大鼠肝细胞的分离

本文由 上海沪宇生物科技有限公司 整理汇编

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• 大鼠肝细胞的分离

  实验试剂钠60mg/kg链蛋白酶E灌注液含Ⅳ型胶原酶的灌注液Histodenz液RPMI1640液胎牛血清碘酒乙醇实验设备高速离心机平皿硅化三角烧瓶“0”号丝线针管一次性输液管恒温振荡器120目、300目钢网50ml聚丙烯离心管实验材料实验室大鼠实验步骤1.大鼠以3％钠60mg/kg麻醉后，依次碘酒、乙醇消毒；2.以十字型切口打开腹腔，暴露内脏，将肠管推向腹腔的左侧，暴露出下腔静脉和门静脉，首先游离出下腔静脉，将胆总管结扎。然后分离门静脉，将其分支一一结扎，并在门静脉的近端和远端分别预置“0”号丝线一根，用针管内预先吸有肝素的l8号套管针穿刺门静脉，退出针芯，见门静脉有回血后结扎固定，迅速接通灌注系统，并剪开下腔静脉建立流出道，以20ml/min的速率灌注预灌注液（37℃），同时将肝脏完整地分离下来，置入一平皿中；3.灌注约10min后，肝脏完全变为淡黄褐色，关闭预灌注液三通开关，以15ml／min速率灌注50ml（25mg）链蛋白酶E灌注液，然后再以15ml／min速率灌注含Ⅳ型胶原酶的灌注液（37℃）；4.将一根一次性输液管一端浸入培养皿液面以下，另一端插入胶原酶溶液瓶，建立胶原酶的循环灌注；5.20～25min后，当肝脏组织完全变软，撕去肝包膜，去除结缔组织，钝性粉碎肝组织制备细胞悬液；6.将细胞悬液倒入一预先装有100ml、37℃预热的振荡消化液硅化三角烧瓶中，将三角烧瓶放恒温振荡器中振荡消化30min（200r／min，37℃），振荡消化后的细胞悬液依次经120目、300目钢网过滤，收集于2个50ml聚丙烯离心管中；7.1700r／min离心5min（4℃），吸弃上清液。每管加入40mlRPMI1640液，反复吹打，使细胞充分悬浮；8.200r/min离心2min（20℃）2次，使细胞悬液中剩余的肝细胞沉淀，去除肝细胞；9.上清液l700r／min离心5min（4℃），沉淀肝的非实质细胞，吸弃上清液，用RPMI1640液1700r／min离心5min（4℃）再冲洗2～3次；10.将33％的Histodenz液以RPMI1640液稀释成为11％Histodenz液，加入l1％Histodenz液重悬细胞沉淀，反复轻柔吹打，使细胞充分悬浮；11.配制15％的Histodenz液，在10ml离心管的底部先小心地铺4ml15％的Histodenz，然后将l1％Histodenz细胞悬液小心地铺在15％的Histodenz液上，上面再小心地滴加一层无血清的RPMI1640细胞培养液。在这一过程中一定要避免各层液体混合；12.两离心管3000r／min离心30min（4℃），垂直位小心取下离心管，可以看到明显的细胞分层，将11％Histodenz液与15％Histodenz液交界面间的细胞仔细地吸出，用无血清RPMI1640液1700r／min离心5min（4℃）冲洗2次；13.培养：用含体积分数20％胎牛血清的RPMI1640培养液将细胞悬浮，移人培养瓶，于37℃、CO2体积分数为5％的培养箱中培养30min，计数，以1×106个／ml的浓度接种于新瓶中培养，24h后洗去未贴壁的细胞，即可获得纯化的大鼠肝细胞。[详细]

  2018-10-08 10:01

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• 大鼠肝细胞瘤

  大鼠肝细胞瘤[详细]

  2015-10-23 00:00

  课件

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• 大鼠肝细胞ELISA试剂盒

  大鼠肝细胞生长因子（HGF）酶联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肝细胞生长因子（HGF）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肝细胞生长因子（HGF）水平。用纯化的大鼠肝细胞生长因子（HGF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肝细胞生长因子（HGF），再与HRP标记的肝细胞生长因子（HGF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肝细胞生长因子（HGF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠肝细胞生长因子（HGF）浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-14 10:00

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• FH0403-大鼠肝细胞；BRL

  FH0403-大鼠肝细胞；BRL[详细]

  2024-05-30 09:33

  应用文章

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• FH1265-大鼠肝细胞；IAR20

  FH1265-大鼠肝细胞；IAR20[详细]

