DBS 干血斑应用特集 2: 精准品种鉴定

你能分得清以下两对

狗狗分别是什么品种吗？

图片来源于网络1

如今饲养宠物成了不少民众增添生活乐趣的方式。随着宠物市场的快速发展，人们对于宠物的品种、血统等信息有着更高的关注。然而在 “宠物经济” 升温的同时，宠物消费纠纷也频频发生。据国内一项消委会的调查2，宠物消费类投诉主要聚焦于宠物宣传与实际不符。其中，最主要问题是商家以低价品种冒充高价品种卖给消费者以谋取暴利。

动物的品种鉴定方法比较

目前对宠物品种鉴定主要是通过对动物的外貌特征和行为特征进行分析和比较，这对于普通消费者具有不小的难度。如上图所示，本身有些品种的宠物外貌就极其相似，再加上 “宠物美容” 的加工，基本可以达到真假难辨的程度。

相比于外貌和行为特征，遗传特征可以更准确地鉴定动物的品种，比如基因分型就是一种动物的精 准品种鉴定方法。通过对动物的 DNA 进行 PCR (聚合酶链反应) 扩增和测序，可以检测特定的基因或基因组合，从而精 准地确定动物的品种。

该技术对品种鉴定的准确率远高于外貌和行为特征鉴定的方法。它不仅可以用来进行鉴定宠物品种的鉴定，还可以准确鉴定宠物的血缘关系 (如父母、兄弟姐妹等)，筛查宠物遗传疾病和辅助宠物的选种育种等工作。另外，基因分型也是宠物个体永 久且不可伪造的身份标识，可用于对丢失或被盗的宠物进行身份鉴定。

动物的精 准品种鉴定

应用领域

动物精 准品种鉴定除了上述在宠物市场方面的应用，在其它领域也具有十分重要的应用：

通过进行精 准的品种鉴定，可以检测动物是否携带特定的遗传疾病基因，从而帮助饲主更好地了解宠物的健康状况，进行相应的健康管理和疾病预防。

在畜牧业中，对于畜禽的品种和血统信息管理，以及对于提高养殖效益和优化育种计划具有重要意义。

在科研领域，需要对实验动物野生型和突变型进行精 准的鉴定，研究特定基因分型对于生理、病理和药物的影响。

在动物保护领域，通过对野生动物进行精 准的品种鉴定，可以更好地了解野生动物的遗传多样性、种群结构和迁徙路径等信息，从而进行科学研究和保护管理。

干血斑：方便的血样采集

目前用于动物品种鉴定的基因分型采用的方法是 PCR 法 (聚合酶链反应)，需要在诊所由医师抽取宠物的静脉血液进行采样。静脉取血的取血量大，且过程比较复杂，需要动物医师具有丰富的经验和饲主的配合。取血过程中，宠物往往会出现抵触情绪，有时甚至会受到惊吓。

干血斑 (Dried blood spots, DBS) 是一种新型的血液采集和储存方法。它将微升级末梢血采集到样品卡上，干燥后形成斑点。该方法采样过程简单方便，饲主可自行操作；侵入性小，特别适合对小型动物 / 宠物和实验动物进行血样采集。相比于液态血，固态的干血斑具备更好的稳定性和生物安全性，可实现样品的常温运输，更可以以更温和的条件储存样品，构建生物样本库。

DBS 干血斑应用案例: 

转基因小鼠的基因分型

转基因小鼠在繁殖后，由于基因重组，第二代小鼠需要进行转基因遗传鉴定，以保持传代后基因型的一致。目前的通常做法是剪取小鼠尾部或耳部组织样品，然后提取核酸进行鉴定。而干血斑采样是一种微创采样技术，创口小，需要的血量小，可减少小鼠损伤。

样本

转基因小鼠干血斑

(客户提供的纯化核酸样本) 

检测目标

转基因小鼠特异性基因序列

卡片

Ahlstrom AutoCollectTM 

样本运输条件

室温

提取方法

直接提取，spin column 纯化

检测方法

PCR (聚合酶链反应)，

琼脂凝胶电泳

结果

通过 DBS 干血斑微量采样，可成功鉴定出小鼠基因型。其方便、微量的采血和样本室温运输的特点使其在动物的精 准品种鉴定领域具有巨大的发展潜力。

同期

加推

第十五届东西部小动物临床兽医师大会，集合由 57 个省市小动物兽医师学（协）会的力量，共同举办。大会旨在推动中国小动物临床兽医技术与国际接轨，提升中国小动物兽医师的整体水平，推广世界先进小动物诊疗技术，展示国际领先的宠物医疗设备、宠物药品、饲料及试剂等。

大会将于 2023 年 5 月 23 日 - 25 日在青岛举行，力扬将参展此次盛会，推出 CAMAG 全自动干血斑萃取系统 DBS-MS 500，从自动化方向对传统干血斑技术进行的一次全面升级，可实现全自动、快速、无人值守的干血斑样品制备，并可结合质谱、PCR、NGS 测序及 ELISA 等检测技术，应用于以下领域：

• 健康生物标记物检测

•  治 疗药物监测

• 基因组检测

• 感染检测

• 生物样本库

• 药物的临床前试验

• 食品安全

全自动干血斑 

萃取系统

参考来源:

1. https://www.akc.org/expert-advice/lifestyle/dog-breed-look-alikes/

2. https://www.songjiang.gov.cn/xwzx/001001/20221129/5021e78c-4914-49fa-8eb7-6146a4169c0b.html

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