Topoisomerase I 助力5min完成克隆
图1. Topoisomerase I原理图[1]
技术路线
识别切割:Topoisomerase I识别DNA序列5’-(C/T)CCTT-3’,并且能够在该位点对DNA进行切割;
固定:Topoisomerase I借助DNA断裂的能量将酪氨酸残基与载体DNA 3’末端形成共价键,从而固定在DNA载体上;
连接:在加入目的DNA片段(PCR Product)后,目的DNA片段的5'端羟基攻击载体片段的磷酸键,释放能量,使得目的DNA片段的 5'端羟基与载体片段的3'端磷酸基团连接在一起;
脱落:Topoisomerase I从载体分子上脱落。
图2. TOPO原理图
应用到TOPO克隆,克隆效果优于A品牌
图3. Topoisomerase I运用到TOPO克隆效果图
外切酶残留
图4. 外切酶残留检测
E. coli基因组DNA残留< 1 copy/5U
图5. E. coli基因组DNA残留检测
产品名称 |
产品货号 |
产品规格 |
Topoisomerase I |
100 / 500 U |
全部评论(0条)
推荐阅读
-
- Topoisomerase I 助力5min完成克隆
- 适用于TOPO克隆、NGS 建库中的接头连接等
-
- 新品 | 5min连接任意PCR产物,新TOPO克隆!(内含福利)
- 仅需5 min就能连接任意PCR产物(TA/Blunt)
-
- 精品推荐 | 仅需5min!高效完成反转录实验
- 具有稳定的检出率、特异性、产量保证
-
- 涨知识 | 克隆专题四:分子克隆连接方法
- 小翌克隆课堂开课了!
-
- 涨知识 | 克隆专题七:分子克隆应用工具
- 小翌克隆课堂开课了!
-
- 涨知识 | 克隆专题五:分子克隆转化方法
- 小翌克隆课堂开课了!
-
- 提醒!“克隆王”大赛Q&A,下一个克隆王就是你!
- 叮!亲爱的参赛者们,您有一份赛事提醒,请查收~
-
- 涨知识 | 克隆专题二:不同分子克隆方法介绍(下)
- 克隆是英文“clone”或“cloning”的音译,而英文“clone”则起源于希腊文“Klone”,原意是指以幼苗或嫩枝插条。1963年J.B.S.Haldane在题为“人类种族在未来二万年的生物可能性”的演讲上采用“克隆(Clone)”的术语,把“克隆技术”带到了人们的视野中。
-
- 涨知识 | 克隆专题三:分子克隆载体、片段制备方法
- 小翌克隆课堂开课了!
-
-
- 涨知识 | 克隆专题八:一步法快速克隆FAQ——常见问题解答
- 小翌克隆课堂开课了!
-
- 涨知识 | 克隆专题六:分子克隆筛选与鉴定技术
- 小翌克隆课堂开课了!
-
- Nature | 翌圣克隆试剂盒助力揭示核仁超微精细结构与功能
- 分子克隆技术发展至今,从最经典的酶切酶连法到简便、快速的同源重组法,广受科研小伙伴的青睐!翌圣一步法快速克隆试剂盒(Cat#10911、10922)自上市以来,受到了众多小伙伴的支持!好评如潮!
-
- 新品上市 I 泰林生物助力实验室液体除 菌
- 随着生物技术的不断发展,培养基和各类生物活性试剂的种类日益丰富。不少无菌液体需添加热敏感成分以达到最终的使用效果。灭菌方法决策树中,过滤除 菌是对热敏感液体除 菌的最优选择。
-
- 科研匠心·薪火相传 | 翌圣十载钻研克隆试剂,助力科研产出高分成果!
- 翌圣已成功举办两届“克隆王”挑战赛,累计参与人数超过200人。用户参与度高,反馈评价好!
-
- 翌圣克隆试剂盒累计助力发文100+篇,累计影响因子达800+
- 克隆试剂盒,一个大家做克隆必然会用到的东西。据不完全统计,截至2022年8月31日,小翌通过小伙伴们的反馈和线上文献平台的资源,发现有136篇文章使用了翌圣克隆试剂盒,累计影响因子达831.27,其中包括一步法快速克隆试剂盒以及TOPO克隆试剂盒
-
- 国际期刊 | 翌圣克隆试剂助力浙大乐敏团队NSR发文(IF20.6)
- 翌圣同源重组试剂盒助力浙大团队构建菌毛基因缺失株,揭示bvSP基因通过菌毛功能的缺失减缓宿主的促炎反应以实现免疫逃逸的宿主适应新机制。
-
- 克隆的那些事(下)
- 上回我们讲到载体与目的片段的制备就戛然而止了。载体与目的片段制备成功之后剩下的就是连接跟转化。一步法同源重组原理上期我们已经讲过。接下来就该进行反应体系的计算,很多小伙伴在这一关就被难住了。
①本文由仪器网入驻的作者或注册的会员撰写并发布,观点仅代表作者本人,不代表仪器网立场。若内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们立即通知作者,并马上删除。
②凡本网注明"来源:仪器网"的所有作品,版权均属于仪器网,转载时须经本网同意,并请注明仪器网(www.yiqi.com)。
③本网转载并注明来源的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点或证实其内容的真实性,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品来源,并自负版权等法律责任。
④若本站内容侵犯到您的合法权益,请及时告诉,我们马上修改或删除。邮箱:hezou_yiqi
参与评论
登录后参与评论