流式细胞术中FSC和SSC的意义及应用 | 上海富衡

流式细胞术（Flow Cytometry）是一种重要的细胞分析技术，可以在短时间内对大量细胞进行多参数分析，包括细胞大小、结构、表面标志以及功能状态。在流式细胞术中，FSC和SSC是最基本的两个光学参数，它们为细胞群体的区分和特征分析提供了核心信息。

1. FSC（Forward Scatter，前向散射）

定义：
FSC指的是当激光光束照射到细胞时，沿光束方向散射的光信号。它主要反映细胞的体积或大小。

原理：

• 激光照射在细胞上，细胞的大小越大，散射光沿前方的强度越高。

• FSC信号强度可以用来初步区分不同类型的细胞。例如，在外周血中，淋巴细胞体积较小，单核细胞较大，中性粒细胞最大。

应用：

• 根据FSC进行细胞大小的区分。

• 在细胞培养或免疫学实验中，通过FSC可排除碎片或死细胞，保证分析的准确性。

2. SSC（Side Scatter，侧向散射）

定义：
SSC指的是当激光光束照射细胞时，垂直于光束方向散射的光信号。它主要反映细胞的内部结构复杂度或颗粒度。

原理：

• 细胞内部包含的颗粒、核、内质网或其他胞器越多，光的侧向散射就越强。

• SSC信号强度可以帮助区分细胞类型。例如，中性粒细胞具有较高的颗粒度，淋巴细胞颗粒度低。

应用：

• 区分不同类型的白细胞：在FSC-SSC双参数图中，不同细胞群体会形成不同的聚类。

• 检测细胞活性或功能状态，如活化细胞通常颗粒度增加。

3. FSC与SSC联合分析

在流式细胞术中，FSC和SSC常被联合用于绘制散点图（dot plot），从而快速识别和区分不同类型的细胞群体：

• 横轴（FSC）： 细胞大小

• 纵轴（SSC）： 细胞颗粒度

例如，在血液样本分析中：

• 淋巴细胞：小体积（低FSC）、低颗粒度（低SSC）

• 单核细胞：中等体积（中FSC）、低颗粒度（低SSC）

• 中性粒细胞：大体积（高FSC）、高颗粒度（高SSC）

通过FSC和SSC联合分析，研究者可以对样本进行初步分类，并进一步进行表面标志染色或功能性分析。

4. 总结

FSC和SSC是流式细胞术中最基础但最关键的两个参数，分别代表细胞的大小和颗粒度。

• FSC（Forward Scatter） → 反映细胞体积

• SSC（Side Scatter） → 反映细胞内部结构复杂度

联合使用FSC和SSC，不仅可以快速识别和分离不同细胞群体，还为后续的多参数分析提供基础。掌握这两个参数的意义，是流式细胞术实验设计和数据分析的核心技能。