高通量培养技术与摇床 如何进行突变筛选?
高通量培养技术增加了人们对微生物及细胞在快速培养过程中行为的了解。目前,大部分高通量培养技术主要通过缩小培养体积,过程中微型化在线监测, 以及系统全自动化来实现的。主要用于菌种筛选、哺乳动物细胞系监控、微生物蛋白表达重组子的筛选、分子进化过程中的突变筛选等。
近年来,微量高通量微生物筛选法已在欧洲等实验室采用。其基本方法是以96孔微孔板作大量培养的容器,每孔可先加入一定量的培养液,再用多点(12点)接种器快速接种纯菌株,每小时约可接40000个不同变异株,每天可筛选2万~3万株,经适当培养后,可快速对每孔中的代谢产物进行自动检测,工效极高。
如何在摇床上培养?
使用深孔板或微孔板,可以获得足够数量的蛋白质,用于后续平行批次的分析,并且可以减少最 终流程之前的步骤数量。
1、3mm振幅结合高搅拌(振荡)速度
即使在小型培养容器中,为了实现最 大的氧化和最 佳混合,需要一个适合此要求的小振幅,以及高达1000 min-1的搅拌速度。同时,所需的液体体积较小,从而降低了培养基的成本。
2、大容量培养摇床
为了尽可能有效地利用有限的实验室空间进行筛选应用,可以使用多个叠加摇床。向下打开箱门大大节省了空间,并且几乎不需要额外的空间用于连接、通风和维护。
3、配备适当的摇床
只有在适宜的培养条件下,高效筛选才能成功。其中包括温度均匀性、精确的CO2调节和冷却以及无冷凝水加湿。这可以防止液体通过蒸发而损失,这就是它必不可少的原因,特别是在小体积的微孔板和深孔板的情况下。在筛选细胞培养物时,还建议考虑摇床的卫生设计,例如抗 菌表面,可以防止污染。
4、与自动化处理解决方案兼容
孔板培养可借助液体处理设备进行自动处理,然后在孔板评估分析设备的帮助下对其进行分析结果。可以节省时间、体力、也可以节省成本。
标签:微量高通量微生物筛选法 摇床
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