  2024-05-30 09:33

  应用文章

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• 大鼠肝细胞生长因子酶联免疫分析

  大鼠肝细胞生长因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T25ng/L-900ng/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肝细胞生长因子（HGF）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肝细胞生长因子（HGF）水平。用纯化的大鼠肝细胞生长因子（HGF）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肝细胞生长因子（HGF），再与HRP标记的肝细胞生长因子（HGF）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肝细胞生长因子（HGF）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠肝细胞生长因子（HGF）浓度。[详细]

  2018-10-03 10:00

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• 大鼠肝细胞生长因子（HGF）elisa试剂盒

  大鼠肝细胞生长因子（HGF）elisa试剂盒[详细]

  2015-11-21 00:00

  应用文章

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• 大鼠肝细胞生长因子（HGF）ELISA试剂盒

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com大鼠肝细胞生长因子（HGF）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠HGF单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的HGF与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠HGF，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，HGF浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中HGF浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：4.8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入0.3ml蒸馏水混匀，配成16000pg/ml的溶液。设标准管8管，每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入16000pg/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应HGF含量。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的HGF检测浓度小于60pg/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HGF。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于10％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:00

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• 大鼠肝细胞生长因子（HGF）酶联免疫检测

  大鼠肝细胞生长因子（HGF）酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理，来检测大鼠肝细胞生长因子（HGF），只能用于研究用途，不得用于医学诊断。用途：用于大鼠血清、血浆及相关液体样本中肝细胞生长因子（HGF）测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定样品中大鼠肝细胞生长因子（HGF）水平。向预先包被了大鼠肝细胞生长因子（HGF）单克隆抗体的酶标孔中加入大鼠肝细胞生长因子（HGF），温育；温育后，加入生物素标记的抗HGF抗体。再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入底物A、B，产生蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅与样品中大鼠肝细胞生长因子（HGF）的浓度呈正相关。试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品1280ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗HGF抗体0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1．37℃恒温箱。2．标准规格酶标仪。3．精密移液器及一次性吸头4．蒸馏水，5．一次性试管6．吸水纸注意事项1．从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差3．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.4．为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。5．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。6．底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法：甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内，浸泡1-2分钟。根据需要，重复此过程数次。自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。操作程序1.标准品的稀释：（本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。）640ng/L5号标准品120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液320ng/L4号标准品120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液160ng/L3号标准品120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液80ng/L2号标准品120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液40ng/L1号标准品120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液2.根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。3.加样：1）空白孔，空白对照孔不加样品，生物素标记的抗HGF抗体，链霉亲和素-HRP，只加显色剂A&B和终止液，其余各步操作相同；2）标准品孔：加入标准品50ul，链霉亲和素-HRP50ul（标准品中已事先整合好生物素抗体，故不加）；3）代测样品孔：加入样本40ul，然后各加入抗HGF抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul，盖上封板膜，轻轻震荡混匀，37℃温育60分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.显色：每孔先加入显色剂A50ul，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.7.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。8.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后10分钟以内进行。9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。操作程序总结：准备试剂，样品和标准品加入准备好的样品和标准品，生物素标记的二抗和酶标试剂，37℃反应60分钟洗板5次，加入显色液A、B，37℃显色15分钟加入终止液15分钟内读OD值计算检测范围：20ng/L→640ng/L。保存：2-8℃。有效期：6个月（2-8℃）。Rathepatocytegrowthfactor（HGF）ELISAKitInstructionThiskitisonlyforscientificresearch,andshallnotbeusedasaclinicaldiagnosisofuse.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofHGFconcentrationsinRatserum,cellculturesupernatant,andotherbiologicalfluids.PrincipleThekitassayRatHGFlevelinthesample，addRatHGFantibodytomicrotiterplatewells,afterIncubating,addBiotinylatedantiHGF-antibody,thenCombinedStreptavidin-HRP,becomecomplex,afterIncubatingandwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolor,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofHGFinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard：1280ng/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Streptavidin-HRP3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃BiotinylatedantiHGF-antibody0.5ml×1bottle1ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution（20ml×20fold）×1bottle（20ml×30fold）×1bottle2-8℃Materialsrequiredbutnotsupplied1.37℃incubator2.Standardmicroplatereader（450nm）3.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.4.deionizedwater.5.DisposableTesttube6AbsorbentpaperImportantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.3.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.4.UsenewdisposalplasticpipettetipsandClosureplatemembraneforeachstandard,inordertoavoidcrosscontamination.5.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:640ng/L5Standard120μlOriginaldensityStandard+120μlStandarddiluent320ng/L4Standard120μl5Standard+120μlStandarddiluent160ng/L3Standard120μl4Standard+120μlStandarddiluent80ng/L2Standard120μl3Standard+120μlStandarddiluent40ng/L1Standard120μl2Standard+120μlStandarddiluent2.accordingtestingSamplenumberstodefinehowmanywellsnedd,StandardandblanksuggestedDoholes.3.addsample：1）blankwells:（blankcomparisonwellsdon’taddsample,BiotinylatedantiHGF-antibodyandStreptavidin-HRP,othereachstepoperationissame）;2）Standardwells:addStandard50μlandStreptavidin-HRP50μl;3）testingSamplewells:addsample40μl,thenaddantiHGF-antibody10μl,Streptavidin-HRP50μl.closingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor60minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold（or20-fold）washsolutiondiluted30-fold（or20-fold）withdistilledwaterandreserve.5.washing：UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.color：AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃7.Stopthereaction：AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction（thebluecolorchangetoyellowcolor）.8.assay：takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin10min.9.CalculateofresultStepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,BiotinylatedandHRP,incubatefor60minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor15minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateAssayrange20ng/L→640ng/LStorageandvalidity1．Storage：2-8℃.2．validity：sixmonths.[详细]

