人凝血酶(TM)酶联免疫检测
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人凝血酶(TM)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人凝血酶(TM),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中凝血酶(TM)测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人凝血酶(TM)水平。向预先包被了人凝血酶(TM)单克隆抗体的酶标孔中加入人凝血酶(TM),温育;温育后,加入生物素标记的抗TM抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅与样品中人凝血酶(TM)的浓度呈正相关。试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品1600U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗TM抗体0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。2.标准规格酶标仪。3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.4.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。5.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。6.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。操作程序1.标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)800U/L5号标准品120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液400U/L4号标准品120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液200U/L3号标准品120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液100U/L2号标准品120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液50U/L1号标准品120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液2.根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗TM抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);3)代测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗TM抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.7.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。8.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。操作程序总结:准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟内读OD值计算检测范围:30U/L→800U/L。保存:2-8℃。有效期:6个月(2-8℃)。HumanThrombin(TM)ELISAKitInstructionThiskitisonlyforscientificresearch,andshallnotbeusedasaclinicaldiagnosisofuse.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofTMconcentrationsinHumanserum,cellculturesupernatant,andotherbiologicalfluids.PrincipleThekitassayHumanTMlevelinthesample,addHumanTMantibodytomicrotiterplatewells,afterIncubating,addBiotinylatedantiTM-antibody,thenCombinedStreptavidin-HRP,becomecomplex,afterIncubatingandwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolor,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofTMinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard:1600U/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Streptavidin-HRP3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃BiotinylatedantiTM-antibody0.5ml×1bottle1ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution(20ml×20fold)×1bottle(20ml×30fold)×1bottle2-8℃Materialsrequiredbutnotsupplied1.37℃incubator2.Standardmicroplatereader(450nm)3.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.4.deionizedwater.5.DisposableTesttube6AbsorbentpaperImportantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.3.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.4.UsenewdisposalplasticpipettetipsandClosureplatemembraneforeachstandard,inordertoavoidcrosscontamination.5.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:800U/L5Standard120μlOriginaldensityStandard+120μlStandarddiluent400U/L4Standard120μl5Standard+120μlStandarddiluent200U/L3Standard120μl4Standard+120μlStandarddiluent100U/L2Standard120μl3Standard+120μlStandarddiluent50U/L1Standard120μl2Standard+120μlStandarddiluent2.accordingtestingSamplenumberstodefinehowmanywellsnedd,StandardandblanksuggestedDoholes.3.addsample:1)blankwells:(blankcomparisonwellsdon’taddsample,BiotinylatedantiTM-antibodyandStreptavidin-HRP,othereachstepoperationissame);2)Standardwells:addStandard50μlandStreptavidin-HRP50μl;3)testingSamplewells:addsample40μl,thenaddantiTM-antibody10μl,Streptavidin-HRP50μl.closingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor60minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃7.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).8.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin10min.9.CalculateofresultStepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,BiotinylatedandHRP,incubatefor60minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor15minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateAssayrange30U/L→800U/LStorageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths.
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人凝血酶(TM)酶联免疫检测
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人凝血酶(TM)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人凝血酶(TM),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中凝血酶(TM)测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人凝血酶(TM)水平。向预先包被了人凝血酶(TM)单克隆抗体的酶标孔中加入人凝血酶(TM),温育;温育后,加入生物素标记的抗TM抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅与样品中人凝血酶(TM)的浓度呈正相关。试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品1600U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗TM抗体0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。2.标准规格酶标仪。3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.4.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。5.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。6.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。操作程序1.标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)800U/L5号标准品120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液400U/L4号标准品120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液200U/L3号标准品120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液100U/L2号标准品120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液50U/L1号标准品120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液2.根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗TM抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);3)代测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗TM抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.7.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。8.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。操作程序总结:准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟内读OD值计算检测范围:30U/L→800U/L。保存:2-8℃。有效期:6个月(2-8℃)。