血液对氧磷酶1有机磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

本文由 上海科学仪器有限公司 整理汇编

2018-11-18 10:00 920阅读次数

收藏 评价 举报

• 分享

立即下载

参与评论

评论

登录后参与评论

登录

获取验证码

我已经阅读并接受《仪器网服务协议》

立即登录

更多资料

• 血液对氧磷酶1有机磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

  主要用途HL血液对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过对氧磷酶1反应系统中，水解有机磷酸，释放出对硝基苯产物，出现吸光峰值的变化，即采用比色法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体血液样品（血浆、血清等）对氧磷酶1的有机磷酸酶活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。保存方式保存HL底物液（ReaHLntB）在－20℃冰箱里；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品保存的容器（微型）台式离心机：用于样品制备比色皿或96孔板：用于比色的容器分光光度仪或酶标仪：用于比色分析[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 血液对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  血液对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-02-28 00:00

  标准

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性定量试剂盒说明书

  主要用途组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过对氧磷酶1反应系统中，水解有机磷酸，释放出对硝基苯产物，出现吸光峰值的变化，即采用光度法来测定组织样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体组织裂解悬液样品对氧磷酶1的有机磷酸酶活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景对氧磷酶（parapxonase；PON；EC3.1.8.1）是一种水解酯类（esters）、有机磷酸酯（organophosphate）和内酯（lactone）的多态性酶，分成三个亚型：PON1、PON2、PON3。结构同源性在基因层面上达70%，在氨基酸层面上达65%。其中PON1，为钙离子依赖性和高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein；HDL）相关性糖蛋白，含有354氨基酸，43Kd分子量，分布在肝脏、肾脏、小肠和血清（50毫克/升）中。具有有机磷酸酶（organophosphtase）、磷酸三酯酶（phosphotriesterase）、芳香酯酶（arylesterase）和硫内酯酶（thiolactonase）等多重活性：PON1与HDL结合，水解各种LDL和HDL上的氧化性磷酯，以及芳香族羧酸酯、芳香族和脂肪族内酯等，例如杀虫剂对硫磷（parathion）降解产物对氧磷（paraoxon）、毒死蜱（chlorpyriphos）、神经毒因子*（sarin）和*（soman）、同型半胱氨酸（homocysteine）硫内酯、二氢香豆素（dihydrocourmarin；DHC）、γ-丁内酯（γ-butyrolactone）等，延缓和YZ低密度脂蛋白（lowdensitylipoprotein；LDL）氧化作用，阻止脂质过氧化物产生，保护脂蛋白以及质膜受到氧化损伤，达到抗粥样硬化（antiatherogenic）、、抗氧化的功能。PON1活性降低与慢性肾衰、糖尿病、外周神经病变、家属性高胆固醇血症、心血管疾病、肝纤维化等有关。PON2为44Kd分子量，分布在脑、肝脏、肺、肾脏、睾丸等大多数组织中，但血清中测不到。PON2具有水解芳香酯和内酯酶的功能，但不能水解有机磷酸。具有细胞内抗氧化作用，预防粥样硬化等功能。PON3为40Kd分子量，主要分布在肝脏中，少量在肾脏中。主要水解各种内酯和环状羧酸酯，具有抗氧化功能。基于人工合成底物对硝基苯磷酸二乙酯（diethyl-p-nitrophenylphosphate），在对氧磷酶1的作用下，水解产生对硝基苯（p-nitrophenol）和磷酸二乙酯（diethylphosphate），通过对硝基苯产物吸收峰值的变化（405nm波长），来定量分析对氧磷酶1的有机磷酸酶活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-08 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量检测

