹心法测抗体反应原理和模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物,以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体4.竞争法测抗原小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,Z后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。ELISAQ&A如何选择合适的阳性对照?阳性对照的基本组成应该尽量与检测样本的组成一致,一般阳性对照多以含蛋白保护剂的缓冲液为基质,加入一定量的待检物质。比如,以人血清为标本的测定,阳性对照多用确定的病人血清或者以复钙人血浆为原料加入一定量标准品。如何选择合适的阴性对照?阴性对照的基本组成也应该尽量与检测样本的组成一致,**先行检测确定其中不含待检物质。比如,检测人血清标本时,阴性对照应该选择正常人血清;检测免疫动物血清中抗体效价时,阴性对照应该选择该动物的免疫前血清。如何选择Zyou化的包被条件?1.包被抗原的选择包被抗原可分为天然蛋白、重组蛋白和小分子抗原三大类。天然蛋白需经纯化才能用直接吸附法包被,对于含杂质较多的抗原可以采用间接捕获法包被(先用能够与目的抗原反应的物质如抗体直接吸附在酶标板上,再通过特异性反应使抗原固相化)。经纯化的重组蛋白一般皆可直接包板。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有机化合物,由于分子量太小,往往难于直接吸附在酶标板上,一般都先使其与无关蛋白质如BSA等偶联,偶联物吸附于固相载体上。2.包被液的选择一般常用的是pH9.6的碳酸盐缓冲液,如果包被的抗原在碱性条件下不稳定的话,也可以使用pH7.2的磷酸盐缓冲液。3.包被温度的选择通常是4-8度条件下过夜或者37度保温2小时,我们强烈建议4-8度条件下包被,有利于蛋白活性的保持。4.包被浓度的选择包被的Z适浓度随固相载体和包被物的性质变化,一般蛋白质的包被浓度为1-5ug/ml,要明确针对特定包被抗原的Z适包被浓度需要通过实验来确定。包板后需要封闭吗?应该选择什么样的封闭体系?封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操作时洗涤彻底,不经封闭也可得到满意的结果。而在间接法测定中,封闭一般是必不可少的。常用的封闭剂有0.05%-0.5%的BSA、10%的小牛血清、1%明胶、5%的脱脂奶粉,AbMART推荐使用5%脱脂奶粉,价廉而且封闭能力强,不过5%脱脂奶粉只适合短期内使用,不宜长期保存,所以试剂盒中较少使用。如何正确使用酶结合物?1.酶结合物的稀释液在稀释液中常加入高浓度的无关蛋白质(例如1%BSA或5%脱脂奶粉),通过竞争YZ酶结合物在固相载体上的非特异性吸附。一般还加入能够YZ蛋白质吸附于塑料表面的非离子型表面活性剂,如吐温20(0.05%的浓度较为适宜)。2.正确稀释酶结合物酶结合物的合适工作浓度需要通过预实验来确定,浓度过高易导致本底偏高,浓度过低则会导致阳性信号的减弱。酶结合物**在使用前稀释,稀释后的酶结合物不宜长期保存,因为低浓度的酶结合物极易失活。问题可能的原因解决方法阴性对照产生了阳性的结果试剂或者耗材污染更换试剂,使用一次性耗材洗板出现问题更换更强配方的洗涤液,增加洗板次数,延长洗板时间如果是在双抗体夹心法中出现,有可能是包被抗体与二抗间有交叉反应更换包被抗体或二抗使用了过多的抗体减少抗体使用量整板出现高背景二抗产生了非特异性吸附减少二抗使用量,缩短二抗反应时间显色液不新鲜使用现配的显色液显色反应时间过长没有终止控制显色反应时间,及时终止反应试剂或者耗材污染更换试剂,使用一次性耗材反应温度过高导致的非特异性吸附严格控制反应在Z适温度下进行封闭条件不佳导致的非特异性吸附更换封闭能力更强的封闭液,延长封闭时间反应信号偏低包被条件不合适提高包板浓度,延长包板时间抗原抗体反应不够充分延长反应时间,确保反应在Z适温度下进行显色液配方不恰当增加显色底物的量二抗结合不够提高二抗浓度,延长反应时间,更换效果更好的二抗梯度稀释做ELISA时产生跳孔现象酶标板叠放导致传热不均匀,各孔反应温度有差异尽量避免酶标板叠放在一起移液器稀释时未能保持连续性定期校准移液器,确保移液器的正确使用反应溶液蒸发酶标板用封条密封或者加盖洗板不均匀确定洗板机能够正常工作酶标板底有杂物或者水珠读板时清理干净酶标板底部[详细]
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2018-11-16 10:02
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