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TRBC1 & TRBC2新品上市!更简单高效评估T细胞克隆性的新方法

来源:贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司 更新时间:2025-02-28 13:30:11 阅读量:211
导读:TRBC1 & TRBC2新品上市!更简单高效评估T细胞克隆性的新方法



① 细胞克隆性检测的意义

细胞克隆性检测是指通过检测细胞群体中是否存在单克隆性增殖,来判断是否存在肿瘤或其他克隆性疾病的诊断方法。克隆性检测在疾病诊疗中具有重要意义,尤其是在血液系统肿瘤、实体瘤和免疫相关疾病的诊断、治疗和预后评估中发挥着关键作用。例如,在淋巴造血系统疾病中,克隆性检测可以区分反应性增殖(如感染引起的免疫细胞增生)和恶性克隆性疾病(如淋巴瘤和白血病)。此外,在自身免疫病中,克隆性检测可用于评估异常T/B细胞的扩增情况,有助于鉴别疾病类型。


② 克隆性检测方法

目前,细胞克隆性检测的主要方法包括基因重排分析(IGH/TCR重排检测)、免疫电泳、荧光原位杂交 (FISH) 、单细胞测序和流式细胞术等。


基因重排分析

利用PCR扩增免疫球蛋白重链 (IGH) 或T细胞受体 (TCR) 基因的可变区,检测克隆性扩增。

优点:灵敏度高,可用于低丰度克隆检测;适用于T/B细胞克隆性分析。

缺点:无法提供细胞形态或表型信息;需要特定的引物设计以及高质量DNA,可能受样本降解影响。


免疫电泳

通过电泳分离血清中的免疫球蛋白,检测是否存在单克隆性免疫球蛋白。

优点:可以快速、高效地对多种蛋白同时进行检测,适用于多发性骨髓瘤等疾病的诊断。

缺点:灵敏度相对较低,且不能直接检测细胞克隆性。


荧光原位杂交

利用荧光探针检测细胞核中特定基因或染色体异常(如BCL2、MYC重排)。

优点:特异性高,可直接观察染色体异常,适用于恶性克隆性肿瘤。

缺点:检测通量有限;对某些克隆扩增的敏感性不足。


流式细胞术

相比上述方法检测细胞克隆性,流式细胞仪检测的最大优势在于,可以同时检测多个标记物,提供更全面的免疫表型信息,通过不同抗原对异常细胞进行设门再精确分析异常细胞的克隆性,特异性更高,适用于淋巴瘤、白血病的克隆性鉴定。


③ 流式如何实现细胞克隆性检测

在B细胞和T细胞淋巴细胞的成熟过程中,抗原受体基因——免疫球蛋白 (IGH) 和T细胞受体 (TCR) 通过在可变 (V) 和连接 (J) 区域,或者在多样性 (D) 区域发生基因重排,从而产生了适应性免疫反应的不同抗原结合部分,因此造就了淋巴细胞抗原特异性受体的广泛多样性,也是免疫系统应对多种病原体的基础。


体细胞基因重排组成TCR示意图


据估计,IGH基因或TCR基因可发生超过200万次重排。两个正常淋巴细胞发生相同重排的可能性可以忽略不计,但是恶性淋巴细胞来源于单个肿瘤细胞,往往表现出相同的IGH或TCR基因重排。因此通过流式细胞术进行细胞IGH或TCR是否存在限制性,便可用于检测淋巴瘤等疾病的细胞单克隆性。


TCR是T细胞表面的特征性标志,根据TCR组成链的不同,可将T细胞分为αβ T细胞和γδ T细胞,其中αβ T细胞约占T细胞的95%~99%,γδ T细胞约占1%~5%。由于αβ T细胞占T细胞的绝大多数且重排率更高,目前流式主要通过对αβ T细胞的TCR的克隆分布检测来评估T细胞克隆性,主要有两种方案:TCR-Vβ受体库检测以及TRBC1/TRBC2检测


TCR-Vβ受体库检测

通过检测TCR β链可变区 (TCR-Vβ) 受体的多样性来进行克隆性检测。正常T细胞TCR-Vβ抗原为多克隆,肿瘤细胞表现为单个克隆的优势增生。公司提供的TCR-Vβ受体库试剂盒(货号:IM3497)包含了8组24个TCR-Vβ抗体,适合于所有流式细胞仪检测。


检测结果图例


正常T细胞TCR-Vβ抗原分布


单克隆性T细胞的异常表达 


由于TCR-Vβ受体的种类比较多,该受体库试剂盒的抗体种类仅覆盖70%左右的T细胞克隆,如果TCR-Vβ家族总和过低,可能提示存在试剂盒无法覆盖的TCR-Vβ克隆性,也可作为单克隆性的证据。


TRBC1/TRBC2检测

与TCR-Vβ受体库检测的是TCR β链的可变区不同,TRBC1/2检测的是TCR β链恒定区结构域的抗体。在TCR基因重排过程中,T细胞受体的β亚基恒定区 (TRBC) 仅有两种多态性,即TRBC1或TRBC2,每个TCR以随机和互斥的方式不可逆地选择两个恒定区域中的一个进行表达,类似于B细胞κ和λ,为多克隆表达。当某一TRBC群体的表达比例大于85%或小于15%时,则提示单克隆性表达。


检测结果图例


健康人外周血流式细胞术结果显示,总T细胞、CD4+(青色)和CD8+(橙色)T细胞上存在多型TRBC表达


单克隆T细胞表达TRBC限制性图例



相比TCR-Vβ受体库复杂的操作,TRBC1/2检测是更简单高效的选择。目前,公司也全新推出了TRBC1/2的检测试剂,感兴趣的小伙伴欢迎垂询或订购!如需要了解更多信息,请与贝克曼库尔特公司的业务代表联系!





参考文献(上下滑动阅览)

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