  要用途细胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ剂存在下，受到PP1去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品包括免疫沉淀复合物和粗提或部分纯化酶样品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又称为1型蛋白丝/苏氨酸磷酸化酶，是7个主要丝/苏氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成员之一，从酵母到人类高度进化保留。其参与调节多种重要的细胞生理功能，包括糖原代谢、细胞分裂、肌肉收缩、信号传导、神经元功能、转录、翻译等，以及与HIV-1转录过程的调节，并且与老年性痴呆等多种疾病密切相关。PP1分子结构表面的3个凹槽及β12-β13Loop环结构，是底物与YZ剂的结合部位；其催化亚体为37kd，调节亚体有2种：目标亚体和YZ亚体。基于特异性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ剂福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情况下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，释放出游离磷酸根，与孔雀绿（malachitegreen）染料发生显色反应后，在分光光度仪下（660nm波长）产生峰值的变化，由此测定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特异活性。[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  Ca-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下，ATP酶受到损伤，活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。产品内容缓冲液（ReagentA）6毫升反应液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升阴性液（ReagentD）6毫升标准品（reagentE）6微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应液配制的容器微型台式离心机：用于样品制备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析酶标仪：用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一：血浆样品1．准备好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取2毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为5000g5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择三：组织样本准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品，置于冰槽里2.设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm三、样本测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔2．分别移取50微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．设定标准品孔(加入50微升标准品），样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液（ReagentD）4．分别加入50微升反应液（ReagentB）5．轻轻摇动96孔酶标板6．在37℃温度下孵育2分钟7．放进酶标仪，置零8．取出酶标板，分别加入50微升底物液（ReagentC）9．轻轻摇动酶标板10．即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和5分钟读数）四，样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]

  2024-09-29 05:34

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 植物碱性焦磷酸酶活性比色法法定量检测试剂盒

