293细胞无血清培养基，解锁细胞培养无忧秘籍！

2024-09-26 00:00:00 17阅读次数

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细胞培养作为现代生命科学研究的重要手段之一，为我们深入探索生命的奥秘提供了有力的工具。通过在体外模拟体内环境，让细胞在适宜的条件下生长、增殖和分化，可以研究细胞的生理功能、疾病发生机制以及开发新的治疗方法。然而，要实现高质量的细胞培养并非易事，培养基的选择至关重要。

含血清培养基

在传统的细胞培养中，含血清培养基被广泛使用。血清中含有丰富的营养成分和生长因子，能够支持细胞的生长和增殖。然而，血清培养也存在诸多缺点。

血清的成分复杂且不明确，不同批次之间存在差异；

血清可能携带病毒、支原体等潜在污染物，增加了细胞培养被污染的风险；

在蛋白表达纯化等一些实验中，血清中的成分可能会干扰实验结果。

无血清培养基

无血清培养基是指在细胞培养过程中不添加血清，而是通过精确调配各种营养成分、生长因子和其他添加剂来满足细胞生长需求的培养基。从最初的尝试到如今的广泛应用，无血清培养基经历了多年的发展和完善，逐渐成为细胞培养的主流选择之一，它具有以下显著优点：

成分精准可控

无血清培养基的成分经过科学调配，明确且稳定。每一种成分的作用都清晰可辨，确保了实验结果的高度可重复性。这对于需要严格控制实验条件的研究和生产过程至关重要；

杜绝污染风险

由于不含有血清，极大地降低了潜在的污染风险，为细胞培养提供了一个纯净、安全的环境；

优化细胞生长

针对不同类型的细胞，如293细胞，无血清培养基能够提供特定的营养成分和生长因子组合，促进细胞快速增殖并维持良好的细胞状态。

产品介绍

CelCulSF™293 Cell Culture Medium（Serum-free）培养基为无动物源、无蛋白的完全化学成分限定培养基。适应于HEK293各细胞系细胞（如HEK293F，HEK293T，HEK293H，Expi293 等）规模化无血清悬浮培养及后续转染表达。产品经过定向优化，尤其适应于AAV及蛋白等相关产品研发和生产过程，可支持细胞高密度扩增及稳定的产物表达。

使用秘籍

技术参数

参数	设定值
50mL TPP管	培养体积：10-20 mL
125~1000 mL摇瓶	培养体积：摇瓶总体积的20-30%
摇床转速	TPP：转速220 rpm, 摇瓶 110-130 rpm
摇床振幅	50 mm
培养基	CelCulSF^™293 Cell Culture Medium（Serum-free）
接种密度	0.5×10⁶ cells/mL
培养温度	37℃
CO₂%	5%
相对湿度	80%RH

细胞驯化

通常，在原用培养基中生长的HEK293细胞需要转移到由50%原用培养基和50%培养（CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium）组成的新培养基中进行适应性生长。

将原用培养基中生长的细胞移入新培养基（50% CelCulSF™293 Cell Culture Medium + 50% 原用培养基），接种密度为0.5×10⁶/mL。

细胞培养至48±3小时后，建议按此方法进行至少3次细胞适应性传代。当细胞活率高于90%时转入100% CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培养基培养。

细胞培养

37℃水浴中预热CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium培养基；

接种密度为1.0×10⁶viable cells/mL。培养 48±3 小时后，取0.5mL细胞悬液，用细胞计数仪分析活细胞密度（×10⁶细胞 /mL）和活细胞（%）；

传代前，如果细胞密度低于2.0 ×10⁶/mL，或细胞活率低于80%，需要150g - 300g，离心5分钟处理细胞。轻轻弃上清，使用100%新鲜培养基按0 .5×10⁶/mL重悬细胞；

如果传代前细胞密度大于2.0×10⁶/mL且活细胞率高于85%，则将适量的细胞悬液转移到新摇瓶（或TPP管）中，并用新鲜培养基直接调整最终培养体积进行细胞传代，然后在规定的环境条件下培养细胞；

如果传代比（传代后的种子密度：传代前的细胞密度）大于1:4，细胞需要离心并重新悬浮在100%新鲜培养基中。

蛋白表达，腺相关病毒病毒等在悬浮293细胞上的表达

细胞在CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium 中培养；

72±3 小时后，取 0.5 mL细胞悬液，用细胞计数仪分析活细胞密度（×10⁶/mL）和细胞活率（%）；

用相同体积的预热培养基稀释培养物（培养物体积：待添加培养基体积=1:1）；

根据病毒培养工艺，接种病毒，并继续培养病毒至收获。可根据实际生产工艺进行优化或联系产品相关负责人。

FAQ

问

293 无血清培养基可以用于哪些细胞类型？

主要适用于293细胞系，包括HEK293F，HEK293T，HEK293H，Expi293等不同亚型的细胞。

问

与传统含血清培养基相比，无血清培养基有哪些优势？

无血清培养基具有以下优势：成分明确且稳定，避免血清批次差异带来的影响；降低潜在的污染风险；简化实验操作流程；优化细胞生长，满足不同实验需求；具有更高的成本效益。

问

如何判断 293 细胞在无血清培养基中的生长状态是否良好？

可以从以下几个方面判断：细胞形态正常；细胞增殖速度稳定；培养基颜色变化正常，未出现浑浊等异常现象。

问

无血清培养基的保存条件是什么？

建议将293无血清培养基保存在2 - 8℃冰箱中，避免光照和高温。开封后应尽快使用，避免长时间存放。

问

在使用无血清培养基过程中，如果出现细胞生长不良怎么办？

首先检查培养条件是否符合要求，如温度、CO2、浓度等。可以适当调整细胞接种密度、换液频率等。如果问题仍然存在，可以联系Yeasen技术支持团队，寻求专业的解决方案。

选择 Yeasen 293无血清培养基，让你的细胞培养之路更加顺畅无忧！

订购信息

产品名称	产品货号	规格
CelCulSF™ 293 Cell Culture Medium（Serum-free） 293细胞无血清培养基	40141ES80	1000 mL
CelCulSF™ Insect Cell Culture Medium（Serum-free）昆虫细胞无血清培养基	40140ES80	1000 mL
CelCulSF™ Hybridoma Cell Culture Medium（Serum-free）杂交瘤细胞无血清培养基	40143ES80	1000 mL
Serum-Free CellStore Freezing 无血清细胞冻存液 (推荐搭配使用无血清冻存液，效果更佳)	40151ES50	50 mL
Serum-Free CellStore Freezing 无血清细胞冻存液 (推荐搭配使用无血清冻存液，效果更佳)	40151ES60	100 mL