HumanThrombin(TM)ELISAKitInstructionThiskitisonlyforscientificresearch,andshallnotbeusedasaclinicaldiagnosisofuse.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofTMconcentrationsinHumanserum,cellculturesupernatant,andotherbiologicalfluids.PrincipleThekitassayHumanTMlevelinthesample,addHumanTMantibodytomicrotiterplatewells,afterIncubating,addBiotinylatedantiTM-antibody,thenCombinedStreptavidin-HRP,becomecomplex,afterIncubatingandwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolor,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofTMinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard:1600U/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Streptavidin-HRP3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃BiotinylatedantiTM-antibody0.5ml×1bottle1ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution(20ml×20fold)×1bottle(20ml×30fold)×1bottle2-8℃Materialsrequiredbutnotsupplied1.37℃incubator2.Standardmicroplatereader(450nm)3.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.4.deionizedwater.5.DisposableTesttube6AbsorbentpaperImportantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.3.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.4.UsenewdisposalplasticpipettetipsandClosureplatemembraneforeachstandard,inordertoavoidcrosscontamination.5.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:800U/L5Standard120μlOriginaldensityStandard+120μlStandarddiluent400U/L4Standard120μl5Standard+120μlStandarddiluent200U/L3Standard120μl4Standard+120μlStandarddiluent100U/L2Standard120μl3Standard+120μlStandarddiluent50U/L1Standard120μl2Standard+120μlStandarddiluent2.accordingtestingSamplenumberstodefinehowmanywellsnedd,StandardandblanksuggestedDoholes.3.addsample:1)blankwells:(blankcomparisonwellsdon’taddsample,BiotinylatedantiTM-antibodyandStreptavidin-HRP,othereachstepoperationissame);2)Standardwells:addStandard50μlandStreptavidin-HRP50μl;3)testingSamplewells:addsample40μl,thenaddantiTM-antibody10μl,Streptavidin-HRP50μl.closingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor60minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃7.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).8.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin10min.9.CalculateofresultStepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,BiotinylatedandHRP,incubatefor60minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor15minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateAssayrange30U/L→800U/LStorageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths.[详细]
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2018-09-21 10:01
产品样册
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人凝血酶(TM)ELISA试剂盒
- 人凝血酶(TM)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-29 09:28
实验操作
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人凝血酶ELISA Kit
- 人凝血酶ELISA Kit[详细]
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2014-08-21 00:00
安装说明
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人凝血酶怎么制备
- 人凝血酶怎么制备[详细]
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2013-12-21 00:00
专利
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人凝血酶(Thrombin)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人凝血酶(Thrombin)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人Thrombin单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Thrombin与单抗结合,加入生物素化的抗人Thrombin,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Thrombin浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Thrombin浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):200IU/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆作1:10稀释(取20ul,加标本稀释液180ul,稀释10倍)。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成200IU/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200IU/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0IU/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应Thrombin含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的Thrombin检测浓度小于0.2IU/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人Thrombin。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于12%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
产品样册
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人凝血酶受体(TR)ELISA Kit说明书
- 人凝血酶受体(TR)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-21 00:00
报价单
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人凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒
- 人凝血酶/抗凝血酶复合体(TAT)ELISA试剂盒[详细]
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2024-09-18 18:09
标准
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人白细胞介素-6(IL-6)酶联免疫检测
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人白细胞介素-6(IL-6)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素-6(IL-6),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-6(IL-6)测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素-6(IL-6)水平。向预先包被了人白细胞介素-6(IL-6)单克隆抗体的酶标孔中加入人白细胞介素-6(IL-6),温育;温育后,加入生物素标记的抗IL-6抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅与样品中人白细胞介素-6(IL-6)的浓度呈正相关。试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品32ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗IL-6抗体0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。2.标准规格酶标仪。3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.4.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。5.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。6.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。操作程序1.标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)16ng/L5号标准品120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液8ng/L4号标准品120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液4ng/L3号标准品120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液2ng/L2号标准品120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液1ng/L1号标准品120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液2.根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗IL-6抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);3)代测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗IL-6抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.7.