  主要用途植物碱性焦磷酸酶（AlkalinePyrophosphatase）活性比色法法定量检测试剂是一种旨在使用无机焦磷酸，在碱性焦磷酸酶去磷酸化后，释放出游离磷酸根，由硫酸亚铁氨还原产生钼蓝显色反应后峰值的变化，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种植物组织，包括种子、球茎（bulb）、块茎（tuber）、根（root）、种叶（coleoptile）和叶片裂解悬液样品或纯化以及粗提的酶蛋白的碱性焦磷酸酶活性及其YZ剂的检测。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景焦磷酸酶（Pyrophosphatase；PPase；；EC3.6.1.1），又称为无机焦磷酸酶（inorganicpyrophosphatase），属于磷酸酶家族，包括磷酸单酯酶（phosphomonoesterase）、磷酸二酯酶（phosphodiesterase）等。通过释放磷酸根，参与DNA合成、RNA合成、辅酶合成、钙吸收、骨形成、氨基酸合成和脂肪酸代谢的激活等代谢活动。焦磷酸酶分为碱性和酸性，前者作用于合成代谢，而后者作用于分解反应。焦磷酸酶催化无机焦磷酸水解产生2个磷酸根离子的反应，为能量释放反应（exergonicreaction）。在植物中，尤其碳4或碳3植物的叶片中，活性Z高。在固碳还原和光合作用起着重要作用成为碳4植物通路的指标。基于底物无机焦磷酸，在碱性条件下，受到碱性焦磷酸酶的去磷酸化作用，释放出游离磷酸根，由硫酸亚铁氨还原产生钼蓝显色反应后，在分光光度仪下（660nm波长）产生峰值的变化，由此测定碱性焦磷酸酶的活性。[详细]

  2018-11-08 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书

  Na~+-K~+-ATP酶活性比色法定量检测试剂盒说明书主要用途ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，机体在缺氧及等状态下，ATP酶受到损伤，活力下降。ATP酶活力的大小是各种细胞能量代谢及功能有无损伤的重要指标。本测试盒可测钠钾ATP酶、钙镁ATP酶的活性。样品为各种组织及红细胞等，本法的Zda特点是样品前处理不需要高速离心机，方法简便、快速。产品内容缓冲液（ReagentA）6毫升反应液（ReagentB）6毫升底物液（ReagentC）6毫升阴性液（ReagentD）6毫升标准品（reagentE）6微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；底物液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于反应液配制的容器微型台式离心机：用于样品制备比色皿或酶标板：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析酶标仪：用于微量样品比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的反应液（ReagentB）和底物液（ReagentC）置入冰槽里融化。底物液（ReagentC）避免光照。然后进行下列操作。样品准备选择一：血浆样品1．准备好ACD抗凝管（注意：避免使用肝素或EDTA抗凝管）2．抽取2毫升血液，置于抗凝管里3．放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g4．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血浆成分（注意：避免触碰白色液体层）5．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存6．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择二：血清样品1．准备好不含抗凝剂的储存管2．抽取2毫升血液，置于储存管里3．室温下，静置30分钟，直至血液凝结4．放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为5000g5．小心移取上层黄色液体到新的1.5毫升离心管――此为血清成分（注意：避免触碰白色液体层）6．即刻置于冰槽里备用或放进－70℃冰箱里保存7．（选择步骤）移取50微升进行蛋白定量测定选择三：组织样本准确称取组织重量，按照重量（g）：体积（ml）=1:9的比例，加入9倍的是PBS或者生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，去上清液待测。二、测定准备1.准备好上述待测样品，置于冰槽里2.设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm三、样本测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：背景对照，标准品孔和样品孔2．分别移取50微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．设定标准品孔(加入50微升标准品），样本孔(加入50微升样本)阴性液孔(加入50微升阴性液（ReagentD）4．分别加入50微升反应液（ReagentB）5．轻轻摇动96孔酶标板6．在37℃温度下孵育2分钟7．放进酶标仪，置零8．取出酶标板，分别加入50微升底物液（ReagentC）9．轻轻摇动酶标板10．即刻放进酶标仪检测，包括（0分钟初始读数和5分钟读数）四，样本计算样本活性=样本OD值/标准OD值*标品浓度[详细]

