Prussian Blue Iron Stain Kit 普鲁士蓝染色试剂盒(铁染色)

正常骨髓中存在一定量的储存铁，以含铁血黄素的形式储存于组织巨噬细胞中，可供有核红细胞利用合成血红蛋白，这种存在于红细胞以外的储存铁称为细胞外铁；部分中、晚幼红细胞及少数成熟红细胞也含有铁颗粒，分别称为铁粒幼红细胞及铁粒红细胞，它们属于细胞内铁。

组织学中常使用普鲁士蓝法检测细胞内、外铁，其检测原理是：在酸性条件下亚铁氰化物能与铁离子（三价）结合形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀（也即普鲁士蓝），定位于含铁部位，该法也是诊断学中检测灵敏度极高的一种铁染色方法。

本试剂盒适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞染色。包括脑阔骨髓细胞涂片及血液细胞涂片的染色检查，另配备核固红做复染以区分含铁部位及细胞其他部位。

产品组分

运输和保存方法

冰袋运输。4 ℃避光保存。有效期1年。

注意事项

1）使用前应恢复室温，用前请摇匀试剂。

2）工作液现配现用。

3）所有玻片及器具应洁净、无铁污染（事先经除铁处理，尤其是载玻片），Perls stain染色时，应根据样本情况调整着色时间。

4）切片脱蜡应尽量干净。组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

5）所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。

6）每次试剂使用后，请迅速盖好密封保存，以免挥发及影响效果。

7）本试剂盒仅限于形态学染色观察使用。

8）冰冻切片和细胞染色，最好根据具体情况摸索实验条件。

9）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

10）本产品仅用于科研用途。

使用方法

工作液配制

临用前，取B和C等量混合即为Perls stain，不宜提前配制。

样品染色

（一）石蜡切片染色：

1、组织固定于Fixation Buffer固定剂中，常规脱水包埋。

2、切片厚度4 μm，常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗1 min。

4、切片入Perls stain (见注意事项3)，浸染20～40 min。

5、蒸馏水充分冲洗2～5 min。

6、入核固红染色液，淡染细胞核1～5 min。

7、自来水冲洗1～5 s。

8、常规脱水透明，中性树胶封固.

（二） 冰冻切片染色：

1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3 min。

2、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。

（三）细胞染色：

1、Fixation Buffer固定剂固定10～20 min。

2、自来水冲洗2次，每次2 min。

3、蒸馏水冲洗2次，每次2 min。

4、染色、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，但操作时间应相应延长。

结果参考

含铁血黄素或三价铁，结果呈蓝色；细胞核、其他组织，结果呈红色。

阴性对照

取相同切片脱蜡至水。入5%草酸孵育2～6 h，经Perls stain，其余步骤同上。结果为阴性。

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