  2018-09-21 10:01

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• 大鼠肝细胞生长因子ELISA试剂盒操作方法

  使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肝细胞生长因子（HGF）含量。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒

  大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-22 18:27

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• 大鼠肝细胞生长因子（HGF）ELISA试剂盒操作方法

  使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肝细胞生长因子（HGF）含量。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。800ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液400ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液200ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液100ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液50ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-10-01 10:00

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• 大鼠肝细胞色素P450酶联免疫分析试剂盒使用说明书

  大鼠肝细胞色素P450酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：96T0.2ng/L-10ng/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中肝细胞色素P450含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠肝细胞色素P450水平。用纯化的大鼠肝细胞色素P450抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肝细胞色素P450，再与HRP标记的肝细胞色素P450抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的肝细胞色素P450呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠肝细胞色素P450浓度。大鼠肝细胞色素P450酶联免疫分析试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。7.温育：操作同3。8.洗涤：操作同5。9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。大鼠肝细胞色素P450酶联免疫分析试剂盒操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。大鼠肝细胞色素P450酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-09-14 10:00

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• 利用iPSC衍生的肝细胞进行多参数高内涵肝细胞毒性检测

  细胞活性染料(例如 Calcein AM)可以用来检测活细胞中的化合物毒性。首先用各种化合物对肝细胞进行 72小时处理并染色。通过ImageXpress Micro 系统的 10倍物镜可以得到肝细胞的图像，然后我们用 MetaXpress 软件的 Multi-Wavelength Cell Scoring 应用模块对活细胞的整个核区域 (Hoechst 复染色)和细胞质区域(Calcein AM)进行分析([详细]

  2021-02-19 13:46

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• FH0080-人肝细胞；QSG-7701

  FH0080-人肝细胞；QSG-7701[详细]

  2024-05-30 09:33

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• FH0338-小鼠肝细胞；AML12

  FH0338-小鼠肝细胞；AML12[详细]