  2024-09-29 11:52

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒产品说明书

  细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性合成底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3），在PTEN去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品的PTEN活性及其YZ剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景细胞张力蛋白同源在10号染色体缺失性磷酸酶（phosphataseandtensinhomologdeletedonchromosometen；PTEN；EC3.1.3.67），又称为多发性晚期肿瘤突变基因1（mutatedinmultipleadvancedcancers1；MMAC1），是一个肿瘤YZ基因，位于染色体10q23.3，转录产物515kb，蛋白产物175氨基酸。PTEN蛋白含有一酪蛋白磷酸酶的功能区和约175个氨基酸左右的与骨架蛋白张力蛋白（tenasin）、辅助蛋白（auxilin）同源的区域，是一种双重特异性磷酸酶，能使酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、磷酯酰肌醇（phosphoinositide）等去磷酸化。PTEN具有调节细胞周期、防止细胞过度生长和分开裂解、参与细胞凋亡、粘附、迁移、浸润，控制细胞内磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate；PIP3）水平，调控Akt/PKB信号通路等功能。PTEN基因突变和缺失将导致肿瘤发生、发展和转移，以及多发性错构瘤综合征（Cowdensyndrome）等。基于底物磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸，在PTEN的催化下，水解产生磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸（PIP2），同时释放出游离磷酸根，进而与孔雀绿染料发生显色反应产生其峰值的变化（660nm波长），以此测算PTEN的活性。产品内容清理液（ReagentA）120毫升裂解液（ReagentB）10毫升缓冲液（ReagentC）1毫升阴性液（ReagentD）1毫升反应液（ReagentE）200微升终止液（ReagentF）1毫升显色液（ReagentG）4毫升标准液（ReagentH）500微升产品说明书1份保存方式保存裂解液（ReagentB）、缓冲液（ReagentC）、反应液（ReagentE）和显色液（ReagentG）在－20℃冰箱里，避免反复冻融；其余的保存在4℃冰箱里；终止液（ReagentF）和显色液（ReagentG）具有腐蚀性，避免直接用手接触；显色液（ReagentG）避免光照，有效保证6月用户自备15毫升离心管：用于样品处理的容器1.5毫升离心管：用于样品处理和保存的容器细胞刮脱棒：用于贴壁细胞脱离（微型）台式离心机：用于样品收集培养箱：用于孵育反应物比色皿：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液放进冰槽里融化。然后进行下列操作。样品准备准备好25cm2细胞培养瓶或60mm细胞培养皿的待测培养细胞（5X106细胞）小心加入3毫升预冷的清理液（ReagentA），覆盖生长表面小心抽去清理液使用细胞刮脱棒轻柔刮脱细胞加入3毫升清理液（ReagentA），混匀细胞移入到预冷的15毫升锥形离心管（注意：悬浮细胞从这一步骤开始）放进4℃台式离心机离心5分钟，速度为300g小心抽去上清液加入500微升裂解液（ReagentB），充分混匀转移到预冷的1.5毫升离心管QL涡旋震荡15秒置于冰槽里孵育30分钟放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取2微升进行蛋白定量测定（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HL30030.1）即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作二、测定准备准备好待测样品（例如细胞裂解萃取液等），置于冰槽里（注意：样品须澄清）设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为660nm，并置零准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管按下表分别加入阴性液（ReagentD）和标准液（ReagentH）到每个离心管，混匀将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表管号阴性液（ReagentD）标准液（ReagentH）测定体系标准磷浓度10100微升20微摩尔/升225微升75微升15微摩尔/升350微升50微升10微摩尔/升475微升25微升5微摩尔/升5100微升00标准曲线测定移取20微升阴性液（ReagentD）到新的比色皿加入5微升上述配制的标准液在37℃温度下孵育10分钟加入8微升终止液（ReagentF），混匀加入100微升显色液（ReagentG），混匀室温下静置15分钟，避免光照即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数重复实验步骤1至7四次构建标准曲线：纵座标（Y轴）为吸光单位（A）；横座标（X轴）为标准磷浓度（微摩尔/升）样品背景测定移取20微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待测样品（总量100微克细胞裂解萃取液蛋白）在37℃温度下孵育10分钟加入8微升终止液（ReagentF），混匀加入100微升显色液（ReagentG），混匀室温下静置15分钟，避免光照即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数根据标准曲线获得样品背景对应磷浓度样品活性测定移取10微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入5微升待测样品（总量100微克细胞裂解萃取液蛋白）在37℃温度下孵育2分钟加入10微升反应液（ReagentE）在37℃温度下孵育10分钟加入8微升终止液（ReagentF），混匀加入100微升显色液（ReagentG），混匀室温下静置15分钟，避免光照即刻放进分光光度仪检测：获得吸光读数根据标准曲线获得样品活性对应磷浓度计算样品活性{[根据标准曲线获得样品活性对应磷浓度（微摩尔/升）根据标准曲线获得样品背景对应磷浓度（微摩尔/升）]X5（体系倍数）X样品稀释倍数}÷10（反应时间；分钟）＝纳摩尔磷/毫升/分钟÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝纳摩尔磷/毫克/分钟注意事项本产品为25次操作，包括5次标准测定操作时，避免污染母液操作时，须戴手套终止液（ReagentF）和显色液（ReagentG）具有腐蚀性，避免直接用手接触样品切忌使用磷酸缓冲液和脱氧胆酸纳处理比色测定后，比色皿须清洗彻底如果用户没有660nm波长，可以使用600至660nm的任一波长替代显示绿色表明具有较强酶活性空白对照读数应小于0.2建议待测样本蛋白浓度为100微克/5微升；如果样本酶活性过低或过高，则可以增加或降低样本量；（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－HL30030.1）钙调神经磷酸酶活性单位浓度定义：在37℃温度下，pH8.0的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）释放1微摩尔的磷本公司提供系列磷酸化酶检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测准确[详细]