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。8.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。操作程序总结:准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟内读OD值计算检测范围:0.5ng/L→16ng/L。保存:2-8℃。有效期:6个月(2-8℃)。HumanInterleukin-6(IL-6)ELISAKitInstructionThiskitisonlyforscientificresearch,andshallnotbeusedasaclinicaldiagnosisofuse.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofIL-6concentrationsinHumanserum,cellculturesupernatant,andotherbiologicalfluids.PrincipleThekitassayHumanIL-6levelinthesample,addHumanIL-6antibodytomicrotiterplatewells,afterIncubating,addBiotinylatedantiIL-6-antibody,thenCombinedStreptavidin-HRP,becomecomplex,afterIncubatingandwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolor,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofIL-6inthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard:32ng/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Streptavidin-HRP3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃BiotinylatedantiIL-6-antibody0.5ml×1bottle1ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution(20ml×20fold)×1bottle(20ml×30fold)×1bottle2-8℃Materialsrequiredbutnotsupplied1.37℃incubator2.Standardmicroplatereader(450nm)3.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.4.deionizedwater.5.DisposableTesttube6AbsorbentpaperImportantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.3.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.4.UsenewdisposalplasticpipettetipsandClosureplatemembraneforeachstandard,inordertoavoidcrosscontamination.5.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:16ng/L5Standard120μlOriginaldensityStandard+120μlStandarddiluent8ng/L4Standard120μl5Standard+120μlStandarddiluent4ng/L3Standard120μl4Standard+120μlStandarddiluent2ng/L2Standard120μl3Standard+120μlStandarddiluent1ng/L1Standard120μl2Standard+120μlStandarddiluent2.accordingtestingSamplenumberstodefinehowmanywellsnedd,StandardandblanksuggestedDoholes.3.addsample:1)blankwells:(blankcomparisonwellsdon’taddsample,BiotinylatedantiIL-6-antibodyandStreptavidin-HRP,othereachstepoperationissame);2)Standardwells:addStandard50μlandStreptavidin-HRP50μl;3)testingSamplewells:addsample40μl,thenaddantiIL-6-antibody10μl,Streptavidin-HRP50μl.closingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor60minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold(or20-fold)washsolutiondiluted30-fold(or20-fold)withdistilledwaterandreserve.5.washing:UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.color:AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃7.Stopthereaction:AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction(thebluecolorchangetoyellowcolor).8.assay:takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin10min.9.CalculateofresultStepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,BiotinylatedandHRP,incubatefor60minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor15minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateAssayrange0.5ng/L→16ng/LStorageandvalidity1.Storage:2-8℃.2.validity:sixmonths.[详细]
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2018-09-21 10:01
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人白细胞介素1(IL-1)酶联免疫检测
- 人白细胞介素1(IL-1)酶联免疫检测试剂盒使用说明书使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素1(IL-1),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1(IL-1)的测定。工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素1(IL-1)水平。向预先包被了人白细胞介素1(IL-1)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素1(IL-1),温育;温育后,加入生物素标记的抗IL-1抗体。再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅与样品中人白细胞介素1(IL-1)的浓度呈正相关。试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:320ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗IL-1抗体0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。2.标准规格酶标仪。3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差3.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.4.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。5.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。6.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。洗板方法手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中标本要求1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。操作程序1.标准品的稀释:(本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。)160ng/L5号标准品120μl的原倍标准品加入120μl标准品稀释液80ng/L4号标准品120μl的5号标准品加入120μl标准品稀释液40ng/L3号标准品120μl的4号标准品加入120μl标准品稀释液20ng/L2号标准品120μl的3号标准品加入120μl标准品稀释液10ng/L1号标准品120μl的2号标准品加入120μl标准品稀释液2.根据代测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3.加样:1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗IL-1抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);3)代测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗IL-1抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.7.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。8.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。9.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。操作程序总结:准备试剂,样品和标准品加入准备好的样品和标准品,生物素标记的二抗和酶标试剂,37℃反应60分钟洗板5次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟加入终止液15分钟内读OD值计算检测范围:5ng/L→160ng/L。规格:96T/盒保存:2-8℃。有效期:6个月(2-8℃)。[详细]
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2018-09-21 10:01
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人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒
- 人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-06 00:00
专利
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大鼠血栓调节蛋白(TM)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒
- 大鼠血栓调节蛋白(TM)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中血栓调节蛋白(TM)的活性。上海乔羽生物科技有限公司ELISA试剂盒说明书关键词:ELISA试剂盒说明书、酶联免疫试剂盒、分析检测试剂盒实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠血栓调节蛋白(TM)水平。用纯化的大鼠血栓调节蛋白(TM)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入大鼠血栓调节蛋白(TM),再与HRP标记的血栓调节蛋白(TM)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的血栓调节蛋白(TM)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠血栓调节蛋白(TM)浓度。[详细]