  2024-05-30 09:33

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• 人肝细胞生长因子ELISA检测

  人肝细胞生长因子ELISA检测本试剂仅供研究使用标本：血清人肝细胞生长因子ELISA检测二、注意事项此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。保存于2-8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟人肝细胞生长因子ELISA检测三、操作步骤每孔分别加入已稀释的样品、标准品各100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体，用应用洗涤液进行洗涤，每次停留30秒，在纸上拍干。重复操作5次。每孔加入酶标偶合液100ul。将板置于37℃温育30分钟。甩尽板中液体，用应用洗涤液进行洗涤，每次停留30秒，在纸上拍干。重复操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒温箱反应15分钟。8．每孔加终止液50ul，于450nm波长读O.D.值。人肝细胞生长因子ELISA检测四、结果判断仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。检测值范围：0800pg/ml敏感度：1.0pg/mlKLH血蓝蛋白抗体0.2mlKLH小鼠抗血蓝蛋白抗体0.2mlLamininalpha5层粘蛋白α5抗体0.1mlIntegrinβ3/CD61（Integrinbeta3）整合素β3抗体0.2mlJAK1（Tyrosine-proteinkinaseJAK1;Januskinase1）蛋白质酪氨酸激酶JAK-1抗体0.2mlJAK2（Tyrosine-proteinkinaseJAK2;Januskinase2;JAK-2）蛋白质酪氨酸激酶JAK-2抗体0.1mlJAK2（Tyrosine-proteinkinaseJAK2;Januskinase2;JAK-2）蛋白质酪氨酸激酶JAK-2抗体0.2mlphosphoJAK2（phospho-Tyr1007+Tyr1008）磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗体0.2mlJNK1/3（c-Junamino-terminalkinase1/3）c-Jun氨基末端激酶1/3抗体0.2mlJab1（c-Junactivationdomain-bindingprotein1）Jun激活区域-连接蛋白1抗体0.2mlphospho-JNK1/2/3（pThr183/pTyr185）抗磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗体0.2mlJNK1/2/3抗氨基末端激酶1/2/3抗体0.2mlKCNA5（Potassiumvoltage-gatedchannelsubfamilyAmember5）钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体0.2mlKi-67Ki-67Antigen抗体0.2mlKi-67（AntigenidentifiedbymonoclonalantibodyKi67）Ki67抗体0.1mlKif14protein驱动蛋白家族Member14蛋白抗体0.2mlKiss-1（Metastasis-suppressorKiSS-1precursor）肿瘤转移YZ基因抗体0.2mlKlf4（Kruppellikefactor4）肠道内富含的Kruppel样因子/上皮锌指蛋白4抗体0.2mlphospho-Klf5/CKLF/Kruppellikefactor5（pSer272）磷酸化肠道内富含的Kruppel样因子5抗体0.2mlKLF6（Kruppel-likefactor6）转染抑癌基因KLF6抗体0.2mlKLF13/RFLAT-1（Kruppellikefactor13）肠道内富含的Kruppel样因子130.2mlKLK1（Kallikrein1）激肽释放酶1抗体0.2mlκOR（kappaOpioidreceptor）kappa型受体抗体0.2mlKLK3（Kallikrein3）激肽释放酶3/舒血管素3抗体0.2mlRabbitIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350标记兔IgG（细胞流式同型对照）0.1mlMouseIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350标记小鼠IgG（细胞流式同型对照）0.1mlGoatIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350标记羊IgG（细胞流式同型对照）0.1mlKLK4（Kallikrein4）激肽释放酶4抗体0.2mlKLK7（Kallikrein7）激肽释放酶7抗体0.2mlKLK9（Kallikrein9）激肽释放酶9抗体0.2mlKLK10（Kallikrein10）激肽释放酶10抗体0.2mlKLK14（Kallikrein14）激肽释放酶14抗体0.2mlK-ras原癌基因K-ras抗体0.1mlK-ras原癌基因K-ras抗体0.2mlKu70（ATPdependentDNAhelicase2subunit1）DNA修复酶Ku70抗体0.1mlGoatanti-rabbitIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488标记山羊抗兔IgG（H+L）0.1mlGoatanti-mouseIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488标记山羊抗小鼠IgG（H+L）0.1mlRabbitanti-mouseIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488标记兔抗小鼠IgG（H+L）0.1mlGoatanti-humanIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488标记山羊抗人IgG0.1mlKu70（ATPdependentDNAhelicase2subunit1）DNA修复酶Ku70抗体0.2mlKu-80DNA修复酶Ku-80抗体0.2mlKv1.3/PCN3（PotassiumChannelKv1.3）离子通道蛋白Kv1.3抗体0.2mlKv3.3/Kcnc3（potassiumvoltagegatedchannel,Shaw-relatedsubfamily,member3）离子通道蛋白Kv3.3抗体0.2mlLAMA3/Laminin5alpha3（Lamininalpha3）层粘蛋白α3抗体0.2mlβ-lactoglobulin（bovine）牛β-乳球蛋白抗体0.2mlLAG-3/CD223（Lymphocyteactivationgene3）淋巴细胞活化基因-3抗体0.2mlLangerin/CD207/CLEC4K（C-typelectindomainfamily4memberK）白细胞分化抗原CD207抗体0.2mlGoatanti-bovineIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488标记羊抗牛IgG0.1mlGoatanti-bovIgM/AlexaFluor488AlexaFluor488标记羊抗牛IgM0.1mlGoatanti-chiIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488标记羊抗鸡IgG0.1mlGoatanti-humanIgA/AlexaFluor488AlexaFluor488标记羊抗人IgA0.1mlLAP18/stathmin（leukemiaassociatedprotein18）白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体0.2mlLAT/LAT1（LinkerforactivationofTcell1）T细胞活化连接蛋白0.2mlLAIR-1/CD305（Leukocyte-associatedimmunoglobulin-likereceptor1）白细胞相关免疫球蛋白样受体1抗体0.2mlLayilin透明质酸受体抗体0.2mlgoatanti-mouseIgG（beads）兔抗小鼠IgG免疫磁珠2mlLAIR-2/CD306（Leukocyte-associatedimmunoglobulin-likereceptor2）白细胞相关免疫球蛋白样受体2抗体0.2mlLCAT（lecithincholesterolacyltransferase）卵磷胆固醇酰基转移酶抗体0.2mlLDL-R（Low-densitylipoproteinreceptorprecursor）低密度脂蛋白受体抗体0.2mlox-LDL（oxidizedlowdensitylipoprotein）抗氧化低密度脂蛋白抗体0.2ml[详细]

  2018-09-14 10:01

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  FH0109-人肝细胞；HL-7702[L-02][详细]

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