  2018-11-19 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 血液总脂肪酶（lipase）活性比色法定量检测

  主要用途血液总脂肪酶（lipase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物三丁酸二巯基丙醇受到脂肪酶水解，释放出巯基基团，使用Ellman试剂，产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体血液样品（血浆、血清等）样品脂肪酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景脂肪酶（lipase；EC3.1.1.3）是可溶性糖蛋白分子，催化不溶性脂质分子的酯键（esterbond）的水解。在人体中，其来源于产生。在消化系统中，脂肪酶（Lipase），裂解脂肪分子，例如甘油三酯（triglyceride；TAG），产生1个分子甘油（glycerol）和3个分子游离脂肪酸分子（fattyacid）。脂肪酶异常与炎、管阻塞、癌、肾病、唾液腺炎症、肠道阻塞等相关；异常降低则与中脂肪酶产生细胞的性损伤有关。脂肪酶的活性检测是临床诊断的指标之一。基于脂肪酶在水分子的参与下，催化三丁酸二巯基丙醇（dimercaptopropanoltributyrate；DMPTB或BALB）的水解，产生二巯基丙醇（dimercaptopropanol；DMP），并释放出巯基基团（－SH），进而与Ellman试剂5，5-二硫基-双（2-硝基苯甲酸）[5，5’-dithiobis-（2-nitrobenzoicacid）；DTNB]反应后，产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸（5-thio-2-nitrobenzoicacid；TNB），通过其吸收峰值的变化（412nm波长），来定量分析脂肪酶的活性。脂肪酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 组织酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途组织酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后，产生多巴色素，呈现吸光峰值的变化，即采用比色法来测定组织裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物组织，尤其是皮肤、眼睛和黑色素瘤组织裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测，以及YZ剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一种单酚单加氧酶（monophenolmonooxygenase），又称为单酚酶（monophenolase）或单酚二羟基苯丙氨酸：O2氧化还原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有双功能的含铜糖蛋白，广泛存在于植物、酵母和动物组织中，其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白，而催化结构域在黑色素细胞（melanocyte）或色素细胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羟基化（o-hydroxylation）反应变成L-多巴（L-dopamine），进而氧化产生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），从而由多巴色素（dopachrome）转化为黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性，严重时，会引起色素沉着（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病（oculocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，产生多巴色素，通过其吸光值的变化（475nm波长），来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途细胞酪氨酸酶（tyrosinase）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过酪氨酸酶反应系统中底物酪氨酸氧化后，产生多巴色素，呈现吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解悬液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种人体和动物细胞，尤其是黑色素细胞和黑色素瘤细胞裂解悬液样品中酪氨酸酶的活性检测，以及YZ剂筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景酪氨酸酶（tyrosinase；EC1.14.18.1）是一种单酚单加氧酶（monophenolmonooxygenase），又称为单酚酶（monophenolase）或单酚二羟基苯丙氨酸：O2氧化还原酶（monophenoldihydroxyphenylalanin：O2oxidoreductase），具有双功能的含铜糖蛋白，广泛存在于植物、酵母和动物组织中，其蛋白结构、大小、糖基化方式、激活特征等都不同。人体酪氨酸酶是一个跨膜蛋白，而催化结构域在黑色素细胞（melanocyte）或色素细胞的黑色素器（melanosome）里。酪氨酸酶通过催化L-酪氨酸（L-tyrosine）等的o-羟基化（o-hydroxylation）反应变成L-多巴（L-dopamine），进而氧化产生黑色素底物多巴醌（dopaquinone），从而由多巴色素（dopachrome）转化为黑色素（melanin）中的真黑素（eumelanin），以及其它色素，包括毛发和眼睛色素。紫外线可以激活酪氨酸酶活性，严重时，会引起色素沉着（hyperpigmentation）。酪氨酸酶基因突变将导致I型眼皮肤白化病（oculocutaneousalbinism）。酪氨酸酶YZ剂成为增白化妆品的重要元素。基于底物酪氨酸，在酪氨酸酶的催化下，产生多巴色素，通过其吸光值的变化（475nm波长），来定量测定酪氨酸酶的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 血液总脂肪酶（lipase）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  血液总脂肪酶（lipase）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-03-30 00:00

  实验操作

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 组织沉默调节蛋白1活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途组织沉默调节蛋白1（SIRT1）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT1脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定组织裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶（histonedeacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（classI）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（classII）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。种类III（classIII）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于细胞核内，与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53（379至382氨基酸位点）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用比色染料对硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺（波长405nm），由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。用户自备磷酸盐缓冲溶液（PBS）：用于清洗组织样品15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器1.5毫升离心管：用于样品操作和保存的容器（微型）台式离心机：用于组织细胞预处理培养箱：用于反应物孵育96孔板或100微升1厘米光径比色皿：用于反应和比色的容器酶标仪或分光光度仪：用于比色分析注意事项1．本产品为20次操作，包括背景对照2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，背景测定只需1次4．样品须澄清，至关重要5．样品处理时，避免使用蛋白酶YZ剂、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反应完成后即刻进行比色测定7．滤波器可以使用波长400nm替代405nm8．测定值由低到高变化；酶动法测定可以持续60分钟9．测定值吸光读数越高，表明酶活性越高10．比色测定后，比色皿须清洗彻底11．待测样本为核蛋白样品，其蛋白浓度为50微克/20微升；待测样本为组织裂解悬液，其蛋白浓度为200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）12．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度13．沉默调节蛋白1单位活性定义为：在30℃，pH8.0条件下，每分钟内能够释放1微摩尔对硝基苯酚所需的酶量作为一个活性单位14．本公司提供系列组蛋白脱乙酰基酶检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 血液葡萄糖-6-磷酸脱氢酶酶动力比色法定量检测试剂盒

