如何正确配置和储存ELISA试剂盒中的各组分?

　　如何正确配置和储存ELISA试剂盒中的各组分?

　　以下是本生ELISA试剂盒中各组分的正确配置与储存方法，综合实验操作规范及稳定性要求：

　　一、标准品配置‌

　　冻干标准品重构‌

　　使用前15分钟内加入1ml蒸馏水或指定稀释液(如样品稀释液)复溶。

　　轻柔涡旋或反复颠倒混匀，静置10分钟确保完全溶解。

　　梯度稀释‌

　　初始浓度通常为40ng/ml，通过倍比稀释(如1:1)制备系列浓度(20ng/ml至0.625ng/ml)。

　　稀释时避免直接在微孔板中操作，需使用独立离心管。

　　二、液体组分储存‌

　　酶标抗体/检测溶液‌

　　生物素化抗体或HRP标记物需按说明书稀释(如1:100用检测稀释液A配制)，现配现用。

　　未用完的稀释后试剂建议2-8℃保存，24小时内使用。

　　洗涤液‌

　　浓缩洗涤液需按比例稀释(如1:20或1:30)，稀释后室温稳定1周。

　　三、样本处理与保存‌

　　血清/血浆‌

　　采集后静置10-20分钟，2000-3000rpm离心20分钟取上清。

　　短期(48小时内)存于2-8℃，长期需-20℃或-70℃冷冻，避免反复冻融(≤3次)。

　　组织匀浆‌

　　用预冷PBS匀浆后离心，上清液分装冻存(-20℃以下)。

　　四、试剂盒整体储存条件‌

　　未开封试剂盒‌：2-8℃保存，有效期通常为6个月(注意包装标注日期)。

　　开封后组分‌：

　　酶标板：密封后2-8℃干燥保存，1个月内使用。

　　TMB显色液：避光冷藏，变色则弃用。

　　五、关键注意事项‌

　　避免污染‌：各组分使用无菌枪头，避免交叉污染。

　　稳定性验证‌：若标准曲线异常(如R²<0.99)，需检查标准品配制或储存条件。

　　(注：不同品牌试剂盒可能存在差异，请以实际说明书为准，仅供参考。)

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