本生教您如何判断ELISA试剂盒的有效性?

　　如何判断ELISA试剂盒的有效性?

　　以下是判断ELISA试剂盒有效性的关键指标及方法：

　　一、标准曲线评估

　　线性关系‌

　　标准曲线R²值应≥0.99，表明浓度与OD值呈强线性相关。

　　检测范围需覆盖样本浓度，最低检测限(LOD)应符合预期。

　　梯度验证‌

　　标准品稀释梯度(如10-1280 ng/ml)的OD值应呈现规律性变化。

　　二、对照品检测

　　阴性对照‌

　　OD值应接近零，排除非特异性结合或污染。

　　阳性对照‌

　　需与预期浓度一致，验证试剂盒检测能力。

　　三、精密度与回收率

　　板内/板间变异‌

　　变异系数(CV)应<10%，确保结果可重复。

　　回收率测试‌

　　加标回收率需达81%以上，反映检测准确性。

　　四、特异性验证

　　交叉反应率‌

　　检测类似物(如GH、IGF-1)的交叉反应率应<10%。

　　五、操作质控

　　显色反应‌

　　TMB底物显色需均匀，终止后黄色稳定。

　　洗涤效果‌

　　彻底洗涤避免残留，降低背景干扰。

　　六、试剂盒质检

　　核对组分完整性，避免使用过期或变质试剂。

　　通过上述指标综合评估，可确保ELISA实验结果可靠。

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