  血液葡萄糖-6-磷酸脱氢酶酶动力比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途血液葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）活性酶动力比色法定量检测试剂是一种旨在通过特异反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）还原后峰值的，即采用比色法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种（动物、人体、昆虫等）血液样品中包括白细胞、红细胞、血浆和血清等葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（Glucose-6-phosphatedehydrogenase；G6PD）是一种细胞浆中的酶，参与磷酸戊糖代谢通路，通过维持还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）水平，提供细胞还原性能量，进而保持谷胱甘肽水平，帮助细胞，例如红细胞，防止氧化损伤。同时NADPH的产生，促进组织细胞（例如肝脏、乳腺、脂肪组织、肾上腺等）生物合成脂肪酸、类异戊二烯等。在植物中，存在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的多种异构体，位于细胞浆、质体基质（plastidicstroma）、和过氧化体。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷将导致急性溶血性贫血，即蚕豆病。基于葡萄糖-6-磷酸（D-glucose-6-phosphate）在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的作用下，转化为6-磷酸葡萄糖酸内脂（6-phosphoglucono-δ-lactone）产物后，同时其辅酶因子氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（oxidizednicotinamideadeninedinucleotidephosphate；β-NADP）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate；β-NADPH），通过测定吸光值的变化（340nm波长），来定量分析葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的总活性。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒说明书

  细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细菌蛋白酶（PROTEASE）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过底物偶氮酪蛋白受到蛋白酶水解，产生橘红色产物的吸光峰值的变化，即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良、成功实验证明的。其适用于各种细菌细胞裂解液以及培养上清样品蛋白酶的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景蛋白酶（protease）又称为肽酶（peptidase）或蛋白质酶（proteinase），是一类蛋白水解的酶，属于水解酶（hydrolase）家属中一员，存在于所有生物体内。通过肽键的水解，进行蛋白质的分解代谢，参与体内血液凝结、补体系统、凋亡、细胞生长和分化等一系列生理活动。蛋白酶基本分成6类，包括丝氨酸（serine）、苏氨酸（threonine）、半胱氨酸（cysteine）、谷氨酸（glutamate）、天冬氨酸（aspartate）、金属（metalloprotease）蛋白酶等；也可以分成酸性、中性和碱性蛋白酶等；还可以分成内切肽酶，例如胰蛋白酶（trypsin），和外切肽酶，例如羧基肽酶A（carboxypeptidase）。细菌蛋白酶与碳和氮循环有关；作为外毒素（exotoxin），也是细菌致病的毒力（virulence）因子；同时细菌蛋白酶可以应用于食品、制药、皮革、诊断、水处理、银回收和洁净剂工业等。同时据此用以识别革蓝氏阴性细菌，例如枯草芽孢杆菌（Bac.Subtilis）等。基于底物偶氮酪蛋白（azocasein或sulfanilamideazocasein），在细菌蛋白酶的催化水解下，产生橘红色产物，通过其吸收峰值的变化（440nm波长），来定量分析蛋白酶的总活性。其反应系统为：产品内容裂解液（ReagentA）毫升反应液（ReagentB）毫升终止液（ReagentC）毫升中和液（ReagentD）毫升阴性液（ReagentE）微升产品说明书1份保存方式保存反应液（ReagentB）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；终止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蚀性，注意操作安全；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于样品制备恒温水槽：用于孵育反应比色皿：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析实验步骤样品准备准备好500微升待测细菌（OD600＝0.4至0.8，即1至2X107细胞/毫升）转移到到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为1000g（或3500RPM，例如EPPENDORF5415）小心抽去上清液加入xx微升裂解液（ReagentA），充分混匀QL涡旋震荡15秒置于冰槽里15分钟放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心移取500微升上清液到新的预冷的1.5毫升离心管移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－30030.1）即刻放进－70℃保存或置于冰槽里继续后续操作测定准备准备好待测样品（例如细菌裂解萃取液或培养上清等），置于冰槽里设定好分光光度仪（温度为37℃）：波长440nm，并置零实验开始前，将反应液（ReagentB）置于65℃恒温水槽孵育20分钟后使用三、背景测定移取xx微升反应液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管加入xx微升阴性液（ReagentE）上下倾倒数次，混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液（ReagentC）涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管加入xx微升中和液（ReagentD），混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照样品活性测定移取xx微升反应液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管加入100微升待测样品（蛋白总量100微克）（注意：样品需澄清）上下倾倒数次，混匀在37℃温度下孵育30分钟加入xx微升终止液（ReagentC）涡旋震荡5秒在冰槽里孵育15分钟即刻放进4℃微型台式离心机离心15分钟，速度为3000g小心移取500微升上清液到新的1.5毫升离心管（注意：沉淀物为橘红色）加入xx微升中和液（ReagentD），混匀转移到比色皿里即刻放进分光光度仪检测，此为样品读数计算样品活性注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套终止液（ReagentC）和中和液（ReagentD）具有腐蚀性，注意操作安全系统检测时，背景测定只需一次样品须澄清，至关重要比色测定后，比色皿须清洗彻底建议待测样本的蛋白浓度为100微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度蛋白酶活性单位浓度定义：在37℃下，pH7.5的情况下，每单位酶在单位时间内（每分钟）产生0.01吸光值的升高变化本公司提供系列细菌生理生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-19 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人 （Human） 对氧磷酶 ELISA 检测试剂盒