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2018-11-09 10:00
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人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA Kit说明书
- 人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-21 00:00
标准
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人凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人凝血酶-抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TAT单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TAT与单抗结合,加入生物素化的抗人TAT,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,TAT浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中TAT浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):0.8ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。血清、血浆、细胞培养上清作1:100稀释(取10ul,加标本稀释液990ul,稀释100倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.2ml蒸馏水混匀,配成4000pg/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液200ul。在**管中加入4000pg/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出200ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品2000、1000、500、250、125、62.5、31.2、0pg/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应TAT含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的TAT检测浓度小于15pg/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人TAT。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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凝血酶Ⅲ ATHⅢ多抗
- 应用凝血酶ⅢATHⅢ多抗实验:试验验证过适用于Westernblotting实验、免疫组化实验(Immunohistochemistry)、ELISA实验。ATHⅢ多抗说明书,请打电话询要。乳腺癌相关抗原包装规格:0.1ml、0.2mlAnti-ATHⅢ:鼠源单抗、兔源多抗重要提示:凝血酶ⅢATHⅢ多抗避免重复冻融,专为科研实验使用。欢迎打电话咨询详情!人系统性红斑狼疮,elisa定量绵马贯众素ABBA原百部次碱营养琼脂对照培养基4-Hydroxy-3-(3-methy人抗肌内膜抗体IgA,elisa定量Methylpseudolarate人弹性蛋白,elisa定量二苄基乙二胺[详细]
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2018-11-05 10:00
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促销人白细胞介素28B酶联免疫检测范围
- 人白细胞介素28B(IL-28B)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T6ng/L-160ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素28B(IL-28B)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素28B(IL-28B)水平。用纯化的人白细胞介素28B(IL-28B)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素28B(IL-28B),再与HRP标记的白细胞介素28B(IL-28B)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素28B(IL-28B)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素28B(IL-28B)浓度。人白细胞介素28B(IL-28B)酶联免疫ELISA试剂盒组成30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶6ml×1瓶12孔×8条6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×1/瓶终止液6ml×1瓶0.5ml×1瓶1.5ml×1瓶1份2酶标试剂标准品(320ng/L)标准品稀释液3酶标包被板4样品稀释液5显色剂A液6显色剂B液10说明书11封板膜12密封袋2张1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。160ng/L80ng/L40ng/L20ng/L10ng/L5号标准品4号标准品3号标准品2号标准品1号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。人白细胞介素28B(IL-28B)酶联免疫ELISA试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫检测ELISA试剂盒
- 人试剂盒,人肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫检测ELISA试剂盒使用说明书国内权威的科研试剂供应商,乔羽生物专业经营进口分装和原装、国产的Elisa试剂盒,品质保证,技术严格,无效果退款退货。Elisakit规格:48孔配置/96孔配置酶标试剂:3ml×1瓶(48)/6ml×1瓶(96)本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆上海乔羽生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。试验原理:TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。[详细]
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2018-11-09 10:00
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人肺炎支原体抗体酶联免疫试剂盒检测方法
- 人肺炎支原体抗体(MP-Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书实验目的:用于测定人血清,血浆及相关液体样本中肺炎支原体抗体(MP-Ab)水平。实验原理:采用双抗原夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中人肺炎支原体抗体(MP-Ab)。用纯化的人肺炎支原体抗体(MP-Ab)抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中肺炎支原体抗体(MP-Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的肺炎支原体抗体(MP-Ab)抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人肺炎支原体抗体(MP-Ab)的存在与否。试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存[详细]
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2018-11-15 10:00
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人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人血栓调节蛋白(TM)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TM(Thrombomodulin)单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TM与单抗结合,加入生物素化的抗人TM,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,TM浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中TM浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):12ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成40ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入40ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应TM含量即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的TM检测浓度小于0.16ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人TM。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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猪凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒
- 猪凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA检测试剂盒[详细]
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2015-07-31 00:00
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人凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)ELISA试剂盒说明书
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com人凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人TSP-1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的TSP-1与单抗结合,加入生物素化的抗人TSP-1,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,TSP-1浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中TSP-1浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2500ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。正常标本测定前用标本稀释液作1:50稀释(取20ul,加标本稀释液980ul,稀释50倍)。2.标准品液配制:使用前加入0.5ml蒸馏水混匀,配成5000ng/ml的溶液。设标准管8管,**管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入5000ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应TSP-1含量,再乘上稀释倍数即可。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的TSP-1检测浓度小于4ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的人TSP-1。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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2018-09-13 10:01
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