ELISA试剂盒加样步骤详解

　　ELISA试剂盒加样步骤详解

　　一、加样前准备

　　试剂平衡‌

　　从冰箱取出试剂盒，室温(20-25℃)平衡15-30分钟，避免冷凝水影响稀释精度‌。

　　未使用的板条需密封保存于4℃(含干燥剂)‌。

　　样本处理‌

　　血清/血浆‌：血液静置1-2小时后离心(3000rpm，15分钟)，避免溶血;短期保存于4℃，长期需-20℃冻存‌。

　　组织样本‌：匀浆后离心取上清，稀释至检测范围内‌。

　　仪器校准‌

　　移液器需定期校正，枪头避免触碰孔壁或产生气泡‌。

　　二、加样操作流程

　　标准品与样本加样‌

　　标准品稀释‌：按说明书梯度稀释(如从2000pg/mL倍比稀释至31.25pg/mL)，每孔加50-100μL‌。

　　样本加样‌：

　　每孔先加40μL稀释液，再加10μL样本(终稀释度5倍)‌。

　　加样角度45°，贴孔壁液面交界处加入，避免溅出或残留气泡‌。

　　对照设置‌

　　空白孔(仅稀释液)、阴性/阳性对照孔需同步加样‌。

　　孵育‌

　　封板膜密封后，37℃避光孵育30-90分钟，确保抗原抗体充分结合‌。

　　三、关键注意事项

　　加样顺序‌：标本→检测抗体→底物→终止液，顺序一致以保证显色时间均一‌。

　　防污染‌：每样本更换枪头，避免交叉污染‌。

　　液量控制‌：加样体积误差需<1%，否则影响OD值准确性‌。

　　四、常见问题处理

　　气泡干扰‌：轻拍板底或离心去除‌。

　　孔壁残留‌：加样后轻晃混匀，避免液体附着孔壁上部‌。

　　(注：操作需严格遵循试剂盒说明书，不同品牌可能存在细节差异‌。)

　　注：以上资料仅供参考，不作为实验数据，具体请咨询品牌供应商或技术老师;

　　天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。