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大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒
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大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒
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大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒
- 大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒[详细]
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2013-12-11 00:00
期刊论文
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大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒
- 电话:021-6533363955229872网址:http://www.westang.com大鼠透明质酸(HA)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠HA单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的HA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠HA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,Z后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,HA浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中HA浓度。试剂盒组成(2-8℃保存)酶标板(CoatedWells)96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate)12ml10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):2000ng/瓶2瓶底物工作液(TMBSolution)12ml**抗体工作液(BiotinylatedAntibody)12ml终止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,避免反复冻融。2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成2000ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在**管中加入2000ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板:同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板:同前。7.每孔加入底物工作液100ul,置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品1000、500、250、125、62.5、31、15.6、0ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应HA含量。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的HA检测浓度小于9ng/ml。2.特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HA。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。3.重复性:板内、板见变异系数均小于10%。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断![详细]
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现货促销人透明质酸ELISA检测试剂盒说明书
- 本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:HA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知HA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将HA和生物素标记的抗体同时温育。人透明质酸ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中HA的浓度呈比例关系。自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。人透明质酸ELISA检测试剂盒每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度:Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性:不与人其它细胞因子反应。3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的HA标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的HA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/mlRC080-5ugRecombinantHumanMIP-3alpha/CCL20(rHuMIP-3a/CCL20)5ugRC081-2ugRecombinantMurineSDF-1beta/CXCL12(rMuCXCL12)2ugRC082-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-34(rHuPTH1-34)重组激素100ugRC083-100ugRecombinantHuman人透明质酸ELISA检测试剂盒ParathyroidHormone7-34(rHuPTH7-34)重组激素100ugRC084-100ugRecombinantHumanParathyroidHormone1-84(rHuPTH1-84)重组激素100ugRC085-5ugRecombinantMurineGM-CSF重组鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子5ugCLS1077-200ml细胞分离液1.077200mlCLS1077-1-200ml细胞分离液1.077(FICOLL配置)200ml[详细]
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2018-09-19 10:00
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- 人(HABP)说明书,人透明质酸结合蛋白Elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人透明质酸结合蛋白(HABP)水平。用纯化的人透明质酸结合蛋白(HABP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入透明质酸结合蛋白(HABP),再与HRP标记的透明质酸结合蛋白(HABP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的透明质酸结合蛋白(HABP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人透明质酸结合蛋白(HABP)浓度。人(HABP)说明书,人透明质酸结合蛋白Elisa试剂盒酶标包被板1×481×96标准品:135ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶人(HABP)说明书,人透明质酸结合蛋白Elisa试剂盒5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。人(HABP)说明书,人透明质酸结合蛋白Elisa试剂盒HumanReceptorⅡfortheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRⅡELISAKit96T/48T,Monkeybrainnatriureticpeptide,BNPELISAKit96T/48T,氧氟沙星纸片(泰利必妥)(氟嗪酸),20片培养基氧氟沙星纸片(泰利必妥)(氟嗪酸)价格Mouseperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISAKit96T/48T,BovineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit96T/48T,小鼠胃蛋白酶检测原理(Pepsin)夹心ELISA检测试剂盒人抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素检测原理(ADH/VP/AVP)ELISA试剂盒步骤HumanPlateletassociatedantibody,PA-IgMELISAKit96T/48T,MouseComplement4,C4ELISAKit96T/48T,HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit96T/48T,MouseCorticosterone,CORTELISAKit96T/48T,HumaninterferonRegulatoryFactor,IRFELISAKit96T/48T,Humansignalrecognizationparticleantibody,SRPELISAKit96T/48T,MouseThrombopoietin,TPOELISAkit96T/48T,[详细]
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2018-10-23 10:30
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- 大鼠神经生长因子-beta(b-NGF)ELISA试剂盒-大鼠ELISA试剂盒中文名称:大鼠神经生长因子-beta(b-NGF)ELISA试剂盒ELISA试剂盒价格:欢迎来电咨询报价及索取详细说明书规格:96T/48T库存:现货保质期:6个月用途:科研实验等领域科学研究标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等注:标本必须为液体,不含沉淀。【试剂盒样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的YZ剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。5、本试剂盒定量范围为12.5-400ng/L,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(12.5-400ng/L范围内),乘以总稀释倍数即为样本Z终浓度。6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。[详细]
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2018-09-27 10:00
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