TRAP染色试剂盒

产品编号：JD005

包装规格：50T/100T

产品简介

抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase，TRAP)为破骨细胞的特异性标志酶，特异地分布于破骨细胞的胞浆，是鉴定破骨细胞的一个重要指标。

本TRAP染色试剂盒中，TRAP染色液以萘酚AS-BI为底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和萘酚，萘酚与重氮盐偶联，形成非水溶性的酒红色物质沉积在酶活性原位，从而实现对抗酒石酸酸性磷酸酶的显色和定位。

来源单核细胞通过特定的破骨诱导培养基(货号：CTCC-Y004)诱导一段时间后，可分化为破骨细胞，经TRAP染色后，细胞胞浆呈紫色或紫红色。

试剂盒组成

保存： 4℃保存，其中染色液-20℃避光保存，有效期3个月。

注意事项

• 本产品仅限于科学研究使用。
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
• 染色液存放一段时间后，偶有棕色不溶物，不影响染色。

操作说明

细胞样本(以48孔板为例)

1. 移除细胞培养液，每孔加入400μL 1号洗涤液清洗，弃液；
2. 每孔加入300μL固定液，室温固定15-30min，弃液；
3. 每孔加入300μL 2号洗涤液，清洗2次；
4. 染色：每孔加入150-200μL TRAP染色液，37℃避光孵育10-15min(待测样品中酒石酸酸性磷酸酶活性较低时，可适当延长孵育时间至30分钟或显微镜下显色至预期深浅)。
5. 每孔加入300μL 2号洗涤液，清洗2次；
6. 显微镜下观察和拍照；
7. 每孔加入300μL保存液，4℃放置，可保存一周。

石蜡切片

1. 石蜡切片的制备：按照常规方法进行取材、固定、洗涤、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、烘片等步骤制备石蜡切片；
2. 二甲苯中脱蜡5-10min；换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5-10min；
3. 无水乙醇5min；90%乙醇2min；80%乙醇2min；70%乙醇2min；水洗 2min；
4. 固定液室温固定 30s～3min，多数情况下 30～60s 即可，水洗；
5. 轻轻向切片上滴加适量染色液，覆盖组织， 37℃避光浸染 45～60min，水洗；
6. (选做)根据实验需要，可选择苏木素进行复染水洗；
7. 显微镜下观察和拍照。

冰冻切片

1. 冰冻切片回温至 37℃，水中浸泡 1～2min；
2. 自然晾干，固定液室温固定 1～3min，水洗；
3. 轻轻向切片上滴加适量染色液，覆盖组织， 37℃避光浸染 45～60min，水洗；
4. (选做)根据实验需要，可选择苏木素进行复染水洗；
5. 显微镜下观察和拍照。

示例

注：实际染色效果会因样品及实验条件的不同而存在差异，本图仅供参考。