MolPure® Cell RNA Kit 培养细胞RNA提取试剂盒

MolPure^® Cell RNA Kit 适用于从 96、24、12、6 孔板培养细胞 (< 1×10⁶)总 RNA 提取。MolPure^® DNA清除/RNA吸附通用柱为本公司特有新型材料，配合本公司独特的缓冲液配方可最大限度将细胞代谢物、蛋白等杂质去除。提取过程不需要用到有毒的酚、氯仿、β-巯基乙醇等有机溶剂，也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便，< 8 min即可完成培养细胞总RNA的提取。提取的 RNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种下游应用实验，如 RT-PCR、RT-qPCR、体外转录、分子克隆等。

产品组分

运输和保存方法

常温运输。室温避光保存，有效期24个月。2-8℃可保存更长时间。

注意事项

1. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

2. 注意观察各溶液是否有析出或浑浊（尤其冬季等室温为低温环境时），可37℃温浴复溶至溶液澄清，避免影响使用效果。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4. 本产品仅作科研用途！

实验前准备

1. 自备设备和试剂：台式离心机、水浴锅或金属浴，1.5 mL RNase-free离心管，液氮，无水乙醇等。

2. 本试剂盒可以抑制RNase活性，不需要低温离心，所有的离心步骤常温进行。

3. 首次使用前，在结合液BD^*（19231-E）瓶中加入标签指定量的无水乙醇（5 T/50 T分别加入2.4 mL/24 mL无水乙醇），充分混匀后使用，并做好标记。

4. 首次使用前，在漂洗液W^*（19231-F）瓶中加入标签指定量的无水乙醇（5 T/50 T分别加入5.2 mL/52 mL无水乙醇），

充分混匀后使用，并做好标记。

操作方法

一、样本预处理

5. 针对贴壁细胞：不需消化，直接裂解；或离心收集细胞后，加入350 μL裂解液LB (< 1×10⁶个细胞)，用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。
6. 针对悬浮细胞：直接离心收集细胞，加入350 μL裂解液LB (< 1×10⁶个细胞)，用移液器反复吹打混匀(直到看不到细胞团为止)。

二、RNA提取

1. 将处理好的匀浆液加到DNA清除/RNA吸附通用柱上(柱子放在2 mL收集管内)，13,000 rpm离心1 min，收集含有RNA的滤液。

2. 估算滤液体积后加入等体积的结合液BD^*(请先确认已加入无水乙醇!)，立即轻柔吹打混匀。

3. 将上述混合液全部加入新的DNA清除/RNA吸附通用柱中，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液。

4. 加入700 μL去蛋白液，室温30 s，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液，将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管中。

5. 加入500 µL漂洗液W^*(请先确认已加入无水乙醇!)，13,000 rpm离心30 s，弃掉滤液。

6. 重复一遍步骤5，将DNA清除/RNA吸附通用柱重新放回2 mL收集管内。

7. 空柱13,000 rpm离心2 min，除去残留漂洗液W^*。

8. 将DNA清除/RNA吸附通用柱放入新的1.5 mL RNase-free离心管中，在膜中央加入30-50 µL RNase-free H₂O，室温放置1 min，然后13,000 rpm离心1 min，收集滤液，即为RNA溶液。样品可置于-80℃长期保存。

【注】：可通过以下方式提高回收产量：①65℃预热RNase-free H₂O；②将RNA滤液再次上柱，室温放置1 min后，洗脱。 

HB230104