组织/细胞RNA提取指南，彻底摆脱选择综合征！

图1.DNA和RNA的结构

人体一个细胞含RNA约10pg（含DNA约7pg）。在细胞中，根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA（转运RNA），rRNA（核糖体RNA），mRNA（信使RNA）。mRNA含量低，占细胞总RNA的1%~5%。核糖体RNA特点含量高，占细胞总RNA的80%~85%。

表1：RNA的结构和功能

随着高通量组学技术的应用，在高等哺乳动物中已发现高达数十万种非编码RNA，根据结构与功能可对其进行科学分类和系统命名，如tRNA、rRNA、snRNA、snoRNA、siRNA、miRNA、piRNA和lncRNA等。非编码RNA是当今生命科学发展最为迅速的前沿领域之一，它不断更新人们对生命本质的认识，为生物遗传育种及人类重大疾病的干预、防治和药物研究等提供全新的思路与技术(Amaral et al，2008)。

图2.非编码RNA的生物学功能（Cell. 2019 Nov 14; 179(5): 1033–1055.）

RNA研究的第一步为RNA提取，高质量的RNA是进行转录组测序、RT-PCR等试验的基础，然而由于RNA单链结构的不稳定性和无处不在的RNA酶，使得RNA在提取过程中容易发生降解，同时，传统的RNA提取方法毒性大，因此，提取出高质量的RNA，选择合适的提取产品非常重要！

对于常规的新鲜或冻存的组织、贴壁细胞、悬浮细胞RNA提取，我们首推MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit  细胞/组织总RNA提取试剂盒19221ES，适用于10-20 mg动物组织或(1-5)×10⁶个动物细胞的总RNA提取纯化。

取10⁶个杂交瘤细胞，分别使用19221和TRIzol（货号：10606ES）提取总RNA。之后测定浓度和琼脂糖凝胶电泳；同时取2 μL，使用Hifair^® Ⅲ One Step RT-qPCR SYBR Green Kit（货号：11143ES）进行定量测试小鼠GAPDH。结果显示，MolPure^® Cell/Tissue RNA Kit能稳定提取RNA，RNA产量高，完整度较好。

图 2.RNA 质量和浓度

图3.一步法反转录定量结果 （注：绿色为 19221，蓝色为 Trizol）

老师们可能会疑问为什么不首推Trizol或Trizol相关的产品呢？因为TRIzol有它固有的缺点：

如果老师们从成本的角度考虑，我们也有性能优异的Trizol提取产品。

MolPure^® TRIeasy Plus Total RNA Kit总 RNA 提取试剂盒（带离心柱）19211ES是利用MolPure^® RNA Column A1和改进的异硫氰酸胍/酚一步法（TRIzol法）来提取样品中的总RNA，适用于TRIzol法所能提取的所有样本，包括各种动植物、细菌和细胞样品。该试剂盒方便快捷，1 h完成可完成操作，且不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程。

图 4.RNA 质量和浓度