  人(Human)对氧磷酶ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：paraoxonase试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知paraoxonase浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将paraoxonase和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中paraoxonase的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：1600uKat/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗paraoxonase抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：1600uKat/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。800uKat/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液400uKat/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液200uKat/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液100uKat/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液50uKat/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0uKat/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（uKat/L）A16001600样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的paraoxonase标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的paraoxonase含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-1600uKat/L4、敏感度：1.0uKat/L[详细]

  2018-09-14 10:00

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人对氧磷酶（PON）ELISA检测试剂盒使用说明书

  人对氧磷酶（PON）ELISA检测试剂盒使用说明书[详细]

  2014-05-27 00:00

  专利

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人 （Human） 对氧磷酶 （PON） ELISA 检测试剂盒说明书

  人（Human）对氧磷酶（PON）ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：paraoxonase试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知paraoxonase浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将paraoxonase和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中paraoxonase的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：1600uKat/L1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗paraoxonase抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料1．蒸馏水。2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3．振荡器及磁力搅拌器等。安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：1600uKat/L（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。800uKat/L（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液400uKat/L（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液200uKat/L（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液100uKat/L（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液50uKat/L（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0uKat/L（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。2．洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9．在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（uKat/L）A16001600样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B800800样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的paraoxonase标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的paraoxonase含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-1600uKat/L4、敏感度：1.0uKat/L[详细]

  2018-09-14 10:01

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 人对氧磷酶（PON）ELISA试剂盒说明书

  电话：021-6533363955229872网址：http://www.westang.com人对氧磷酶（PON）ELISA试剂盒（用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内）原理本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人PON单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的PON与单抗结合，加入生物素化的抗人PON，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，Z后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，PON浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中PON浓度。试剂盒组成（2-8℃保存）酶标板（CoatedWells）96孔酶标抗体工作液（EnzymeConjugate）12ml10×标本稀释液（SampleBuffer）12ml20×浓缩洗涤液（WashBuffer）50ml标准品（Standards）：800ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗体工作液（BiotinylatedAntibody）12ml终止液（StopSolution）12ml准备试剂与收集血样1.收集标本：血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测，2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，避免反复冻融。2.标准品液配制：使用前加入4ml蒸馏水混匀，配成200ng/ml的溶液。设标准管8管，**管加标本稀释液900ul，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在**管中加入200ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，移至第二管。如此反复作对倍稀释，从第七管中吸出500ul弃去。第八管为空白对照。3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。4.洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）检测程序1.加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。2.洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。3.每孔中加入**抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。4.洗板：同前。5.每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。8.每孔加入100ul终止液混匀。9.30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。结果计算与判断1.所有OD值都应减除空白值后再行计算。2.以标准品20、10、5、2.5、1.25、0.625、0.312、0ng/ml为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。3.根据样品OD值在该曲线图上查出相应PON含量即可。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的PON检测浓度小于0.16ng/ml。2.特异性：可同时检测重组或天然的人PON。不与人其它细胞因子有交叉反应。3.重复性：板内、板见变异系数均小于9.6％。注意事项1.以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。2.洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致极ng确度误差及OD值错误地升高。3.板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。4.本试剂盒宜置4oC冰箱保存。5.本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！[详细]

  2018-09-13 10:01

  产品样册

  |

  • 
  • 
  • 
  • 

• 血液葡萄糖-6-磷酸脱氢酶酶动力比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  血液葡萄糖-6-磷酸脱氢酶酶动力比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2014-12-25 00:00

  期刊论文

  |

  • 
  • 
  • 
  •